Ricostituzione delle cellule T specifiche per HHV-6 tra bambini e adolescenti dopo staminali allogeniche. (CIRAST HHV-6)

Sfondo:

L'herpesvirus umano 6 (HHV-6) provoca solo sintomi minori negli individui sani, ma nei pazienti immunodepressi, ad esempio nei pazienti sottoposti a trapianto allogenico di cellule staminali (HSCT), le riattivazioni dell'HHV-6 possono portare a malattie in diversi sistemi di organi. È stato anche segnalato che le riattivazioni dell'HHV-6 sono una causa di attecchimento ritardato, un fattore scatenante della malattia del trapianto contro l'ospite e un cofattore per altre riattivazioni del virus. I linfociti T svolgono un ruolo importante nel controllo delle riattivazioni del virus. Poco si sa sullo sviluppo di cellule T virus-specifiche dopo il trapianto allogenico.

Obbiettivo:

Lo scopo di questo studio era la descrizione dell'immunità cellulare specifica per HHV-6 nei bambini e negli adolescenti dopo HSCT allogenico nel contesto del decorso clinico.

Progettazione dello studio e partecipanti:

Per questo studio prospettico trasversale sono stati inclusi 28 bambini e adolescenti dopo HSCT allogenico che hanno ricevuto supporto di follow-up presso i rispettivi centri. I pazienti sono stati arruolati fino a 24 mesi dopo l'HSCT allogenico. Il sangue venoso periferico è stato prelevato 3, 6, 9, 12, 18 e 24 mesi dopo l'HSCT allogenico. Inoltre, è stato prelevato un campione di sangue da 25 controlli sani abbinati per età e sesso, senza malattie infiammatorie, immunologiche o infettive. Questo studio è stato approvato dal Comitato di revisione istituzionale dell'Università di Medicina di Graz e i pazienti, i genitori o i tutori legali dei pazienti hanno fornito il consenso informato scritto in conformità con la Dichiarazione di Helsinki.

Metodi:

3, 6, 9, 12, 18 e 24 mesi dopo l'HSCT allogenico, le cellule mononucleate del sangue periferico sono state isolate dal sangue del paziente, stimolate con l'antigene specifico dell'HHV-6 (U54) e coltivate per 10 giorni. Inoltre, è stato prelevato un campione di sangue da 25 controlli sani abbinati per età e sesso, senza malattie infiammatorie, immunologiche o infettive.

Il giorno 10, le cellule mononucleate del sangue periferico sono state ristimolate con l'antigene virale U54 per 6 ore e, successivamente, colorate per marcatori di superficie (CD3, CD4, CD8, CD56) e marcatori di attivazione intracitoplasmatica IL-2 (interleuchina-2), IFN-γ (interferone-γ), TNF-α (fattore di necrosi tumorale-α) per il rilevamento citometrico a flusso di cellule T virus-specifiche. Le cellule T con espressione intracitoplasmatica di marcatori di attivazione dopo la stimolazione con l'antigene virale sono cellule T specifiche dell'HHV-6. Ciò indicava un’immunità cellulare specifica per HHV-6.

L’immunità virus-specifica dei pazienti all’HHV-6 è stata confrontata con l’immunità virus-specifica dei bambini e degli adolescenti di un gruppo di controllo.