Биологический возраст детей с дефицитом гормона роста, проходящих заместительную гормональную терапию (ETABIOGHD)

12 детей обоего пола с изолированным дефицитом гормона роста (определено в соответствии с критериями, предусмотренными примечанием 39 AIFA для этой патологии: низкий рост: ≤ -3 DS или ≤ -2 DS; темп роста/год ≤ -1,0 DS на возраст и пол оценивался на расстоянии не менее шести месяцев; пик ГР в двух различных тестах фармакологической стимуляции < 8 нг/мл), набранный в Региональном справочном центре по нарушениям роста, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Милан. Критерием исключения из исследования (и из лечения рчГР) является наличие органических гипоталамо-гипофизарных патологий (диагностируемых с помощью энцефалического ПМН).

В базальных условиях (до лечения) собираются клинические и антропометрические/аукометрические данные (рост, вес, ИМТ), включая оценку состава тела с помощью биоэлектрического импедансного анализа. Те же оценки повторяются через 6 месяцев лечения рекомбинантным гормоном роста (см. ниже).

Каждому субъекту проводится заместительная терапия рчГР в дозе 0,025-0,035. мг/кг массы тела в сутки (или 0,7-1,0 мг/м2 площади поверхности тела в день).

Образцы крови для определения: гликемии, инсулина, HbA1C, триглицеридов, общего холестерина, ЛПНП, ЛПВП, вчПЦР, ИФР-1, остеокальцина, ICTP и PIIINP отбирают в Т0 (до начала заместительной гормональной терапии рчГР). и на Т6 (через 6 месяцев применения рчГР, примерно через 10-12 месяцев после последнего приема).

Из лейкоцитов, выделенных из проб, взятых на Т0 и Т6, экстрагируют ДНК. Метилирование ДНК проводят с помощью бисульфита натрия и ПЦР-пиросеквенирования.

Биологический возраст (эпигенетический) измеряется с помощью двух алгоритмов Збица-Пиекарской и Дауне, основанных на уровне метилирования ДНК в определенных локусах. Чтобы получить оценку эпигенетического возраста (биологического), который не зависит от хронологического возраста, мы используем определенную меру, определяемую как ускорение возраста, для расчета которого мы применяем модель линейной регрессии с хронологическим возрастом в качестве независимой переменной и эпигенетическим возрастом как зависимая переменная; разница между наблюдаемым значением и прогнозируемым значением модели представляет собой ускорение старения из-за собственно эпигенетического эффекта. В случае, если эпигенетический возраст превышает хронологический, возрастное ускорение имеет положительное значение, выраженное в годах, в противном случае – отрицательное.