HHV-6-spesifikk T-celle-rekonstitusjon blant barn og ungdom etter allogen stamme. (CIRAST HHV-6)

Bakgrunn:

Humant herpesvirus 6 (HHV-6) forårsaker bare mindre symptomer hos friske individer, men hos immunsupprimerte pasienter, for eksempel pasienter etter allogen stamcelletransplantasjon (HSCT), kan HHV-6-reaktiveringer føre til sykdommer i forskjellige organsystemer. HHV-6-reaktiveringer er også rapportert å være en årsak til forsinket engraftment, en utløser av graft-versus-host-sykdom og en kofaktor for andre virusreaktiveringer. T-lymfocytter spiller en viktig rolle i kontrollen av virusreaktiveringer. Lite er kjent om utviklingen av virusspesifikke T-celler etter allogen HSCT.

Objektiv:

Målet med denne studien var beskrivelsen av den HHV-6-spesifikke cellulære immuniteten hos barn og ungdom etter allogen HSCT i sammenheng med det kliniske forløpet.

Studiedesign og deltakere:

For denne prospektive tverrsnittsstudien ble 28 barn og ungdom etter allogen HSCT som mottok oppfølgingsstøtte ved de respektive sentrene inkludert. Pasienter ble registrert inntil 24 måneder etter allogen HSCT. Perifert veneblod ble tatt ut 3, 6, 9, 12, 18 og 24 måneder etter allogen HSCT. Videre ble det tatt en blodprøve fra 25 alders- og kjønnstilpassede friske kontroller uten noen inflammatoriske, immunologiske eller infeksjonssykdommer. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board ved det medisinske universitetet i Graz og pasienter, foreldre eller juridiske foresatte for pasienter ga skriftlig informert samtykke i samsvar med Helsinki-erklæringen.

Metoder:

3, 6, 9, 12, 18 og 24 måneder etter at allogene HSCT mononukleære celler fra perifert blod ble isolert fra pasientblod, stimulert med HHV-6-spesifikt antigen (U54) og dyrket i 10 dager. Videre ble det tatt en blodprøve fra 25 alders- og kjønnstilpassede friske kontroller uten noen inflammatoriske, immunologiske eller infeksjonssykdommer.

På dag 10 ble mononukleære celler i perifert blod re-stimulert med virusantigenet U54 i 6 timer og deretter farget for overflatemarkører (CD3, CD4, CD8, CD56) og intracytoplasmatiske aktiveringsmarkører IL-2 (Interleukin-2), IFN-γ (Interferon-γ), TNF-α (tumornekrosefaktor-α) for flowcytometrisk påvisning av virusspesifikke T-celler. T-celler med intracytoplasmatisk ekspresjon av aktiveringsmarkører etter stimulering med virusantigenet er HHV-6-spesifikke T-celler. Dette indikerte HHV-6-spesifikk cellulær immunitet.

Den virusspesifikke immuniteten til pasienter mot HHV-6 ble sammenlignet med den virusspesifikke immuniteten til barn og ungdom i en kontrollgruppe.