Vroege herkenning en interventie bij broers en zussen met een hoog risico op neurologische ontwikkelingsstoornissen (ERI-SIBS)

Onderzoekers zullen contact opnemen met geïnteresseerde ouders om te beoordelen of ze in aanmerking komen en gedetailleerde onderzoeksinformatie te verstrekken. Ouders geven schriftelijke toestemming voordat ze de nulmeting (T0) voltooien en op basis van de scores op de belangrijkste uitkomstmaten worden kinderen in de juiste groep ingedeeld. Baby's zonder tekenen van bezorgdheid en broers en zussen van TD-kinderen worden toegewezen aan Groep 1 (CM); zuigelingen zonder tekenen van bezorgdheid (scores op de Griffiths-3 en CSBS-ITC liggen binnen het normale bereik) en broers en zussen van kinderen met ASS worden toegewezen aan Groep 2 (AM); baby's met een algemene quotiëntscore lager dan 85 met behulp van Griffiths-3 en/of ten minste één score boven de "zorg"-grens met behulp van de CSBS-ITC zullen worden toegewezen aan Groep 3 (EI). Gezinnen die in groep 2 en 3 zijn ingedeeld, starten binnen een maand na de nulmeting met de interventie. Gezinnen die zijn toegewezen aan Groep 1 zullen alleen de evaluaties op verschillende tijdstippen uitvoeren. Beoordelingen zullen worden uitgevoerd bij aanvang (T0), dat wil zeggen wanneer de ouders hun toestemming geven en binnen de 8 levensmaanden van het kind, na 6 maanden vanaf het begin van de interventie (T1) en na 12 maanden vanaf het begin van de interventie. de interventie (T2).

Technologische beoordeling van sociaal gedrag en gezamenlijke aandacht:

- video-opname van ESCP via Kinect Azure-camera om kwantitatieve gegevens met betrekking tot gezamenlijke aandacht te verzamelen en te analyseren.

De toediening van de ECSP-I zal op video worden opgenomen via een Azure Kinect-camera om automatisch de kijkoriëntatie te extraheren en de gezamenlijke aandacht kwantitatief te beoordelen.

- Aankoop van eye-trackers Er zal ook een experimenteel Eye-Tracker Screening (ETS)-protocol voor kinderen worden ontwikkeld. Concreet zullen korte video's worden gebruikt om het vermogen van kinderen te meten om bekende/onbekende gezichten te verwerken en om te reageren op sociale stimuli, met name referentiële blik. De oogbewegingen van de kinderen worden geanalyseerd met behulp van de eye-tracker (Tobii Pro Fusion) en geëxtraheerd met behulp van de juiste software.

Bij rekrutering (T0) zullen anamnestische, sociodemografische gegevens en auxologische en klinische parameters bij de geboorte verzameld worden.

Biomoleculaire beoordeling Speekselmonsters zullen worden verzameld met behulp van 3 verschillende kits, respectievelijk voor DNA- of RNA-extractie, en voor eiwitdetectie, via sponsachtige wattenstaafjes die in de mond van de baby worden ingebracht, waardoor de speekselafname niet-invasief, eenvoudig, snel en vooral is. , pijnloos. Er zullen speekselmonsters worden verzameld van alle probands (op T0, T1 en T2) en van hun broers en zussen en ouders op T0 om de genetische overdracht van ouder op kind te beoordelen in relatie tot het risico op ASS. Indien mogelijk wordt een monster van ongeveer 40 ml bloed (van de ouders) afgenomen.

Biologische monsters van familiekwartet worden als volgt verzameld:

1. Bij alle ingeschreven kinderen, hun oudere broers en zussen en ouders zal genetische analyse worden uitgevoerd door middel van een Next-Generation Sequencing (NGS) gengerichte panelbenadering om genen te analyseren die betrokken zijn bij synaptogenese en immunogenetische regulatie.
2. Epigenetische analyse van de miRNome in speeksel verzameld van alle ingeschreven kinderen op alle tijdstippen zal worden uitgevoerd door NGS. Epigenetische analyse zal het mogelijk maken een panel van microRNA's te definiëren die onderscheid kunnen maken tussen kinderen met ASS en kinderen met een typische ontwikkeling.
3. Analyse van inflammatoire cytokines en neurotrofe factoren met behulp van een geautomatiseerd immunoassaysysteem (ELLA, Biotech) zal worden uitgevoerd in probands op T0, T1 en T2. Ouders zullen ook worden gekarakteriseerd op cytokine- en lymfocytensubset op T0.

