V-immuun: een nieuwe immunoglobulinetherapie voor immunodeficiëntie (VIP)

Invoering:

Immunoglobuline wordt gebruikt als een behandeling voor verschillende medische aandoeningen, niet alleen vanwege het vermogen om infectie te bestrijden als vervangingstherapie, maar ook vanwege zijn ontstekingsremmende en immunomodulerende effecten. Immunoglobulinen worden voornamelijk gekenmerkt door hun antilichaamfunctie, met verschillende klassen en subklassen die verschillende rollen vervullen. B-cellen zijn primair verantwoordelijk voor de humorale adaptieve immuunrespons (door antilichaam gemedieerd). Immunoglobulinen, die de moleculen zijn met antilichaamfunctie, dienen als de receptoren van B -cellen, verankerd aan het membraan via een moleculair complex samengesteld uit moleculen die beide de immunoglobuline verankeren en signaaltransductie in de cel bevorderen. Dit maakt B -celactivering mogelijk, waardoor een signaalcascade wordt geactiveerd die leidt tot terminale differentiatie in plasmacellen of geheugencellen.

Inborn fouten van immuniteit (primaire immunodeficiency- PID's) vertegenwoordigen een grote, heterogene en snelgroeiende groep van genetische ziekten, voornamelijk (maar niet uitsluitend) veroorzaakt door verlies- of gain-functie kiemlijnmutaties in genen geassocieerd met de immuunrespons. Ondanks hun individuele zeldzaamheid, beïnvloeden aangeboren fouten collectief een aanzienlijk deel van de patiënten, met een geschatte globale prevalentie van 1 op 1.200-2.000. Ze omvatten nu ongeveer 500 bekende genetische oorzaken, onderverdeeld in 10 categorieën vermeld in de classificatie van 2022 door de International Union of Immunological Society (IUIS), waarvan ongeveer tweederde is geïdentificeerd in het afgelopen decennium. Als bewijs van de dynamische ontwikkeling van het veld, zijn de afgelopen jaren ongeveer 30 nieuwe ziekten beschreven in de afgelopen jaren.

Wereldwijd, de meest voorkomende gebreken bij PID's die het voor de PID's passend zijn, zijn de productie van een verminderde antilichaamproductie, met selectieve IgA-deficiëntie en gemeenschappelijke variabele immunodeficiëntie het meest voorkomen. Ten minste 80% van de patiënten met de diagnose antilichaamtekort ontvangt IgG -vervangingstherapie. PID's kunnen een niet -herkende onderliggende toestand zijn geassocieerd met auto -immuun, allergische en lymfoproliferatieve ziekten en kunnen daarom vele jaren niet gediagnosticeerd blijven. Patiënten met de diagnose B -celdisfunctie en resulterende antilichaamtekorten vereisen immunoglobuline G (IgG) vervanging, een veilige en effectieve therapeutische optie voor het voorkomen van infecties bij patiënten met PID's.

Intraveneuze immunoglobine wordt gebruikt om een ​​breed scala aan ziekten te behandelen. De goedgekeurde aanwijzingen kunnen echter worden onderverdeeld in drie hoofdcategorieën: primaire en secundaire antilichaamtekorten, verticaal overgedragen HIV, chronische lymfocytische leukemie (CLL), immuun trombocytopenische purpura (ITP), chronische inflammatoire demyelinerende polyneuropathie (CIDP), ernstige dissemineerde infecties en graftresus-ziekte. Het wordt aanbevolen om immunoglobuline -vervangingstherapie te initiëren bij alle patiënten die voldoen aan de diagnostische criteria voor IgG hypogammaglobulinemie, of ze nu Agammaglobulinemie hebben, gemeenschappelijk variabele immunodeficiëntie (CVID), of IGG -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass -subclass Immunoglobulineproduct voor intraveneus gebruik bij 5% concentratie, merk V-mmune, voor de behandeling van aangeboren fouten van humorale immuniteit / primaire immunodeficiënties waarbij een verminderde productie van IgG-klasse immunoglobulines door B-lymfocyten betrokken is.

Considering the relative unavailability of blood products, among which immunoglobulins are in the most critical category, the approval of new products in our country is of utmost importance due to the increasing need for this medication-even for well-defined indications such as hypogammaglobulinemia, whether primary or secondary, as well as neuropathies like Guillain-Barré syndrome, chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy (CIDP) en hematologische aandoeningen zoals immuuntrombocytopenische purpura. Verschillende factoren hebben bijgedragen aan dit tekort, waaronder steeds strengere veiligheidseisen; de moeilijkheid bij het verkrijgen van hoogwaardig plasma dat voldoet aan de normen van belangrijke regelgevende instanties zoals de FDA en EMA; de noodzaak om de productieprocessen te verbeteren; de vermindering van het aantal donoren vanwege de Covid-19-pandemie; en de toegenomen vraag naar IVIG aan het begin van de pandemie, toen immunoglobuline werd gebruikt als een therapeutische poging voor een toen onbekende ziekte.

