Idade biológica em crianças com deficiência de GH submetidas a terapia de reposição hormonal (ETABIOGHD)

12 crianças de ambos os sexos afetadas por deficiência isolada de GH (definida de acordo com os critérios previstos na nota 39 AIFA para esta patologia: baixa estatura: ≤ -3 DS ou ≤ -2 DS; taxa de crescimento/ano ≤ -1,0 DS por idade e sexo avaliado a uma distância de pelo menos seis meses; pico de GH em dois testes de estimulação farmacológica diferentes < 8 ng/ml), recrutados no Centro de Referência Regional para Distúrbios do Crescimento, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milão. Os critérios de exclusão do estudo (e do tratamento com rhGH) são a presença de patologias orgânicas hipotalâmico-hipofisárias (diagnosticadas através de RMN encefálico).

Nas condições basais (pré-tratamento) são coletados os dados clínicos e antropométricos/auxométricos (altura, peso, IMC), incluindo a avaliação da composição corporal com análise de impedância bioelétrica. As mesmas avaliações são repetidas após 6 meses de tratamento com hormônio de crescimento recombinante (ver abaixo).

Cada sujeito é tratado com terapia de reposição com rhGH na dose de 0,025-0,035 mg/kg de peso corporal por dia (ou 0,7-1,0 mg/m2 de superfície corporal por dia).

Amostras de sangue para determinação de: glicemia, insulina, HbA1C, triglicerídeos, colesterol total, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1, osteocalcina, ICTP e PIIINP são coletadas em T0 (antes do início da terapia de reposição hormonal com rhGH) e em T6 (após 6 meses de rhGH, aproximadamente 10-12 desde a última dosagem).

Dos leucócitos isolados das amostras colhidas em T0 e T6, o DNA é extraído. A metilação do DNA é realizada com bissulfito de sódio e PCR-Pirosequenciamento.

A idade biológica (epigenética) é medida com dois algoritmos de Zbiec-Piekarska e de Daunay, baseados no nível de metilação do DNA em loci específicos. Para termos uma estimativa da idade epigenética (biológica) independente da idade cronológica, utilizamos uma medida definida como aceleração da idade, para cujo cálculo aplicamos um modelo de regressão linear tendo a idade cronológica como variável independente e a idade epigenética como variável dependente; a diferença entre o valor observado e o valor previsto do modelo representa a aceleração da idade devido a um efeito propriamente epigenético. Caso a idade epigenética seja superior à idade cronológica, a aceleração da idade tem um valor positivo expresso em anos, caso contrário negativo.