Evaluación del papel de los microARN en la fiebre mediterránea familiar Fisiopatología de la FMF (miRinFMF)
Etude du rôle Des microARNs Dans la Physiopathologie de la fièvre méditerranéenne Familiale
El diagnóstico genético de la fiebre mediterránea familiar (FMF) está bien establecido para pacientes homocigotos. Por otro lado, aunque los individuos heterocigotos son teóricamente portadores sanos, 1/3 de ellos desarrollarán síntomas clínicos de FMF y podrían beneficiarse de un tratamiento profiláctico. Esto sugiere que los mecanismos de expresión del trastorno no están completamente dilucidados hasta la fecha. Los resultados preliminares obtenidos en el Instituto de Medicina Regenerativa y Bioterapia (IRMB) sugieren la participación de un mecanismo epigenético en la patogénesis de la FMF, y nuestro laboratorio tiene fuertes argumentos sobre la participación de microARN (en particular miR-326), que son reguladores negativos de la expresion genica.
Este estudio es exploratorio y tiene como objetivo validar el papel de los miRNA en la expresión clínica de FMF en pacientes, explorando así los mecanismos epigenéticos que pueden explicar la variabilidad de expresión de este trastorno.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
La fiebre mediterránea familiar (FMF) es un trastorno autoinflamatorio poco común debido a mutaciones en el gen MEFV (MEditerranean FeVer), que causa episodios recurrentes de fiebre y serositis aguda (peritoneo, pleura, membrana sinovial) que comienzan en la primera infancia.
La identificación del gen MEFV permitió el desarrollo de una prueba de secuenciación genómica para confirmar el diagnóstico. Las mutaciones más frecuentes son M680I, M694V, V726A y M694I, localizadas en el exón 10. Este gen codifica la proteína pirina, que, tras un estímulo proinflamatorio, es capaz de ensamblar un complejo multiproteico para formar el inflamasoma de pirina. Las mutaciones del gen MEFV provocan una alteración de su expresión en las células del sistema inmunológico innato en pacientes con FMF, provocando una desregulación de la respuesta inmune, que resulta en la secreción anormal de ciertas citocinas proinflamatorias como la IL-1β y la IL-18.
La FMF es un trastorno autosómico recesivo. Por tanto, los individuos heterocigotos son teóricamente portadores sanos. Sin embargo, en casi 1/3 de los pacientes con síntomas clínicos de FMF se encuentra una única mutación heterocigótica. Hasta la fecha, no existe ningún marcador biológico que distinga a los individuos heterocigotos que desarrollarán la enfermedad de los que siguen siendo portadores sanos, de ahí los errores de diagnóstico y los retrasos en el tratamiento. Se han propuesto varias hipótesis para explicar esta variación en la expresión de mutaciones, ya sea por el medio ambiente, la participación de otros genes o la participación de modificadores epigenéticos.
Entre los mecanismos que regulan la expresión génica, los microARN (miARN), que son pequeños ARN no codificantes, regulan negativamente la expresión génica a nivel postranscripcional al unirse a secuencias ubicadas principalmente en la región 3'UTR del ARNm del gen. Muchas publicaciones informan que se expresan de forma anormal en diversas patologías. Muy recientemente, esto se ha informado para la FMF. Varios estudios se han centrado en los miARN como biomarcadores de FMF, sin evaluar su papel en la patogénesis de FMF.
Evaluar el papel de los miARN que se dirigen específicamente al gen MEFV en las células mieloides (especialmente los monocitos) y el impacto funcional de su modulación en estas células profundizaría nuestra comprensión de la fisiopatología de la FMF. Si un miARN dirigido específicamente a MEFV tiene un papel comprobado en la fisiopatología de la FMF, en última instancia podría resultar un biomarcador pronóstico del trastorno para pacientes heterocigotos, o incluso un objetivo terapéutico futuro.
Tipo de estudio
Inscripción (Estimado)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Anna DEGUET, MD
- Número de teléfono: 0033669107224
- Correo electrónico: a-deguet@chu-montpellier.fr
Ubicaciones de estudio
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Nîmes, Francia
- University Hospital of Nimes
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Investigador principal:
- Tu Anh TRAN, MD
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Contacto:
- Tu Anh TRAN, MD
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Paris, Francia
- Robert Debré University Hospital of Paris
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Contacto:
- Ulrich MEINZER, MD
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Investigador principal:
- Ulrich MEINZER, MD
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Paris, Francia
- University Hospital of Paris Kremlin Bicêtre
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Contacto:
- Isabelle KONE-PAUT, MD
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Investigador principal:
- Isabelle KONE-PAUT, MD
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Toulouse, Francia
- University Hospital of Toulouse
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Contacto:
- Karine BROCHARD-PAYET, MD
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Investigador principal:
- Karine BROCHARD-PAYET, MD
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Niño
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Paciente de ≥1 año
- Peso corporal ≥ 10 kg
- Grupo de pacientes homocigotos: pacientes homocigotos para MEFV (M694V, M694I, M680I, V726A)
- Grupo de pacientes heterocigotos sintomáticos: pacientes heterocigotos para el gen MEFV (M694V, M694I, M680I, V726A) que cumplen los criterios de Yalcinkaya para el diagnóstico de FMF (Fiebre que dura de 6 a 72 horas con al menos 3 ataques - Dolor abdominal de 6 a 72 horas de duración con al menos menos 3 ataques - Dolor en el pecho de 6 a 72 horas de duración con al menos 3 ataques - Artritis de 6 a 72 horas de duración con al menos 3 ataques - FMF Antecedentes familiares de FMF)
- Grupo de pacientes heterocigotos asintomáticos: pacientes heterocigotos para el gen MEFV (M694V, M694I, M680I, V726A) que no cumplen los criterios de Yalcinkaya para el diagnóstico de FMF.
