COVID-SErologi vid reumatoid artrit (COVID-19) (COVID-SERA)

Reumatoid artrit (RA) är den vanligaste inflammatoriska reumatismen, som drabbar 0,5 % till 1 % av den europeiska befolkningen. Karaktäriserad av symmetrisk och distal erosiv polyartrit, är dess diagnos baserad på associeringen av den kliniska bedömningen i kombination med närvaron av ett kroniskt biologiskt inflammatoriskt syndrom och av citrullinerade cykliska antipeptidantikroppar (CCP) och/eller av reumatoid faktor. Ur en prognostisk synvinkel tillåter vissa faktorer riskförutsägelse av progression till strukturell skada (benerosion), såsom positiviteten hos reumatoidfaktorn eller anti-CCP-antikroppar, och kräver ett snabbt införande av grundläggande immunsuppressiv terapi eller bioterapi. I samband med SARS-CoV-2-pandemin, ansvarig för COVID-19-sjukdomen, är intresset för ett serologiskt test väsentligt ur en epidemiologisk synvinkel för att följa pandemins utveckling och för att anpassa strategin för avstängning av den allmänna befolkningen eller av patienter i riskzonen. Men RA-patienter som får bioterapi har en ökad risk för infektion. I detta sammanhang av avstängning skulle en serologisk analys av SARS-CoV-2, innan framtida behandling av RA-patienter påbörjas eller för att anpassa sin nuvarande behandling, vara användbar.

Detektion av antikroppar riktade mot SARS-CoV-2 genom olika detektionskit är för närvarande under utvärdering. Till bristen på serologiska testkit på den franska marknaden läggs komplexiteten i att verifiera känsligheten och specificiteten hos dessa tester. Å andra sidan är immunsvaret mot SARS-CoV-2 komplext och fortfarande ganska okänt. Den samtidiga närvaron av flera isotyper IgA, IgM och IgG observeras ofta. Det isotypiska bytet av Ig verkar alltså inte ske korrekt i detta sjukdomsfall, vilket gör serodiagnostiken ännu mer komplicerad att implementera. Detektering av mindre specifika IgM skulle därför vara avgörande, i fallet med SARS-CoV-2. Reumatoid faktor (RF) är ett immunglobulin (Ig), oftare av M-typ, riktat mot Fc-fragmentet av IgG. Denna antikropp, även om den inte är direkt patogen, är mycket ofta närvarande hos RA-patienter (70 till 80%), utan att vara specifik för denna patologi, eftersom den också kan observeras i andra autoimmuna, infektionssjukdomar eller hematologiska sjukdomar. Närvaron av RF IgM, desto mer i höga titrar, är problematisk när man utför många serologiska eller immunologiska analyser eftersom dessa höga nivåer kan vara ansvariga för falskt positiva resultat.

Under tidigare SARS-epidemier (SARS-CoV-1 eller MERS-CoV) observerades falskt positiva resultat av serologiska tester. Vid detektering av anti-SARS-CoV-1 IgG eller IgM hos patienter som inte hade fått SARS, hade användningen av ett ELISA-kit, med plattor belagda med ett cellysat av Vero-E6-celler infekterade med SARS-CoV-1, visats. för att inducera ett lågt antal falskt positiva resultat hos friska kontroller (mindre än 5%). Antalet falskt positiva resultat hos patienter med autoimmuna sjukdomar var dock mycket högre och varierade i enlighet med patologin (mellan 10 % och 58 %), det största antalet falskt positiva resultat erhölls hos lupuspatienter. Detta fenomen kan förklaras av användningen av ett immuntest med orenade cellysat, som innehåller antigener mot vilka de autoantikroppar som finns i patientens serum kan reagera och därmed förvränga resultatet av testet. Andra orsaker till ökningen av antalet falska positiva resultat har beskrivits vid utförande av SARS-CoV-1-serologier, såsom närvaron av aktiv neoplasi, eller på grund av en tidigare infektion med ett annat coronavirus. Faktum är att andra koronavirus, såsom HCoV-OC43 och HCoV-229E, visar en nukleokapsid nära SARS-CoV-1: denna likhet kan vara källan till korsreaktivitet. Samma fenomen observerades med det senaste coronaviruset: det föreslogs därför att man hellre skulle använda rekombinanta antigener av SARS-CoV-2 i immunanalyser, såsom ELISA till exempel Med tanke på likheten mellan SARS-CoV1 och SARS-CoV2, är det troligt att olika faktorer som orsakar falskt positiva resultat under serologiska tester för SARS-CoV-1, i synnerhet närvaron av autoantikroppar inklusive RF, kan också orsaka falskt positiva resultat när man utför serologiska tester riktade mot SARS-CoV-2. En färsk kinesisk studie visade att en måttlig eller hög frekvens av RF var associerad med en signifikant andel falskt positiva resultat vid sökning efter anti-SARS-CoV-2 IgM med ett ELISA-kit, vilka plattor dock var belagda med rekombinant antigen. Författarna föreslog därför att inkludera ett urea-dissociationssteg i ELISA-protokollet, vilket verkade förbättra testets specificitet, utan att ändra dess känslighet.

Det verkar därför väsentligt att bedöma inverkan av RF, för dess olika isotyper (IgG, IgM, IgA), på olika serologiska tester för SARS-CoV-2 tillgängliga i Frankrike, för att bättre kunna bedöma dessa tests specificitet.

Utredarna föreslår att man ska utvärdera och jämföra 3 olika serologiska tester tillgängliga för detektering av specifika SARS-CoV-2 IgG och IgM. Frekvensen av falskt positiva resultat som erhålls för varje typ av test kommer att utvärderas på sera som kommer från patienter med RA som aldrig har varit i kontakt med SARS-CoV-2, eftersom dessa sera drogs tillbaka före juli 2019. Sambandet mellan förekomsten av SARS-Cov-2 serologiska analyser falskt positiva resultat och RF-antikroppsnivåer kunde uppskattas, såväl som karakteriseringen av RF.