COVID-SErologia na Artrite Reumatoide (COVID-19) (COVID-SERA)

A artrite reumatoide (AR) é o reumatismo inflamatório mais comum, afetando 0,5% a 1% da população europeia. Caracterizada por poliartrite erosiva simétrica e distal, seu diagnóstico é baseado na associação da avaliação clínica combinada com a presença de uma síndrome inflamatória crônica biológica e de anticorpos antipeptídeos cíclicos citrulinados (CCP) e/ou de fator reumatóide. Do ponto de vista prognóstico, alguns fatores permitem predizer o risco de evolução para dano estrutural (erosão óssea), como a positividade do fator reumatoide ou de anticorpos anti-CCP, e requerem a introdução rápida de terapia imunossupressora básica ou bioterapia. No contexto da pandemia de SARS-CoV-2, responsável pela doença COVID-19, o interesse de um teste serológico é essencial do ponto de vista epidemiológico para acompanhar a evolução da pandemia, e adaptar a estratégia de desconfinamento da população em geral ou de pacientes em risco. No entanto, pacientes com AR recebendo bioterapia apresentam um risco aumentado de infecção. Neste contexto de desconfinamento, seria útil uma análise serológica para SARS-CoV-2, antes de iniciar o tratamento futuro dos doentes com AR ou de forma a adaptar o seu tratamento atual.

A detecção de anticorpos direcionados contra SARS-CoV-2 por vários kits de detecção está atualmente em avaliação. À falta de kits de testes sorológicos no mercado francês soma-se a complexidade de verificar a sensibilidade e especificidade desses testes. Por outro lado, a resposta imune ao SARS-CoV-2 é complexa e ainda bastante desconhecida. A presença concomitante de vários isotipos IgA, IgM e IgG é freqüentemente observada. Assim, a troca isotípica de Ig parece não ocorrer corretamente neste caso de doença, o que torna o sorodiagnóstico ainda mais complicado de implementar. A detecção dos IgMs menos específicos seria, portanto, essencial, no caso do SARS-CoV-2. O fator reumatóide (FR) é uma imunoglobulina (Ig), mais frequentemente do tipo M, dirigida contra o fragmento Fc da IgG. Este anticorpo, apesar de não ser diretamente patogênico, está presente com muita frequência em pacientes com AR (70 a 80%), sem ser específico para esta patologia, pois também pode ser observado em outras doenças autoimunes, infecciosas ou hematológicas. A presença de FR IgM, ainda mais em títulos elevados, é problemática na realização de muitos testes sorológicos ou imunológicos, pois esses níveis elevados podem ser responsáveis ​​por resultados falsos positivos.

Durante epidemias anteriores de SARS (SARS-CoV-1 ou MERS-CoV), foram observados resultados falsos positivos de testes sorológicos. Ao detectar anti-SARS-CoV-1 IgG ou IgM em pacientes que não contraíram SARS, foi demonstrado o uso de um kit ELISA, com placas revestidas com um lisado celular de células Vero-E6 infectadas com SARS-CoV-1 para induzir um baixo número de resultados falsos positivos em controles saudáveis ​​(menos de 5%). No entanto, o número de falsos positivos em pacientes com doenças autoimunes foi muito maior, variando de acordo com a patologia (entre 10% e 58%), sendo o maior número de falsos positivos obtidos em pacientes lúpicos. Esse fenômeno pode ser explicado pelo uso de um teste imunológico usando lisados ​​​​celulares não purificados, que contêm antígenos contra os quais os autoanticorpos presentes no soro do paciente podem reagir, distorcendo o resultado do teste. Outras causas de aumento na taxa de resultados falsos positivos foram descritas ao realizar sorologias para SARS-CoV-1, como a presença de neoplasia ativa ou por infecção prévia por outro coronavírus. De fato, outros coronavírus, como HCoV-OC43 e HCoV-229E, exibem um nucleocapsídeo próximo ao do SARS-CoV-1: essa semelhança pode ser a fonte de reatividade cruzada. O mesmo fenômeno foi observado com o mais recente coronavírus: portanto, foi sugerido o uso de antígenos recombinantes de SARS-CoV-2 em imunoensaios, como ELISA, por exemplo. Dada a semelhança entre SARS-CoV1 e SARS-CoV2, é provável que o vários elementos que causam resultados falsos positivos durante testes sorológicos para SARS-CoV-1, em particular a presença de autoanticorpos, incluindo RF, também podem causar resultados falsos positivos ao realizar testes sorológicos direcionados a SARS-CoV-2. Um estudo chinês recente mostrou que uma taxa moderada ou alta de FR foi associada a uma taxa significativa de resultados falso-positivos na pesquisa de anti-SARS-CoV-2 IgM com um kit ELISA, cujas placas foram revestidas com antígeno recombinante. Os autores, portanto, propuseram a inclusão de uma etapa de dissociação da uréia no protocolo ELISA, que parecia melhorar a especificidade do teste, sem alterar sua sensibilidade.

Parece assim essencial avaliar a influência do FR, pelos seus diferentes isotipos (IgG, IgM, IgA), nos vários testes serológicos para SARS-CoV-2 disponíveis em França, de forma a melhor avaliar a especificidade destes testes.

Os investigadores se propõem a avaliar e comparar 3 diferentes testes sorológicos disponíveis para a detecção de SARS-CoV-2 IgG e IgM específicos. A taxa de falsos positivos obtidos para cada tipo de teste será avaliada em soros provenientes de pacientes com AR que nunca tiveram contato com SARS-CoV-2, uma vez que esses soros foram retirados antes de julho de 2019. Pode-se estimar a relação entre a incidência de resultados falso-positivos em ensaios sorológicos SARS-Cov-2 e os níveis de anticorpos anti-RF, bem como a caracterização de FR.