Beoordeling van de rol van microRNA's in familiale mediterrane koorts FMF-pathofysiologie (miRinFMF)
Etude du rôle Des microARNs Dans la Physiopathologie de la fièvre méditerranéenne Familiale
De genetische diagnose van familiale mediterrane koorts (FMF) is goed ingeburgerd voor homozygote patiënten. Aan de andere kant, hoewel heterozygote individuen theoretisch gezonde dragers zijn, zal 1/3 van hen klinische symptomen van FMF ontwikkelen en baat kunnen hebben bij een profylactische behandeling. Dit suggereert dat de mechanismen voor de expressie van stoornissen tot nu toe niet volledig zijn opgehelderd. De voorlopige resultaten verkregen bij het Institute for Regenerative Medicine and Biotherapy (IRMB) suggereren de betrokkenheid van een epigenetisch mechanisme bij de pathogenese van FMF, en ons laboratorium heeft sterke argumenten over de betrokkenheid van microRNA’s (in het bijzonder miR-326), die negatieve regulatoren zijn van genexpressie.
Deze studie is verkennend en heeft tot doel de rol van miRNA's in de klinische expressie van FMF bij patiënten te valideren, en zo de epigenetische mechanismen te onderzoeken die de variabiliteit van de expressie van deze aandoening kunnen verklaren.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Familiaire Mediterrane koorts (FMF) is een zeldzame auto-inflammatoire aandoening als gevolg van mutaties in het MEFV-gen (MEditerranean FeVer), dat terugkerende episoden van koorts en acute serositis (peritoneum, borstvlies, synovium) veroorzaakt, beginnend in de vroege kinderjaren.
MEFV-genidentificatie maakte de ontwikkeling mogelijk van een genomische sequencing-test om de diagnose te bevestigen. De meest voorkomende mutaties zijn M680I, M694V, V726A en M694I, gelokaliseerd in exon 10. Dit gen codeert voor het eiwit pyrine, dat, na een pro-inflammatoire stimulus, in staat is een multi-eiwitcomplex samen te stellen om het pyrine-inflammasoom te vormen. MEFV-genmutaties leiden tot een verandering van de expressie ervan in cellen van het aangeboren immuunsysteem bij FMF-patiënten, waardoor een ontregeling van de immuunrespons ontstaat, wat resulteert in de abnormale uitscheiding van bepaalde pro-inflammatoire cytokines zoals IL-1β en IL-18.
FMF is een autosomaal recessieve aandoening. Heterozygote individuen zijn dus theoretisch gezonde dragers. Niettemin wordt bij bijna 1/3 van de patiënten met klinische symptomen van FMF één enkele heterozygote mutatie gevonden. Tot op heden bestaat er geen biologische marker om heterozygote individuen die de ziekte zullen ontwikkelen te onderscheiden van degenen die gezonde dragers blijven, wat diagnostische fouten en vertragingen in de behandeling veroorzaakt. Er zijn verschillende hypothesen naar voren gebracht om deze variatie in mutatie-expressie te verklaren, of het nu gaat om de omgeving, de betrokkenheid van andere genen of de betrokkenheid van epigenetische modificatoren.
Onder de mechanismen die genexpressie reguleren, reguleren microRNA's (miRNA's), kleine niet-coderende RNA's, de genexpressie op post-transcriptioneel niveau negatief door te binden aan sequenties die zich voornamelijk in het gebied 3'UTR van gen-mRNA bevinden. Veel publicaties melden dat ze abnormaal tot uiting komen in verschillende pathologieën. Zeer recent is dit gemeld voor FMF. Verschillende onderzoeken hebben zich gericht op miRNA's als biomarkers van FMF, zonder hun rol in de pathogenese van FMF te evalueren.
Het beoordelen van de rol van miRNA's die zich specifiek richten op het MEFV-gen in myeloïde cellen (vooral monocyten), en de functionele impact van hun modulatie in deze cellen, zou ons begrip van FMF-fysiopathologie verdiepen. Als een miRNA dat zich specifiek richt op MEFV een bewezen rol speelt in de FMF-pathofysiologie, zou het uiteindelijk een prognostische biomarker van de aandoening voor heterozygote patiënten kunnen blijken te zijn, of zelfs een toekomstig therapeutisch doelwit.