- Grupo de sujetos de control: ausencia de trastorno autoinflamatorio identificado
Criterio de exclusión:
- Ausencia de recopilación de consentimiento informado del participante o ausencia de consentimiento informado de los representantes legales/tutores del participante pediátrico
- Sujetos no dados de alta en el sistema de Seguridad Social
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Otro
- Asignación: N / A
- Modelo Intervencionista: Asignación de un solo grupo
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Otro: Muestra de sangre
Recolección de 10 ml de sangre en tubo con EDTA durante:
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Recogida de 10 ml de sangre en tubos EDTA por paciente.
Una vez recogidos, los tubos de sangre serán transportados en un plazo de 24 horas al IRB (Instituto de Investigación en Bioterapia) del Hospital Universitario de Montpellier, donde los monocitos serán aislados mediante clasificación magnética basándose en la expresión del marcador de superficie CD14+, tras un paso preliminar de Ficoll. .
Luego, los monocitos se congelarán en nitrógeno a -196 ° C hasta su uso (biobanco). Luego se realizarán experimentos de ganancia de función en monocitos transfectándolos con el microARN de interés o control.
La expresión de la proteína pirina y su tasa de fosforilación se evaluarán después de la inducción mediante experimentos de inmunoprecipitación seguidos de transferencia Western.
La actividad del inflamasoma pirina también se estudiará analizando la piroptosis y la tasa de toxicidad mediante la prueba de LDH.
Todos estos experimentos se llevarán a cabo en ausencia y presencia del microARN para estudiar su papel en la fisiopatología de la FMF.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Cuantificación del nivel de expresión de miR-326.
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Analizar los niveles de expresión (cuantificación) del miARN miR-326 en monocitos sanguíneos dentro de los 4 grupos de individuos: homocigotos, heterocigotos sintomáticos, heterocigotos asintomáticos para MEFV y sujetos control, con el fin de determinar si miR-326 influye o no en la respuesta inflamatoria de monocitos.
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1 día (al momento de la inscripción)
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Cuantificación del nivel de expresión de MEFV.
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Analizar los niveles de expresión (cuantificación) del gen MEFV en monocitos sanguíneos dentro de los 4 grupos de individuos: homocigotos, heterocigotos sintomáticos, heterocigotos asintomáticos para MEFV y sujetos control.
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1 día (al momento de la inscripción)
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Comparación del nivel de expresión de miR-326
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Compare los niveles de expresión de miR-326 entre grupos heterocigotos sintomáticos y asintomáticos.
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1 día (al momento de la inscripción)
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Comparación del nivel de expresión MEFV
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Compare los niveles de expresión de MEFV entre grupos heterocigotos sintomáticos y asintomáticos.
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1 día (al momento de la inscripción)
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Recogida de muestras de sangre.
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Crear un biobanco (congelación de monocitos extraídos de muestras de pacientes) para estudiar posteriormente otros miRNAs
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1 día (al momento de la inscripción)
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Niveles de expresión de otros miARN candidatos dirigidos a MEFV
Periodo de tiempo: 1 día (al momento de la inscripción)
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Cuantificación de los niveles de expresión de otros miARN candidatos dirigidos a MEFV dentro de los 4 grupos de participantes.
Se seleccionarán 5 miARN mediante un estudio de metiloma que se está llevando a cabo actualmente.
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1 día (al momento de la inscripción)
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Eric JEZIORSKI, MD, University Hospital, Montpellier
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Estimado)
Finalización primaria (Estimado)
Finalización del estudio (Estimado)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Términos MeSH relevantes adicionales
- Enfermedades de la piel
- Infecciones
- Enfermedades Genéticas Congénitas
- Infecciones por bacterias gramnegativas
- Infecciones bacterianas
- Infecciones bacterianas y micosis
- Enfermedades De La Piel Genéticas
- Cambios de temperatura corporal
- Fiebre
- Brucelosis
- Fiebre mediterránea familiar
- Enfermedades autoinflamatorias hereditarias
Otros números de identificación del estudio
- RECHMPL22_0296 - UF 8310
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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