Edad biológica en niños con deficiencia de GH sometidos a terapia de reemplazo hormonal (ETABIOGHD)

12 niños de ambos sexos afectados por una deficiencia aislada de GH (definida según los criterios previstos por la nota 39 AIFA para esta patología: talla baja: ≤ -3 DS o ≤ -2 DS; tasa de crecimiento/año ≤ -1,0 DS por edad y sexo evaluado a una distancia de al menos seis meses; pico de GH en dos pruebas de estimulación farmacológica diferentes < 8 ng/ml), reclutados en el Centro Regional de Referencia para Trastornos del Crecimiento, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milán. Los criterios de exclusión para el estudio (y del tratamiento con rhGH) son la presencia de patologías orgánicas hipotálamo-pituitarias (diagnosticadas mediante RMN encefálica).

En condiciones basales (pretratamiento), se recogen los datos clínicos y antropométricos/auxométricos (altura, peso, IMC), incluida la evaluación de la composición corporal con análisis de impedancia bioeléctrica. Las mismas evaluaciones se repiten después de 6 meses de tratamiento con hormona de crecimiento recombinante (ver más abajo).

Cada sujeto es tratado con terapia de reemplazo con rhGH en una dosis de 0,025-0,035 mg/kg de peso corporal por día (o 0,7-1,0 mg/m2 de superficie corporal por día).

En T0 (antes del inicio de la terapia de reemplazo hormonal con rhGH) se recolectan muestras de sangre para la determinación de: glucemia, insulina, HbA1C, triglicéridos, colesterol total, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1, osteocalcina, ICTP y PIIINP. y en T6 (después de 6 meses de rhGH, aproximadamente 10-12 desde la última dosis).

De los leucocitos aislados de las muestras tomadas en T0 y T6 se extrae el ADN. La metilación del ADN se realiza con bisulfito de sodio y PCR-Pirosecuenciación.

La edad biológica (epigenética) se mide con dos algoritmos de Zbiec-Piekarska y de Daunay, basados ​​en el nivel de metilación del ADN en loci específicos. Para tener una estimación de la edad epigenética (biológica) que sea independiente de la edad cronológica, utilizamos una medida definida como aceleración de la edad, para cuyo cálculo aplicamos un modelo de regresión lineal con la edad cronológica como variable independiente y la edad epigenética como variable dependiente; la diferencia entre el valor observado y el valor predicho del modelo representa la aceleración de la edad debido a un efecto propiamente epigenético. En caso de que la edad epigenética sea mayor que la edad cronológica, la aceleración de la edad tiene un valor positivo expresado en años, en caso contrario negativo.