Biologický věk u dětí s nedostatkem GH podstupujících hormonální substituční terapii (ETABIOGHD)

12 dětí obou pohlaví postižených izolovaným nedostatkem GH (definováno podle kritérií uvedených v poznámce 39 AIFA pro tuto patologii: malý vzrůst: ≤ -3 DS nebo ≤ -2 DS; rychlost růstu/rok ≤ -1,0 DS na věk a pohlaví hodnoceno s odstupem nejméně šesti měsíců, vrchol GH ve dvou různých farmakologických stimulačních testech < 8 ng/ml), přijatých v Regionálním referenčním centru pro poruchy růstu, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milán. Kritéria vyloučení ze studie (a z léčby rhGH) jsou přítomnost organických hypotalamo-hypofyzárních patologií (diagnostikovaných prostřednictvím encefalické RMN).

V bazálních podmínkách (předléčení) se shromažďují klinická a antropometrická/auxometrická data (výška, hmotnost, BMI), včetně vyhodnocení tělesného složení pomocí bioelektrické impedanční analýzy. Stejná hodnocení se opakují po 6 měsících léčby rekombinantním růstovým hormonem (viz níže).

Každý subjekt je léčen substituční terapií s rhGH v dávce 0,025-0,035 mg/kg tělesné hmotnosti za den (nebo 0,7-1,0 mg/m2 tělesného povrchu za den).

Vzorky krve pro stanovení: glykémie, inzulinu, HbA1C, triglyceridů, celkového cholesterolu, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1, osteokalcinu, ICTP a PIIINP se odebírají v T0 (před zahájením hormonální substituční terapie rhGH) a v T6 (po 6 měsících rhGH, přibližně 10-12 od poslední dávky).

Z leukocytů izolovaných ze vzorků odebraných v T0 a T6 se extrahuje DNA. Methylace DNA se provádí pomocí hydrogensiřičitanu sodného a PCR-pyrosequencing.

Biologický věk (epigenetický) se měří pomocí dvou algoritmů Zbiec-Piekarska a Daunay, založených na úrovni metylace DNA ve specifických lokusech. Abychom získali odhad epigenetického věku (biologického), který je nezávislý na chronologickém věku, použijeme definovanou míru definovanou jako věkové zrychlení, pro jehož výpočet použijeme lineární regresní model s chronologickým věkem jako nezávislou proměnnou a epigenetickým věkem jako závislá proměnná; rozdíl mezi pozorovanou hodnotou a predikovanou hodnotou z modelu představuje zrychlení věku v důsledku správně epigenetického efektu. V případě, že je epigenetický věk vyšší než věk chronologický, má věkové zrychlení kladnou hodnotu vyjádřenou v letech, jinak zápornou.