Biologische leeftijd bij kinderen met GH-tekort die hormoonsubstitutietherapie ondergaan (ETABIOGHD)

12 kinderen van beide geslachten getroffen door een geïsoleerde GH-deficiëntie (gedefinieerd volgens de criteria van nota 39 AIFA voor deze pathologie: kleine gestalte: ≤ -3 DS of ≤ -2 DS; groeisnelheid/jaar ≤ -1,0 DS per leeftijd en geslacht geëvalueerd op een afstand van ten minste zes maanden; GH-piek bij twee verschillende farmacologische stimulatietests < 8 ng/ml), gerekruteerd bij het Regionale Referentiecentrum voor Groeistoornissen, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milaan. De uitsluitingscriteria voor het onderzoek (en voor de rhGH-behandeling) zijn de aanwezigheid van organische hypothalamus-hypofyse-pathologieën (gediagnosticeerd via encefalische RMN).

In basale omstandigheden (voorbehandeling) worden de klinische en antropometrische/auxometrische gegevens (lengte, gewicht, BMI) verzameld, inclusief de evaluatie van de lichaamssamenstelling met bio-elektrische impedantieanalyse. Dezelfde evaluaties worden herhaald na 6 maanden behandeling met recombinant groeihormoon (zie hieronder).

Elke proefpersoon wordt behandeld met vervangingstherapie met rhGH in een dosis van 0,025-0,035 mg/kg lichaamsgewicht per dag (of 0,7-1,0 mg/m2 lichaamsoppervlak per dag).

Bloedmonsters voor de bepaling van: glycemie, insuline, HbA1C, triglyceriden, totaal cholesterol, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1, osteocalcine, ICTP en PIIINP worden verzameld op T0 (vóór aanvang van de hormoonsubstitutietherapie met rhGH) en op T6 (na 6 maanden rhGH, ongeveer 10-12 vanaf de laatste dosering).

Uit de leukocyten die zijn geïsoleerd uit de monsters die op T0 en T6 zijn genomen, wordt het DNA geëxtraheerd. De DNA-methylatie wordt uitgevoerd met natriumbisulfiet en PCR-Pyrosequencing.

De biologische leeftijd (epigenetisch) wordt gemeten met twee algoritmen van Zbiec-Piekarska en van Daunay, gebaseerd op het DNA-methylatieniveau op specifieke loci. Om een ​​schatting te krijgen van de epigenetische leeftijd (biologisch) die onafhankelijk is van de chronologische leeftijd, gebruiken we een gedefinieerde maatstaf gedefinieerd als leeftijdsversnelling, voor welke berekening we een lineair regressiemodel toepassen met de chronologische leeftijd als onafhankelijke variabele en de epigenetische leeftijd als afhankelijke variabele; het verschil tussen de waargenomen waarde en de voorspelde waarde uit het model vertegenwoordigt de versnelling van de leeftijd als gevolg van een behoorlijk epigenetisch effect. Indien de epigenetische leeftijd hoger is dan de chronologische leeftijd, heeft de leeftijdsversnelling een positieve waarde uitgedrukt in jaren, anders negatief.