HHV-6-spezifische T-Zell-Rekonstitution bei Kindern und Jugendlichen nach allogenem Stamm. (CIRAST HHV-6)

Hintergrund:

Das humane Herpesvirus 6 (HHV-6) verursacht bei gesunden Personen nur geringfügige Symptome, bei immunsupprimierten Patienten, z. B. Patienten nach allogener Stammzelltransplantation (HSCT), können HHV-6-Reaktivierungen jedoch zu Erkrankungen in verschiedenen Organsystemen führen. Es wurde auch berichtet, dass HHV-6-Reaktivierungen eine Ursache für eine verzögerte Transplantation, ein Auslöser der Transplantat-gegen-Wirt-Krankheit und ein Co-Faktor für andere Virusreaktivierungen sind. T-Lymphozyten spielen eine wichtige Rolle bei der Kontrolle von Virusreaktivierungen. Über die Entwicklung virusspezifischer T-Zellen nach allogener HSCT ist wenig bekannt.

Zielsetzung:

Ziel dieser Studie war die Beschreibung der HHV-6-spezifischen zellulären Immunität bei Kindern und Jugendlichen nach allogener HSZT im Kontext des klinischen Verlaufs.

Studiendesign und Teilnehmer:

Für diese prospektive Querschnittsstudie wurden 28 Kinder und Jugendliche nach allogener HSZT eingeschlossen, die in den jeweiligen Zentren eine Nachbetreuung erhielten. Die Patienten wurden bis zu 24 Monate nach der allogenen HSZT aufgenommen. Peripheres venöses Blut wurde 3, 6, 9, 12, 18 und 24 Monate nach der allogenen HSZT entnommen. Darüber hinaus wurde eine Blutprobe von 25 gesunden Kontrollpersonen gleichen Alters und Geschlechts ohne entzündliche, immunologische oder infektiöse Erkrankungen entnommen. Diese Studie wurde vom Institutional Review Board der Medizinischen Universität Graz genehmigt und Patienten, Eltern oder Erziehungsberechtigte der Patienten gaben eine schriftliche Einverständniserklärung gemäß der Deklaration von Helsinki.

Methoden:

3, 6, 9, 12, 18 und 24 Monate nach der allogenen HSCT wurden mononukleäre Zellen des peripheren Blutes aus dem Blut des Patienten isoliert, mit HHV-6-spezifischem Antigen (U54) stimuliert und 10 Tage lang kultiviert. Darüber hinaus wurde eine Blutprobe von 25 gesunden Kontrollpersonen gleichen Alters und Geschlechts ohne entzündliche, immunologische oder infektiöse Erkrankungen entnommen.

Am 10. Tag wurden mononukleäre Zellen des peripheren Bluts 6 Stunden lang mit dem Virusantigen U54 erneut stimuliert und anschließend auf Oberflächenmarker (CD3, CD4, CD8, CD56) und intrazytoplasmatische Aktivierungsmarker IL-2 (Interleukin-2) gefärbt. IFN-γ (Interferon-γ), TNF-α (Tumornekrosefaktor-α) zum durchflusszytometrischen Nachweis virusspezifischer T-Zellen. T-Zellen mit intrazytoplasmatischer Expression von Aktivierungsmarkern nach Stimulation mit dem Virusantigen sind HHV-6-spezifische T-Zellen. Dies deutete auf eine HHV-6-spezifische zelluläre Immunität hin.

Die virusspezifische Immunität von Patienten gegen HHV-6 wurde mit der virusspezifischen Immunität von Kindern und Jugendlichen einer Kontrollgruppe verglichen.