Biologisches Alter bei Kindern mit GH-Mangel, die sich einer Hormonersatztherapie unterziehen (ETABIOGHD)

12 Kinder beiderlei Geschlechts, die von einem isolierten GH-Mangel betroffen sind (definiert gemäß den in Anmerkung 39 AIFA für diese Pathologie bereitgestellten Kriterien: Kleinwuchs: ≤ -3 DS oder ≤ -2 DS; Wachstumsrate/Jahr ≤ -1,0 DS pro Alter und Geschlecht, bewertet in einem Abstand von mindestens sechs Monaten; GH-Höhepunkt bei zwei verschiedenen pharmakologischen Stimulationstests < 8 ng/ml), rekrutiert am Regionalen Referenzzentrum für Wachstumsstörungen, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Mailand. Die Ausschlusskriterien für die Studie (und von der rhGH-Behandlung) sind das Vorhandensein organischer Hypothalamus-Hypophysen-Pathologien (diagnostiziert durch enzephalisches RMN).

Unter Grundbedingungen (Vorbehandlung) werden die klinischen und anthropometrischen/auxometrischen Daten (Größe, Gewicht, BMI) erhoben, einschließlich der Auswertung der Körperzusammensetzung mittels bioelektrischer Impedanzanalyse. Die gleichen Bewertungen werden nach 6-monatiger Behandlung mit rekombinantem Wachstumshormon wiederholt (siehe unten).

Jeder Proband wird mit einer Ersatztherapie mit rhGH in einer Dosis von 0,025–0,035 behandelt mg/kg Körpergewicht pro Tag (oder 0,7-1,0). mg/m2 Körperoberfläche pro Tag).

Blutproben zur Bestimmung von: Glykämie, Insulin, HbA1C, Triglyceriden, Gesamtcholesterin, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1, Osteocalcin, ICTP und PIIINP werden bei T0 (vor Beginn der Hormonersatztherapie mit rhGH) entnommen. und bei T6 (nach 6 Monaten rhGH, etwa 10–12 nach der letzten Dosierung).

Aus den Leukozyten, die aus den bei T0 und T6 entnommenen Proben isoliert wurden, wird die DNA extrahiert. Die DNA-Methylierung wird mit Natriumbisulfit und PCR-Pyrosequenzierung durchgeführt.

Das biologische Alter (epigenetisch) wird mit zwei Algorithmen von Zbiec-Piekarska und Daunay gemessen, basierend auf dem DNA-Methylierungsgrad an bestimmten Orten. Um eine vom chronologischen Alter unabhängige Schätzung des epigenetischen Alters (biologisch) zu erhalten, verwenden wir ein definiertes Maß, das als Altersbeschleunigung definiert ist. Für die Berechnung wenden wir ein lineares Regressionsmodell mit dem chronologischen Alter als unabhängiger Variable und dem epigenetischen Alter als unabhängiger Variable an abhängige Variable; Die Differenz zwischen dem beobachteten Wert und dem vom Modell vorhergesagten Wert stellt die Altersbeschleunigung aufgrund eines ordnungsgemäß epigenetischen Effekts dar. Falls das epigenetische Alter höher ist als das chronologische Alter, hat die Altersbeschleunigung einen positiven Wert, ausgedrückt in Jahren, andernfalls einen negativen Wert.