Daarom is de beschikbaarheid van nieuwe producten, zoals V-immuun geproduceerd door Virchow-laboratoria in India, die effectief zijn voor de behandeling van duidelijk gedefinieerde indicaties en de noodzakelijke veiligheidsprofiel-narische minimale bijwerkingen bezitten tijdens en na klinisch gebruik-essentieel.

De onderzoekers presenteren hier een klinische studie voor goedkeuring van de regelgeving van een nieuwe immunogloblin V-immune® in de Braziliaanse markt voor primaire immunodeficiëntie.

Doelstellingen

De doelstellingen van de studie zijn:

1. Om de werkzaamheid van de menselijke normale immunoglobuline-preparaat V-immune® te evalueren voor patiënten met primaire humorale immunodeficiëntie bij het voorkomen van de snelheid van ernstige bacteriële infectie in 12 maanden in vergelijking met historische controles;
2. Om de veiligheid van de menselijke normale immunoglobuline-voorbereiding V-immune® te evalueren met betrekking tot het waargenomen aandeel infusies met een of meer tijdelijk geassocieerde bijwerkingen bij patiënten met primaire humorale immunodeficiëntie;

3. Om de farmacokinetiek van intraveneuze V-immune® te evalueren bij patiënten met primaire humorale immunodeficiëntie.

   Methoden:

   Studieontwerp Dit is een prospectieve, fase III, open-label, niet-gerandomiseerde, multicenter, single-groupstudie met een historische controle voor de reguliere toediening van V-immune® via de intraveneuze route.

   Wervingsplan werving zal plaatsvinden via 10 nationale referentie -immunologiecentra die gespecialiseerd zijn in de behandeling van primaire immunodeficiëntie met intraveneuze immunoglobuline -infusie. Patiënten die al regelmatig intraveneuze immunoglobulinetherapie ontvangen en aan de geschiktheidscriteria voldoen, worden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek en over te schakelen van hun huidige product naar het onderzoeksproduct (IP) voor een duur van 12 maanden.

   Rekruteringsbenadering Patiënten die voldoen aan de inclusiecriteria en al IgG -behandeling krijgen in de deelnemende centra zullen worden benaderd voor opname in de VIP -studie. Zodra het geïnformeerde toestemmingsformulier (ICF) is ondertekend, begint de deelnemer V-immune® (on-pharma) te ontvangen volgens het studieprotocol.

   Omdat dit een onderzoek met één groep is, zal randomisatie niet worden uitgevoerd. Verblindend gezien het feit dat dit een onderzoek met één groep is en de in aanmerking komende patiënten al worden behandeld met een andere in de handel verkrijgbare immunoglobuline, die zal worden vervangen door V-immune®, wordt verblindende overbodig geacht.

   Experimentele interventie Het onderzoeksproduct (IP) is V-immune®, normale menselijke immunoglobuline I.P. 5% (5G/100 ml), vervaardigd uit gekwalificeerd menselijk plasma voor intraveneus gebruik. Elke flacon bevat menselijke immunoglobuline 50 g/l, maltose 100 g/l en water voor injectie. De 5% menselijke immunoglobuline -oplossing voor intraveneuze toediening I.P. is een steriele, pyrogenvrije bereiding van normale menselijke immunoglobuline in een enkele dosis vorm voor intraveneuze infusie. Elke 10 ml, 50 ml en 100 ml bevat respectievelijk 0,5 g, 2,5 g en 5 g normale menselijke immunoglobuline, en wordt bereid uit gekwalificeerd menselijk plasma met behulp van membraanfiltratie, gecombineerde chromatografische stappen en virale inactiveringsprocedures. De IGA -inhoud is niet groter dan 2 mg/ml. De IgG -subklasse verdeling is vergelijkbaar met die gevonden in normaal menselijk serum.

   Het productieproces maakt gebruik van plasma verzameld van donoren die worden gescreend op basis van de medische geschiedenis, in overeenstemming met richtlijnen voor wettelijke autoriteit. Het bloed wordt getest op verplichte infectieziekten. Alleen plasma dat negatief test op HBSAG-, HCV- en HIV -antilichamen wordt in het proces gebruikt.

   Normale menselijke immunoglobuline I.P. 5% (5G/100 ml) V-immune® wordt elke 3 weken (+/- 3 dagen) via een intraveneuze (iv) route toegediend met een dosis van 600 mg/kg met de hieronder opgegeven infusiesnelheid gedurende een duur van 3 tot 6 uur:

   0,01 ml/kg/min 0-30 min, 0,02 ml/kg/min 31 tot 45 min, 0,04 ml/kg/min 46 tot 60 min en 0,06 ml/kg/min 61 min tot het einde van de infusie.

   Dosis escalatie dosis escalatie treedt geleidelijk op, tenzij bijwerkingen (AE's) optreden. De dosis wordt alleen verhoogd als er een goede tolerantie is, zonder de aanwezigheid van bijwerkingen. Als er een AE optreedt, moet de infusie 20 tot 30 minuten worden gepauzeerd. Het gebruik van loratadine, paracetamol en Ondansetron is toegestaan. Uitzonderlijk kan een ander medicijn uit dezelfde klasse worden gebruikt, op voorwaarde dat het Farmacokinetics Study Center wordt geïnformeerd. Zodra de patiënt verbetert, wordt de infusie met een verminderde snelheid hervat en terugkeert naar de initiële infusiesnelheid. De patiënt zal 60 minuten worden waargenomen nadat de infusie is afgelopen voor klinische beoordeling en monitoring van mogelijke bijwerkingen.

   Pre-medicatie pre-medicatie voorafgaand aan infusie van het onderzoeksproduct: snelle infusie van 500 ml 0,9% natriumchloride (NaCl) IV, difenhydramine 50 mg iv en hydrocortison 200 mg iv, gevolgd door het onderzoeksproduct toegediend bij geleidelijk toenemende infusies zoals hierboven beschreven. Na infusie moet 0,9% NaCl worden voortgezet bij 1 ml/kg/uur. Het gebruik van pre-medicatie is standaard medische praktijk en wordt noodzakelijk geacht voor de veiligheid van de deelnemers.

   Snelle isotone zoutinfusie vóór toediening en langzame isotone zoutinfusie om veneuze toegang gedurende ten minste 30 tot 40 minuten te behouden zijn nodig en de standaardpraktijk bij de toediening van deze bloedproducten. Snelle kristalloïde vóór infusie vermindert het risico op hoofdpijn en aseptische meningitis na de toediening, evenals het risico op trombo-embolische gebeurtenissen. Crystalloid-toediening na de onderzoeksproductinfusie vermindert het risico op ernstige en potentieel levensbedreigende bijwerkingen als gevolg van anafylactische reacties door de snelle toediening van IV-medicijnen bij een potentieel geschokte patiënt mogelijk te maken, waardoor de noodzaak van centrale veneuze toegang tot noodsituatie wordt vermeden.

   Samenvatting van de pre-medicatie:

   Snelle infusie van 500 ml 0,9% natriumchloride (NaCl) IV

   Difenhydramine* 50 mg iv (volwassene); Pediatrisch: 1,25 mg/kg IV

   Hydrocortison ** 200 mg iv (volwassene); Pediatrisch: 3 mg/kg IV

   Na infusie: 0,9% NaCl bij 1 ml/kg/uur gedurende een uur

   Trombo -embolie -risico: gebruik de langzaamst mogelijke infusiesnelheid

   * Beheer 30 minuten voor infusie.

   ** Beheer 30 minuten tot 1 uur voor infusie.

   Voor personen die risico lopen op trombo -embolie, moet de infusiesnelheid zo laag mogelijk worden gehouden.

   Trombo -embolie -risicofactoren zijn onder meer: ​​gevorderde leeftijd, obesitas, hypertensie, diabetes mellitus, geschiedenis van eerdere trombo -embolische gebeurtenissen, bekende verworven of aangeboren trombofiele aandoeningen, langdurige immobilisatie, ernstige hypovolemie of verhoogde bloedviscositeit.

   Behandelingsintervallen tussen de administraties moeten tijdens het onderzoek constant blijven, op voorwaarde dat de IgG -trogniveaus> 500 mg/L blijven.

   Als lichaamsgewicht met meer dan 5% verandert in vergelijking met de basislijn (screeningbezoek), wordt de dosis aangepast om een ​​consistente mg/kg lichaamsgewicht dosering te behouden.

   In het geval van klinisch significante hypotensie en/of anafylactische reacties, naast het stoppen van de infusie en het toedienen van passende ondersteunende zorg (waaronder epinefrine, antihistamines, corticosteroïden, aanvullende zuurstof en volume -expansie) en het vastleggen van het incident in de CRF als een AE, kan de deelnemer zijn teruggetrokken bij de onderzoeker. In dergelijke gevallen kunnen deelnemers, als ze dat wensen, follow-up bezoeken voltooien

   Contra -indicaties en voorzorgsmaatregelen gerelateerd aan de IP -normale menselijke immunoglobuline voor intraveneuze toediening I.P. 5% is gecontra -indiceerd bij patiënten met selectief IgA -tekort.

   Patiënten kunnen ernstige overgevoeligheidsreacties of anafylaxie ervaren in aanwezigheid van detecteerbare IgA -niveaus na infusie van normale menselijke immunoglobuline I.P. 5%. Het optreden van ernstige overgevoeligheidsreacties of anafylaxie onder dergelijke aandoeningen moet een alternatieve therapie veroorzaken.

   De intraveneuze oplossing van normale menselijke immunoglobuline mag alleen intraveneus worden toegediend.

   Extra vermelde voorzorgsmaatregelen met betrekking tot het gebruik van normale menselijke immunoglobuline I.P. 5% inclusief:

   Overgevoeligheid: onmiddellijke overgevoeligheid en anafylactische reacties zijn zeldzaam maar mogelijk. Als overgevoeligheid optreedt, stop dan onmiddellijk de infusie en start de juiste behandeling. Medicijnen zoals epinefrine en antihistaminica moeten direct beschikbaar zijn voor de onmiddellijke behandeling van acute overgevoeligheidsreacties, waaronder anafylaxie.

   Nierdisfunctie: acute nierfalen, osmotische nefropathie en dood kunnen optreden bij IVIG -gebruik. Zorg ervoor dat de patiënt voorafgaand aan toediening niet hypovolemisch is. Bij patiënten met een risico op nierdisfunctie als gevolg van reeds bestaande nierinsufficiëntie of aanleg voor acuut nierfalen (bijv. Diabetes mellitus, hypovolemie, obesitas, gebruik van nefrotoxische medicijnen of leeftijd> 65) moet IVIG worden toegediend met de minimuminfusie.

   Aseptisch meningitis syndroom (AMS): komt zelden voor bij IVIG -behandeling. Kan binnen enkele uren tot 2 dagen na de behandeling beginnen. Stoping van IVIG leidt meestal tot volledig herstel zonder gevolgen. Meer gebruikelijk met hoge doses (2 g/kg) en/of snelle infusie.

   Hemolyse: IVIG -producten kunnen bloedgroep antilichamen bevatten die werken als hemolysines, rode bloedcellen van rode bloedcellen en een positieve directe antiglobulinetest en, zelden, hemolyse veroorzaken. Vertraagde hemolytische anemie kan optreden als gevolg van de sekwestratie van rode cellen en acute hemolyse, consistent met intravasculaire hemolyse.

   Transfusiegerelateerd acuut longletsel (TRALI): niet-cardiogene longoedeem kan optreden na IVIG-toediening. Trali wordt gekenmerkt door ernstige ademnood, longoedeem, hypoxemie, normale linkerventrikelfunctie en koorts, die meestal 1 tot 6 uur na de behandeling optreedt. Patiënten moeten worden gecontroleerd op longinwerkingsgebeurtenissen. Als Trali wordt vermoed, moeten passende tests worden uitgevoerd voor anti-neutrophiele antilichamen in zowel het product- als het patiëntserum. Behandeling omvat zuurstoftherapie en beademingsondersteuning.

   Overdraagbare middelen: normale menselijke immunoglobuline I.P. 5% is afgeleid van menselijk plasma. Vanwege effectieve donorscreening- en productieprocessen is het risico op overdracht van virale ziekten extreem laag. Het theoretische risico op de transmissie van Creutzfeldt-Jakob Disease (CJD) wordt ook als extreem afgelegen beschouwd.

   Monitoring - Laboratoriumtests: periodieke monitoring van de nierfunctie en de urine -output is cruciaal bij patiënten met een verhoogd risico op acuut nierfalen. De nierfunctie (inclusief serumureum- en creatininegehalte) moet worden beoordeeld vóór de initiële infusie en periodiek volgens het bezoekschema. Vanwege een potentieel verhoogd risico op trombose, moet de beoordeling van bloedviscositeit in aanvang worden overwogen bij patiënten met een risico op hyperviscositeit, inclusief patiënten met cryoglobulinemie, vasten chylomicronemie/duidelijk verhoogde triglyceriden of monoklonale gammopathieën. Als tekenen/symptomen van hemolyse worden waargenomen na infusie, moeten passende laboratoriumtests worden uitgevoerd. In gevallen van vermoedelijke trali moeten tests voor anti-neutrophiele antilichamen worden uitgevoerd op het product en de patiëntserum.

   Patiëntinformatie: Patiënten moeten worden geïnstrueerd om onmiddellijk symptomen te melden, zoals verminderde urineput, plotselinge gewichtstoename, vloeistofretentie, oedeem en/of kortademigheid, wat kan wijzen op nierletsel.

   Zwangerschap - Categorie C: Reproductiestudies bij dieren zijn niet uitgevoerd met normale menselijke immunoglobuline voor IV -gebruik. Het is ook onbekend of het foetale schade kan veroorzaken wanneer het wordt toegediend aan een zwangere vrouw of de reproductieve capaciteit beïnvloedt. Het moet alleen tijdens de zwangerschap worden gebruikt als het absoluut noodzakelijk is. Zwangere vrouwen maken deel uit van de uitsluitingscriteria van deze studie.

   Presentatie van het onderzoeksproduct (IP) Normale menselijke immunoglobuline voor intraveneuze toediening I.P. 5%, V-immune®, is verkrijgbaar in flesjes van 0,5 g/10 ml, 2,5 g/50 ml en 5 g/100 ml (5% concentratie), in een dosisindeling voor intraveneuze toediening.

   IP-productie en etikettering V-immune® Immunoglobuline wordt vervaardigd, verpakt en gelabeld door Virchow Biotech Private Limited en geïmporteerd door Onpharma Importadora Exportadora E Distribuidora de Medicamentos Ltda, in overeenstemming met de huidige voorschriften. De voorbereiding en het labelen van de IP -richtlijnen voor Good Manufacturing Practice (GMP) en de distributie ervan houdt zich aan de richtlijnen voor Good Distribution Practice (BBP). IP -labels zullen in het Portugees zijn en voldoen aan de Braziliaanse wettelijke vereisten.

   Opslag- en gebruiksomstandigheden van de IP V-immune®-immunoglobuline moeten worden bewaard in een beveiligd gebied met beperkte toegang, bij voorkeur in een afgesloten kast, beschermd tegen licht, en bij een temperatuur tussen 2 ° C en 8 ° C worden bewaard. V-immune® mag niet worden bevroren.

   Patiëntopsluitingsprocedures Patiënten die niet zijn geselecteerd voor farmacokinetische (PK) -analyse, moeten 60 minuten vóór infusie in de studiecentra aankomen en 60 minuten na de infusie eindigen voor klinische beoordeling en monitoring voor bijwerkingen.

   Voor geselecteerde/in aanmerking komende patiënten voor PK -analyse is dezelfde opsluitingsperiode van toepassing op infusiedagen 1 tot 8 en 10 tot 17. Op dag 9 moeten deze patiënten echter 60 minuten vóór de infusie aankomen en tot 6 uur na de infusie voor het verzamelen van bloedmonsters in het midden blijven. Ze moeten ook terugkeren voor bloedafnames na 24 uur, 72 uur, 7 dagen, 14 dagen en 21 dagen na de 9e infusie.

   Farmacokinetische parameters

   De volgende farmacokinetische parameters worden voor deze studie bepaald:

   Cmax: maximale plasmaconcentratie bereikt, gebaseerd op experimentele gegevens die rechtstreeks zijn verkregen uit de plasma-concentratietijdcurve.

   AUC₀-T (gebied onder de curve): gebied onder de plasmaconcentratietijdcurve van tijd nul tot de laatste concentratie boven de ondergrens van kwantificering, berekend met behulp van de trapeziumvormige regel.

   AUCInf: gebied onder de plasmaconcentratie-tijdcurve van tijd nul tot oneindig (geëxtrapoleerd), berekend als AucInf = AUC₀-T + CT/Kel, waarbij CT de laatste meetbare concentratie is en Kel de eliminatiesnelheidconstante is.

   TMAX: Tijd om CMAX te bereiken. Kel: Eliminatiesnelheid constant, geschat uit de helling van de lineaire regressie van de natuurlijke logaritme van concentratie versus tijd voor ten minste drie gegevenspunten boven de ondergrens van kwantificering.

   T½ (halfwaardetijd): eliminatiehalfwaardetijd, berekend als ln (2)/kel. VD (verdelingsvolume): Verdelingsvolume uit de terminale fase van de farmacokinetische curve, berekend als dosis/(Kel × AucInf).

   Bemonsteringsschema -monsters worden verzameld met behulp van 7,5 ml buizen met gelafscheiders, gelabeld met deelnemersnummer, verzamelnummer, tijdstip, infusienummer, productcode (IgG) en protocolnummer. Bloedmonsters van elk 7,5 ml worden verzameld vóór infusienummer 0 (eerdere IVIG-behandeling die door de deelnemer wordt gebruikt) en vóór infusies 1 tot 9 van V-immune®.Post-infusie Farmacokinetische monsters zullen worden verzameld na de negende (9e) infusie-analytische fase volgens de literatuur, de analytische fase betrokken bij de literatuur, de analytische fase betrokken bij de literatuur, de analytische fase verbiedt een steekproeffase op basis van enzymatische preparatie met trypsine. Dit kan worden voorafgegaan door reductie en/of alkylering gevolgd door enzymatische digestie.

   De aangehaalde voorbereidingsbenadering is bedoeld om een ​​robuuste en selectieve MRM-methode (meervoudige reactiemonitoring) te ontwikkelen en toe te passen, die in staat is om een ​​specifiek Q1/Q3-ionenpaar te detecteren dat is afgeleid van de digestie van het doel-eiwit in dit geval, IgG-Thus indirect de plasmaconcentratie bepalen. Gezien het bestaan ​​van meerdere IgG -subklassen (IgG1, IgG2, IgG3 en IgG4), zijn specifieke peptidefragmenten te vinden in eiwitdatabases en wetenschappelijke literatuur die uniek zijn voor elke subklasse. De volgende peptidesequenties zijn aangenomen als het startpunt voor de ontwikkeling van de bioanalytische methode voor het kwantificeren van het totale IgG en de subklassen ervan:

   Peptide fnwyvdgvevhnak - specifiek voor IgG1 peptide CCVECPPPAPPAppVAGPSVflfPPPKPK - Specifiek voor IgG2 Peptide WyvdgVevhnak - Specifiek voor IgG3 Peptide TTPPVLDSDGSFLYSR - Specifieke Forg4 Sinds de Analyt is een endogeen is een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, een Bioanalous Substance, A BioAnalytic Surrogaatmatrix (in dit geval, runderplasma) is noodzakelijk. Dit surrogaat zal worden gebruikt om kalibratiecurves en kwaliteitscontrolemonsters te genereren die op een vergelijkbare manier worden verwerkt als de onbekende monsters van deelnemers aan de studie.

   Voor monsterbereiding en LC-MS/MS-analyse kunnen de volgende reagentia worden gebruikt als extractie met eerdere reductie en alkylering vereist is: Ammoniumbicarbonaat, 2,2,2-trifluorethanol, DL-Dithiothreitol, jodoacetamide, forminezuur of azijnzuur, onder andere. Als alleen eiwitprecipitatie gevolgd door enzymatische digestie wordt uitgevoerd, kunnen reagentia zoals aceton, isopropanol, perchloorzuur, acetonitril of methanol worden gebruikt.

   In beide gevallen moet het monster worden geïncubeerd met MS-grade trypsine met een minimale voorgestelde concentratie van 1 g/L.

   Chromatografische methoden zullen mobiele fasegradiënten gebruiken om de scheiding van de verschillende peptideketens te verbeteren die tijdens de extractie kunnen worden gevormd. Het systeem werkt op drukken die compatibel zijn met UPLC, met een waterige mobiele fase die 0,1% mierenzuur bevat en een organische fase bestaande uit methanol of acetonitril, ook met 0,1% mierenzuur. Aanbevolen kolommen zijn onder meer vaste kerntypen zoals Waters X-Bridge C8 (3,0 x 30 mm, 3,5 µm) of Agilent Eclipse plus C18 RRHD (1,8 μm, 2,1 × 100 mm).

   Detectie van de analyten wordt uitgevoerd met behulp van een drievoudige vierpoolmassaspectrometer, model API6500 van SCIEX. De methode zal worden gevalideerd in overeenstemming met RDC nr. 27, van 17 mei 2012, met betrekking tot de validatieparameters van lineariteit, precisie, nauwkeurigheid, overdracht, matrixeffect, selectiviteit, stabiliteit in biologische matrix en stabiliteitscontrole of standaardbehandeling: de controlegroep zal bestaan ​​uit historische controles zoals beschreven in de literatuurco-interventies: geen co-interventies worden toegestaan. Follow-up voor 12 maanden.

   Bezoeken:

   • Alle immunoglobuline -infusiemogelijkheden met het verzamelen van gegevens - er wordt verwacht dat er 17 bezoeken zullen zijn voor V -immune® -infusie gedurende 1 jaar. Patiënten worden waargenomen:

   • Onmiddellijk vóór infusie;
   • Tijdens infusie en tot 60 minuten later;
   • 24 en 72 uur na het begin van de infusie van het onderzoeksproduct - per telefooncontact (6).

   Laboratoriumgegevens:

   Bij "Baseline", en voordat u 1e, 3e, 6e, 9e, 12e en 17e infusies uitvoert:

1. BHCG, CBC, bloedplaatjes, elektrolyten, serumglucose, ureum, creatinine, AST, ALT, LDH, totaal en gedeeltelijke urine bilirubine (Type 1)

Voordat u 1e, 3e, 6e, 9e, 12e en 17e infusies uitvoert:

1. Haptoglobin, Coombs

Voor alle infusies:

1. Trog IgG -screeningbezoeken (T1 en T2)

Objectief:

Identificeer in aanmerking komende patiënten door het evalueren van inclusie- en uitsluitingscriteria, het meten van IgG -niveaus en het verkrijgen van geïnformeerde toestemming.

Activiteiten bij screening Bezoek T1: Receptie en geïnformeerde toestemming:

Geef een gedetailleerde uitleg van het onderzoek, inclusief doelstellingen, procedures, risico's en voordelen. Schreven geïnformeerde toestemming (ICF/instemming) moet worden verkregen door gekwalificeerd en gedelegeerd personeel en ondertekend door de onderzoeker voordat eventuele onderzoeksprocedures of screeninglaboratoria worden uitgevoerd.

Beoordeel tijd sinds de diagnose van primaire immunodeficiëntie. Beoordeel premedicatie -gebruik met eerdere IgG -infusie. Controleer osmolariteit en IGA -inhoud van vorige IgG. Beoordeel de naleving van de eerdere IgG -behandeling (infusiefrequentie en twee meest recente trogniveaus).

Schriftelijke geïnformeerde toestemming verkrijgen.

Demografische en medische geschiedenis gegevensverzameling:

Record leeftijd, geslacht, ras, gewicht en BMI. Verzamel medische geschiedenis, inclusief infecties en huidige medicijnen.

Beoordeling van de subsidiabiliteitscriteria:

Review inclusiecriteria (bijv. Bevestigde diagnose, geschikte leeftijd). Evalueer uitsluitingscriteria (bijv. Auto -immuunziekte, IgG -allergie).

Fysiek en klinisch onderzoek:

Een fysiek examen uitvoeren. Noteer vitale tekens (RR, HR, BP, temperatuur).

Voorbeeldverzameling voor laboratoriumtests:

Baseline IgG -niveaus:

Als twee eerdere IgG -niveaus> 500 mg/dl binnen 90 dagen, kan de patiënt doorgaan zonder een nieuw screening lab.

Als één eerdere IgG -niveau> 500 mg/dl binnen 30 dagen, gaat u naar T2 voor de tweede test.

Als IgG op T1> 700 mg/dl, kan de infusie zelfs vóór het T2 -resultaat doorgaan. Andere laboratoria per protocol. Kwaliteit van leven en symptoomvragenlijsten: SF-36 QOL-vragenlijst toepassen. Beoordeel de huidige symptomen die verband houden met de aandoening.

Activiteiten bij screening Bezoek T2:

Heroordeel de therapietrouw van IgG. Echeck inclusie/uitsluitingscriteria. Herhaal lichamelijk examen en vitalen. Verzamel het tweede IgG -monster indien nodig (kan op dezelfde dag optreden als eerste infusie indien voorafgaand niveau> 700 mg/dl).

Andere protocol-specifieke laboratoria. Flexibel venster: screening kan worden uitgebreid (de discretie van de onderzoeker) totdat de basislijn IgG> 500 mg/dl is bevestigd.

Eerste infusiebezoek (I1) Doelstelling: bevestig in aanmerking komen en start IP -toediening.

Activiteiten: beoordelingsresultaten beoordelen:

Bekijk Lab -bevindingen en geschiktheidscriteria. Bespreek abnormale resultaten en subsidiabiliteitsstatus.

Klinische beoordeling:

Update lichamelijk onderzoek en vitale tekenen. Beoordeel veranderingen van de gezondheidsstatus. Geef de instructies voor symptoomdagboek.

In aanmerking komende bevestiging:

Eindbevestiging van de subsidiabiliteit. Bekijk gelijktijdige medicijnen.

Lab -monsterverzameling:

Baseline IgG. Zwangerschapstest voor vrouwen in de vruchtbare leeftijd tenzij permanent steriel. Andere tests: CBC met bloedplaatjes, elektrolyten, glucose, ureum, creatinine, AST, ALT, LDH, urineonderzoek, pneumokokken en Haemophilus antilichaamtiters.

Pre-dosis IgG van eerder product. Pre-dosis PK-monsters.

Eerste infusie van V-immune®:

Leg de procedure uit. Record batchnummer en vervaldatum. Toets per infusieprotocol.

Monitor voor bijwerkingen (AES):

Registreer AE, infusiesnelheid bij aanvang, onderbrekingen, herstartsnelheid, totale infusietijd, totale IgG -dosis en premedicatiegebruik.

Gegevensverzameling na infusie:

Record AE's, vitale vitale na-infusie (30-60 min) en algemene toestand. Registreer de ontladingstijd.

Patiëntinstructies:

Bied na infusie richtlijnen, noodinstructies en teamcontact. Informeer dat vervolgoproepen op 24 en 72 uur plaatsvinden. Plan het volgende bezoek. Infusies 2 tot 16 (i2 tot i16) Doelstelling: voer elke 3 weken (± 3 dagen) infusies uit.

Activiteiten:

Bekijk eerdere resultaten en klinische status:

Bekijk eerdere laboratoria en symptomen. Update lichamelijk examen en vitalen. Bekijk infecties, ziekenhuisopnames, antibiotica, tijd tot resolutie en verloren werkdagen.

SF-36 bij infusies 8 en 16.

Labcollectie:

Pre-infusie IgG voor alle bezoeken. Pre-dosis PK-monsters voor infusies 1-9. Totaal 12 pk monsters per volwassene; Kinderen alleen pre-dosis. Infuions 3, 6*, 9, 12, 17: zwangerschapstest voor vrouwen met een vruchtbaar potentieel. Andere laboratoria: CBC, elektrolyten, glucose, ureum, creatinine, AST, ALT, LDH, urineonderzoek, haptoglobine, Coombs -test.

*Infusie 6: Pneumokokken- en Haemophilus -antilichaamtiters.

V-immune® infusie:

Record batch en vervaldatum. Per protocol toegeven. Controleer en documenteer AE's en alle infusiegegevens zoals in i1.

Post-infusie:

Record AE's, vitale vitale na-infusie (30-60 min), ontladingstijd, PK per sectie

Patiëntinstructies:

Richtlijnen na infusie, teamcontact, 24H/72H vervolgaanroepen, volgende bezoekplanning.

Lichamelijk onderzoek

Geleid door gekwalificeerd personeel, inclusief:

Algemeen uiterlijk, hoofd/ent, thorax, cardiovasculair, ademhalings-, buik, musculoskeletaal, uritorinair, huid.

Klinisch significante veranderingen worden geregistreerd als AES. Vitale tekenen

Om consistent in dezelfde positie te worden verzameld:

Systolische/diastolische BP, HR (BPM), RR (ademhalingen/min), temperatuur (° C). Eindinfusie (I17) en bezoek aan het einde van de studie

Activiteiten:

Ernstige infecties per patiëntjaar:

Totaal aantal, type, behandeling en resultaten.

Infusies met AES:

Totale infusies versus nummer met AES.

Veiligheid en AE beoordeling:

Infusiegerelateerde AES: ernst, duur, uitkomst, causaliteit. Serieuze AES (SAES): details, acties, resultaten.

Algemene klinische beoordeling:

Compleet lichamelijk onderzoek, vitale tekenen.

Kwaliteit van leven:

SF-36, patiënttevredenheid.

Therapietrouw:

Bevestig maandelijkse infusies, gemiste/vertraagde doses, redenen.

Eind deelnemer debriefing:

Samenvatting van de behandeling, post-study follow-up plannen.

Laatste bezoekprocedures:

Check-in, contact updates, document AEs, discuss outcomes and study closure. Strategieën om verlies te minimaliseren tot follow-up gemiste bezoeken en geplande monsterafwijkingen herschikken binnen 7 dagen. Mark as "missed/unavailable" if patient cannot attend.Only classified as loss to follow-up if no contact is possible by study end despite all efforts.

De terugtrekking van de patiënt uit de studie

Komt voor als:

Gevraagd door de patiënt. Twee opeenvolgende of drie totale gemiste bezoeken. Ontwikkeling van HBV, HCV of HIV. SAE maakt verder IP -dosering ongepast (discretie van de onderzoeker). Use of exclusionary medications Withdrawal of Consent A participant will be considered to have "Withdrawn Consent" if they choose to discontinue participation in any further study procedures. Dit recht zal worden erkend en bevestigd door het geïnformeerde toestemmingsformulier (ICF/instemmingsformulier). Zodra de toestemming is ingetrokken, worden er geen aanvullende onderzoeksprocedures uitgevoerd en worden er geen verdere gegevens verzameld. Gegevens die tot het punt van intrekking worden verzameld, blijven in de studiedatabase; Als de deelnemer echter vraagt ​​om zijn gegevens te verwijderen, wordt deze niet gebruikt.

Berekening van de steekproefgrootte en statistisch analyseplan. De onderzoekers zullen 50 patiënten omvatten om te voldoen aan de steekproefomvang die nodig is om de werkzaamheid te evalueren

Veiligheid:

41 deelnemers met ten minste volledige gegevens biedt ons een waarschijnlijkheid van 90% om een ​​bovengrens te vinden van het eenzijdige 95% betrouwbaarheidsinterval <0,40, ervan uitgaande dat het werkelijke waargenomen aandeel infusies met een of meer tijdelijk geassocieerde AE ​​minder dan 20% is. Nationale gegevens bevestigen het bovenstaande uitgangspunt

Doeltreffendheid:

50 deelnemers zijn vereist. Uitgaande van een ernstig infectiegraad per persoonsjaar <1 <1, hebben de onderzoekers een vermogen van 90% om de eenzijdige H0 te verwerpen dat het ernstige infectiegraad ≥ 1 per persoonjaar, met een significantieniveau van 1% en een verlies van 20% op follow-up. Dit aantal is compatibel met de FDA-regel die suggereert dat de bovengrens van het betrouwbaarheidsinterval van 99% <1 ernstige infectie per persoon jaar moet zijn. De onderzoekers plannen een tussentijdse analyse na 6 maanden behandeling of wanneer 50%van de steekproef wordt bereikt, afhankelijk van wat zich eerst voordoet, met een significantieniveau van 0,5%, gebaseerd op het Pocock -criterium, om een ​​algemeen significantieniveau van 1%te handhaven.

Farmacokinetiek:

Aantal patiënten per leeftijdsgroep volgt EMA -aanbevelingen. Er zullen 20 volwassen of adolescente deelnemers van 16 jaar of ouder zijn. Zoals aanbevolen door de EMA, worden trogwaarden verzameld voor kinderen, maar zonder een complete farmacokinetische curve om de last van meerdere bloedcollecties voor deze leeftijdsgroep te verminderen. Deelnemers zijn hetzelfde als die in de werkzaamheid en veiligheidsstudie.