HHV-6-specifieke T-celreconstitutie bij kinderen en adolescenten na allogene stam. (CIRAST HHV-6)

Achtergrond:

Humaan herpesvirus 6 (HHV-6) veroorzaakt slechts lichte symptomen bij gezonde individuen, maar bij patiënten met immunosuppressie, bijvoorbeeld patiënten na allogene stamceltransplantatie (HSCT), kunnen HHV-6-reactivaties leiden tot ziekten in verschillende orgaansystemen. Er is ook gerapporteerd dat HHV-6-reactivaties een oorzaak zijn voor vertraagde implantatie, een trigger voor graft-versus-host-ziekte en een co-factor voor andere virusreactivaties. T-lymfocyten spelen een belangrijke rol bij de controle van virusreactivaties. Er is weinig bekend over de ontwikkeling van virusspecifieke T-cellen na allogene HSCT.

Objectief:

Het doel van deze studie was de beschrijving van de HHV-6-specifieke cellulaire immuniteit bij kinderen en adolescenten na allogene HSCT in de context van het klinische beloop.

Studieontwerp en deelnemers:

Voor deze prospectieve, cross-sectionele studie werden 28 kinderen en adolescenten na allogene HSCT geïncludeerd die vervolgondersteuning kregen in de respectievelijke centra. Patiënten werden tot 24 maanden na allogene HSCT geïncludeerd. Perifeer veneus bloed werd 3, 6, 9, 12, 18 en 24 maanden na allogene HSCT afgenomen. Bovendien werd een bloedmonster genomen van 25 gezonde controlepersonen van dezelfde leeftijd en geslacht, zonder enige ontstekings-, immunologische of infectieziekten. Deze studie werd goedgekeurd door de Institutional Review Board van de Medische Universiteit Graz en patiënten, ouders of wettelijke voogden van patiënten gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki.

Methoden:

3, 6, 9, 12, 18 en 24 maanden na allogene HSCT werden mononucleaire cellen uit perifeer bloed geïsoleerd uit het bloed van de patiënt, gestimuleerd met HHV-6-specifiek antigeen (U54) en gedurende 10 dagen gekweekt. Bovendien werd een bloedmonster genomen van 25 gezonde controlepersonen van dezelfde leeftijd en geslacht, zonder enige ontstekings-, immunologische of infectieziekten.

Op dag 10 werden mononucleaire cellen uit perifeer bloed opnieuw gestimuleerd met het virusantigeen U54 gedurende 6 uur en daarna gekleurd op oppervlaktemarkers (CD3, CD4, CD8, CD56) en intracytoplasmatische activeringsmarkers IL-2 (Interleukine-2). IFN-γ (Interferon-γ), TNF-α (tumornecrosefactor-α) voor flowcytometrische detectie van virusspecifieke T-cellen. T-cellen met intracytoplasmatische expressie van activeringsmarkers na stimulatie met het virusantigeen zijn HHV-6-specifieke T-cellen. Dit duidde op HHV-6-specifieke cellulaire immuniteit.

De virusspecifieke immuniteit van patiënten tegen HHV-6 werd vergeleken met de virusspecifieke immuniteit van kinderen en adolescenten uit een controlegroep.