Correlaties tussen klinische parameters en alle biologische variabelen (genetisch, epigenetisch, inflammatoir) zullen worden uitgevoerd om moleculaire biomarkers te correleren met neurologische veranderingen in de follow-up en pre-post interventie.

Steekproefgrootte

Gezien het belang van ECSP-I in dit project, als gedragsmatige uitkomstmaten als hulpmiddel voor het verkrijgen van kwantitatieve gegevens door middel van technologie, berekenen we de steekproefomvang om een ​​verband tussen de ECSP-I-score en de groepen (1, 2 en 3) te detecteren. op elk tijdstip. De berekening werd uitgevoerd op basis van voorlopige gegevens (nog niet gepubliceerd) uit de Italiaanse versie van ESCP (ECSP-I). Uitgaande van een standaarddeviatie van 0,56 voor de ECSP-I-schaal en een significantieniveau α= 0,01, verkregen door toepassing van de Bonferroni-correctie voor meerdere vergelijkingen, uitgevoerd in paren tussen groepen, op de type I-fout, verkregen we een steekproefomvang van 14 proefpersonen per groep om een ​​verschil van 0,8 tussen de gemiddelden van elke groep te detecteren met behulp van een 2-zijdige Student's t-test voor onafhankelijke steekproeven, met een power van 80%. Uitgaande van een uitvalpercentage van 10% neemt de benodigde steekproefomvang toe tot 16 proefpersonen per groep, dat wil zeggen in totaal 48 proefpersonen.

statistische analyse

Analyse (met behulp van STATA of SPSS 28.00) zal de standaardmethoden volgen voor onderzoeken met behulp van vergelijkingen tussen de drie groepen. Eerst zal een studie van de rijpingstrajecten van de zuigelingen worden uitgevoerd, met een beschrijving van de pre-post-interventieveranderingen in de uitgevoerde tests. Ten tweede zullen kwantitatieve evaluaties van gezamenlijke aandachtsgegevens en moleculaire markers worden uitgevoerd, gedetecteerd en beschreven aan de hand van gemiddelde en standaarddeviatie in het geval van een Gaussiaanse verdeling van variabelen, of mediaan en interkwartielbereik in het geval van een niet-Gaussiaanse verdeling. De normaliteit van verdelingen zal worden beoordeeld door de Shapiro-Wilk-test toe te passen. Voor categorische variabelen worden absolute frequenties en percentages gerapporteerd. Genetische analyse van intrafamiliale allelische overerving zal worden uitgevoerd door AFBAC (Affected Family-Based Controls) en TDT (Transmission Disequilibrium Test). De immunologische parameters verkregen uit de groepen kinderen met ASS en kinderen met een typische ontwikkeling zullen worden geanalyseerd met behulp van een niet-parametrische Mann-Whitney-test die het mogelijk zal maken om specifieke immunologische biomarkers van ASS-geassocieerde neuro-inflammatie te identificeren. Bovendien zullen klinische parameters gecorreleerd worden met immunologische biomarkers die kenmerkend zijn voor ASS-kinderen. Ten slotte zal epigenetische analyse ons in staat stellen een panel van microRNA's te definiëren die onderscheid kunnen maken tussen kinderen met ASS en kinderen met een typische ontwikkeling. Met behulp van computeralgoritmen zullen de potentiële doelwitten, routes en biologische functies die door deze groep miRNAs worden gedereguleerd, worden geanalyseerd. Deze gegevens zullen ook worden geanalyseerd met betrekking tot de klinische parameters die in het onderzoek zijn geëvalueerd en zowel de genetische als de inflammatoire karakterisering van de onderzochte proefpersonen.