Studietype
Inschrijving (Geschat)
Fase
- Niet toepasbaar
Contacten en locaties
Studiecontact
- Naam: Anna DEGUET, MD
- Telefoonnummer: 0033669107224
- E-mail: a-deguet@chu-montpellier.fr
Studie Locaties
-
-
-
Nîmes, Frankrijk
- University Hospital of Nimes
-
Hoofdonderzoeker:
- Tu Anh TRAN, MD
-
Contact:
- Tu Anh TRAN, MD
-
Paris, Frankrijk
- Robert Debré University Hospital of Paris
-
Contact:
- Ulrich MEINZER, MD
-
Hoofdonderzoeker:
- Ulrich MEINZER, MD
-
Paris, Frankrijk
- University Hospital of Paris Kremlin Bicêtre
-
Contact:
- Isabelle KONE-PAUT, MD
-
Hoofdonderzoeker:
- Isabelle KONE-PAUT, MD
-
Toulouse, Frankrijk
- University Hospital of Toulouse
-
Contact:
- Karine BROCHARD-PAYET, MD
-
Hoofdonderzoeker:
- Karine BROCHARD-PAYET, MD
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
- Kind
- Volwassen
- Oudere volwassene
Accepteert gezonde vrijwilligers
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Patiënt ≥1 jaar oud
- Lichaamsgewicht ≥ 10 kg
- Homozygote patiëntengroep: patiënten die homozygoot zijn voor MEFV (M694V, M694I, M680I, V726A)
- Symptomatische heterozygote patiëntengroep: patiënten die heterozygoot zijn voor het MEFV-gen (M694V, M694I, M680I, V726A) die voldoen aan de Yalcinkaya-criteria voor FMF-diagnose (koorts die 6 tot 72 uur aanhoudt met minstens 3 aanvallen - buikpijn van 6 tot 72 uur met een duur van 6 tot 72 uur minimaal 3 aanvallen - Pijn op de borst die 6 tot 72 uur duurt met minimaal 3 aanvallen - Artritis die 6 tot 72 uur duurt met minimaal 3 aanvallen - FMF Familiegeschiedenis van FMF)
- Asymptomatische heterozygote patiëntengroep: patiënten die heterozygoot zijn voor het MEFV-gen (M694V, M694I, M680I, V726A) en die niet voldoen aan de Yalcinkaya-criteria voor FMF-disgnose
- Controlegroep: afwezigheid van geïdentificeerde auto-inflammatoire aandoening
Uitsluitingscriteria:
- Afwezigheid van geïnformeerde toestemming van de deelnemer of afwezigheid van geïnformeerde toestemming van de wettelijke vertegenwoordigers/voogden van de pediatrische deelnemer
- Onderwerpen die niet zijn geregistreerd in het socialezekerheidsstelsel
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Ander
- Toewijzing: NVT
- Interventioneel model: Opdracht voor een enkele groep
- Masker: Geen (open label)
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Ander: Bloedafname
Afname van 10 ml bloed op een EDTA-buisje tijdens:
|
Afname van 10 ml bloed op EDTA-buisjes per patiënt.
Eenmaal verzameld, worden de bloedbuisjes binnen 24 uur vervoerd naar het IRB (Biotherapy Research Institute) van het Universitair Ziekenhuis van Montpellier, waar de monocyten worden geïsoleerd door magnetische sortering op basis van de expressie van oppervlaktemarker CD14+, na een voorbereidende stap van Ficoll .
Monocyten zullen vervolgens worden ingevroren in stikstof bij -196°C tot gebruik (biobank). Gain-of-function-experimenten zullen vervolgens worden uitgevoerd op monocyten door ze te transfecteren met het microRNA van belang of controle.
De expressie van het pyrine-eiwit en de fosforylatiesnelheid ervan zullen na inductie worden geëvalueerd door middel van immunoprecipitatie-experimenten gevolgd door Western blot.
De activiteit van het pyrine-inflammasoom zal ook worden bestudeerd door te kijken naar pyroptose en toxiciteit met behulp van de LDH-test.
Al deze experimenten zullen worden uitgevoerd in afwezigheid en in aanwezigheid van het microRNA om de rol ervan in de pathofysiologie van FMF te bestuderen.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
miR-326 kwantificering van expressieniveau
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Analyseer de expressieniveaus (kwantificering) van miRNA miR-326 in bloedmonocyten binnen de 4 groepen individuen: homozygoot, symptomatisch heterozygoot, asymptomatisch heterozygoot voor MEFV en controlepersonen, om te bepalen of miR-326 al dan niet de ontstekingsreactie van monocyten.
|
1 dag (bij inschrijving)
|
|
Kwantificering van MEFV-expressieniveau
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Analyseer de expressieniveaus (kwantificering) van het MEFV-gen in bloedmonocyten binnen de 4 groepen individuen: homozygoot, symptomatisch heterozygoot, asymptomatisch heterozygoot voor MEFV en controlepersonen
|
1 dag (bij inschrijving)
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
miR-326 vergelijking van expressieniveaus
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Vergelijk de expressieniveaus van miR-326 tussen symptomatische en asymptomatische heterozygote groepen.
|
1 dag (bij inschrijving)
|
|
Vergelijking van MEFV-expressieniveau
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Vergelijk de expressieniveaus van MEFV tussen symptomatische en asymptomatische heterozygote groepen.
|
1 dag (bij inschrijving)
|
|
Bloedmonsters verzamelen
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Creëer een biobank (bevriezing van monocyten uit patiëntenmonsters) om vervolgens andere miRNA's te bestuderen
|
1 dag (bij inschrijving)
|
|
Expressieniveaus van andere kandidaat-miRNA's gericht op MEFV
Tijdsspanne: 1 dag (bij inschrijving)
|
Kwantificering van de expressieniveaus van andere kandidaat-miRNA's die zich richten op MEFV binnen de 4 groepen deelnemers.
Met behulp van een methylome-studie die momenteel wordt uitgevoerd, zullen 5 miRNA's worden geselecteerd.
|
1 dag (bij inschrijving)
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Eric JEZIORSKI, MD, University Hospital, Montpellier
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Geschat)
Primaire voltooiing (Geschat)
Studie voltooiing (Geschat)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- RECHMPL22_0296 - UF 8310
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .