V-immune: Eine neuartige Immunglobulin-Therapie für Immunschwäche (VIP)

Einführung:

Immunglobulin wird als Behandlung für eine Vielzahl von Erkrankungen verwendet, nicht nur wegen seiner Fähigkeit zur Bekämpfung der Infektion als Ersatztherapie, sondern auch wegen der entzündungshemmenden und immunmodulatorischen Wirkungen. Immunglobuline werden hauptsächlich durch ihre Antikörperfunktion mit verschiedenen Klassen und Unterklassen gekennzeichnet, die unterschiedliche Rollen spielen. B-Zellen sind hauptsächlich für die humorale adaptive Immunantwort (mit Antikörper vermittelter) verantwortlich. Immunglobuline, die die Moleküle mit Antikörperfunktion sind, dienen als Rezeptoren von B -Zellen, die über einen molekularen Komplex verankert sind, der aus Molekülen besteht, die sowohl das Immunglobulin verankern als auch die Signaltransduktion in die Zelle fördern. Dies ermöglicht die Aktivierung von B -Zellen und löst eine Signalkaskade aus, die zu einer terminalen Differenzierung in Plasmazellen oder Gedächtniszellen führt.

Inborn-Immunitätsfehler (primäre Immunodefeizungen- PIDs) stellen eine große, heterogene und schnell wachsende Gruppe von genetischen Erkrankungen dar, hauptsächlich (aber nicht ausschließlich), die durch mit der Immunreaktion verbundene Gene im Zusammenhang mit Verlust- oder Funktionsgewinnmutationen verursacht werden. Trotz ihrer individuellen Seltenheit beeinflussen angeborene Fehler gemeinsam einen signifikanten Anteil der Patienten, wobei eine geschätzte globale Prävalenz von 1 zu 1.200-2.000 geschätzt wurde. Sie umfassen nun ungefähr 500 bekannte genetische Ursachen, die in 10 Kategorien unterteilt wurden, die in der Internationalen Union der immunologischen Gesellschaften (IIIS) in der Klassifizierung 2022 aufgeführt sind, von denen etwa zwei Drittel im letzten Jahrzehnt identifiziert wurden. Als Beweis für die dynamische Entwicklung des Feldes wurden in den letzten Jahren pro Jahr ungefähr 30 neue Krankheiten beschrieben.

Weltweit sind die häufigsten Defekte bei PIDS-Anpassungen von 60%, die die Antikörperproduktion beeinträchtigen, wobei selektiver IgA-Mangel und häufige variable Immunschwäche am häufigsten am häufigsten sind. Mindestens 80% der Patienten, bei denen ein Antikörpermangel diagnostiziert wurde, erhalten eine IgG -Ersatztherapie. PIDs können eine nicht erkannte zugrunde liegende Erkrankung sein, die mit Autoimmun-, Allergik- und Lymphoproliferativkrankheiten verbunden ist und daher viele Jahre lang nicht diagnostiziert bleibt. Patienten, bei denen eine B -Zell -Dysfunktion diagnostiziert wurde und die daraus resultierenden Antikörpermängeln resultieren, erfordern einen Immunoglobulin (IgG) -Tersatz, eine sichere und wirksame therapeutische Option zur Verhinderung von Infektionen bei Patienten mit PIDs.

Intravenöses Immunglobin wird verwendet, um eine Vielzahl von Krankheiten zu behandeln. However, its approved indications can be divided into three main categories: primary and secondary antibody deficiencies, vertically transmitted HIV, chronic lymphocytic leukemia (CLL), immune thrombocytopenic purpura (ITP), chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy (CIDP), severe disseminated infections, and graft-versus-host disease. Es wird empfohlen, eine Immunoglobulin -Ersatztherapie bei allen Patienten zu initiieren, die die diagnostischen Kriterien für IgG -Hypogammaglobulinämie erfüllen, unabhängig davon Immunoglobulinprodukt für den intravenösen Gebrauch bei 5% Konzentration, Marken-V-MMune, zur Behandlung von angeborenen Fehlern der humoralen Immunität / primären Immunodefeigung mit einer beeinträchtigten Produktion von IgG-Klasse-Immunglobulinen durch B-Lymphozyten.

Considering the relative unavailability of blood products, among which immunoglobulins are in the most critical category, the approval of new products in our country is of utmost importance due to the increasing need for this medication-even for well-defined indications such as hypogammaglobulinemia, whether primary or secondary, as well as neuropathies like Guillain-Barré syndrome, chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy (CIDP) und hämatologische Erkrankungen wie immun -thrombozytopenische Purpura. Mehrere Faktoren haben zu diesem Mangel beigetragen, einschließlich immer strengerer Sicherheitsanforderungen; die Schwierigkeit, ein hochwertiges Plasma zu erhalten, der den Standards der wichtigsten Aufsichtsbehörden wie der FDA und der EMA entspricht; die Notwendigkeit, die Herstellungsprozesse zu verbessern; die Verringerung der Anzahl der Spender aufgrund der Covid-19-Pandemie; und die erhöhte Nachfrage nach IVIG zu Beginn der Pandemie, als Immunglobulin als therapeutischer Versuch für eine damals unbekannte Krankheit verwendet wurde.

Daher sind die Verfügbarkeit neuer Produkte wie V-immuner, die von Virchow Laboratories in Indien produziert werden und die für die Behandlung klar definierter Indikationen wirksam sind und die erforderlichen Sicherheitsprofile-Verschmelzen minimaler Nebenwirkungen während und nach klinischem Gebrauch besitzen.

Die hier präsentierten Forscher präsentieren hier eine klinische Studie zur regulatorischen Zulassung eines neuen Immungloblin V-immune® auf dem brasilianischen Markt für primäre Immunschwäche.

Ziele

Die Ziele der Studie sind:

1. Bewertung der Wirksamkeit des menschlichen normalen Immunglobulin-Präparats V-immune® bei Patienten mit primärem humoralen Immunschwäche bei der Verhinderung der Rate schwerer bakterieller Infektionen in 12 Monaten im Vergleich zu historischen Kontrollen;
2. Bewertung der Sicherheit des menschlichen normalen Immunglobulin-Präparats V-immune® bezüglich des beobachteten Anteils von Infusionen mit einem oder mehreren zeitlich assoziierten unerwünschten Ereignissen bei Patienten mit primärem humoralen Immunschwäche;

3. Bewertung der Pharmakokinetik von intravenösem V-immune® bei Patienten mit primärem humoralen Immunschwäche.

   Methoden:

   Studiendesign Dies ist eine prospektive, Phase-III-, offene, nicht randomisierte, multizentrische, Einzelgruppenstudie mit historischer Kontrolle für die regelmäßige Verabreichung von V-immune® über die intravenöse Route.

   Die Rekrutierungsplan -Rekrutierung erfolgt in 10 nationalen Referenzimmunologiezentren, die auf die Behandlung der primären Immunschwäche mit intravenöser Immunglobulin -Infusion spezialisiert sind. Patienten, die bereits eine regelmäßige intravenöse Immunglobulin -Therapie erhalten und die Zulassungskriterien erfüllen, werden zur Teilnahme an der Studie eingeladen, wobei sie 12 Monate lang von ihrem aktuellen Produkt auf das Untersuchungsprodukt (IP) umgestellt werden.

   Die Rekrutierungsansatz -Patienten, die die Einschlusskriterien erfüllen und bereits in den teilnehmenden Zentren eine IgG -Behandlung erhalten, werden zur Aufnahme in die VIP -Studie angesprochen. Sobald das Formular für die Einverständniserklärung (ICF) unterschrieben ist, wird der Teilnehmer gemäß dem Studienprotokoll V-immune® (On-Pharma) erhalten.

   Da es sich um eine Einzelgruppenstudie handelt, wird keine Randomisierung durchgeführt. Blenden angesichts der Tatsache, dass es sich um eine einsgruppen-Studie handelt und die berechtigten Patienten bereits mit einem weiteren im Handel erhältlichen Immunglobulin behandelt werden, das durch V-immune® ersetzt wird, gilt Blinding als unnötig.

   Experimentelle Intervention Das Investigational Product (IP) ist V-immune®, normaler menschlicher Immunglobulin I.P. 5% (5G/100 ml), hergestellt aus qualifiziertem menschlichem Plasma für den intravenösen Gebrauch. Jedes Fläschchen enthält menschliches Immunglobulin 50 g/l, Maltose 100 g/l und Wasser zur Injektion. Die 5% ige menschliche Immunglobulinlösung für die intravenöse Verabreichung i.p. ist eine sterile, pyrogenfreie Herstellung von normalem menschlichem Immunglobulin in einer einzeldosis Form für intravenöse Infusion. Jede 10 ml, 50 ml und 100 ml enthält 0,5 g, 2,5 g und 5 g normales menschliches Immunglobulin und werden aus qualifiziertem menschlichem Plasma unter Verwendung von Membranfiltration, kombinierten chromatographischen Schritten und viralen Inaktivierungsverfahren hergestellt. Der IGA -Inhalt überschreitet 2 mg/ml nicht. Die IgG -Unterklasseverteilung ähnelt dem im normalen menschlichen Serum.

   Das Herstellungsprozess verwendet Plasma, die von Spendern gesammelt werden, die auf der Grundlage der Krankengeschichte gemäß den Richtlinien der Aufsichtsbehörde gescreent werden. Das Blut wird auf obligatorische Infektionskrankheiten getestet. Dabei wird nur ein Plasma verwendet, das negativ auf HBSAg-, HCV- und HIV -Antikörper testet.

   Normale menschliche Immunglobulin i.p. 5% (5G/100 ml) V-immune® werden alle 3 Wochen (+/- 3 Tage) über eine intravenöse (iv) Route mit einer intravenösen (iv) Route mit einer Dauer von 3 bis 6 Stunden in einer intravenösen (iv) Route verabreicht:

   0,01 ml/kg/min 0-30 min, 0,02 ml/kg/min 31 bis 45 min, 0,04 ml/kg/min 46 bis 60 min und 0,06 ml/kg/min 61 min bis zum Ende der Infusion.

   Die Dosis eskalation eskalation Eskalation tritt allmählich auf, sofern unerwünschte Ereignisse (AEs) auftreten. Die Dosis wird nur erhöht, wenn eine gute Toleranz ohne unerwünschte Ereignisse vorhanden ist. Wenn ein AE auftritt, muss die Infusion 20 bis 30 Minuten lang angehalten werden. Die Verwendung von Loratadin, Paracetamol und Ondansetron ist erlaubt. Insgesamt kann ein weiteres Medikament aus derselben Klasse verwendet werden, vorausgesetzt, das Pharmakokinetik -Studienzentrum wird informiert. Sobald sich der Patient verbessert hat, wird die Infusion mit einer reduzierten Geschwindigkeit wieder aufgenommen und kehrt zur anfänglichen Infusionsgeschwindigkeit zurück. Der Patient wird 60 Minuten nach dem Ende der Infusion beobachtet, um die klinische Beurteilung und Überwachung potenzieller unerwünschter Ereignisse zu beenden.

   Vormedikation Vormedikation vor der Infusion des Untersuchungsprodukts: Schnelle Infusion von 500 ml 0,9% Natriumchlorid (NaCl) IV, Diphenhydramin 50 mg IV und Hydrocortison 200 mg IV, gefolgt von dem oben beschriebenen Investitionsprodukt, das mit zunehmend erhöhten Infusionsraten wie beschrieben verabreicht wurde. Nach der Infusion sollte NaCl 0,9% mit 1 ml/kg/Stunde fortgesetzt werden. Die Verwendung von Vormedikamenten ist die Standard-medizinische Praxis und wird als notwendig für die Sicherheit der Teilnehmer angesehen.

   Schnelle isotonische Salzinfusion vor der Verabreichung und eine langsame isotonische Salzinfusion, um mindestens 30 bis 40 Minuten auf den venösen Zugang zu erhalten, und die Standardpraxis bei der Verabreichung dieser Blutprodukte. Schnelles Kristalloid vor der Infusion verringert das Risiko von Kopfschmerzen und aseptischer Meningitis nach der Verabreichung sowie das Risiko von thromboembolischen Ereignissen. Die Verabreichung von Kristalloid nach der Infusion des Untersuchungsprodukts verringert das Risiko schwerwiegender und potenziell lebensbedrohlicher unerwünschter Ereignisse aufgrund von anaphylaktischen Reaktionen, indem die schnelle Verabreichung von IV-Medikamenten bei einem potenziell schockierten Patienten zulässig ist, wodurch die Notwendigkeit des Zugangs zur zentralvenösen Notaufnahme vermieden wird.

   Vormedikamente Zusammenfassung:

   Schnelle Infusion von 500 ml 0,9% Natriumchlorid (NaCl) IV

   Diphenhydramin* 50 mg IV (Erwachsener); Kinderbetreuung: 1,25 mg/kg IV

   Hydrocortison ** 200 mg IV (Erwachsener); Kinderbetreuung: 3 mg/kg IV

   Nach der Infusion: 0,9% NaCl bei 1 ml/kg/Stunde für eine Stunde

   Thromboembolismus -Risiko: Verwenden Sie die langsamste Infusionsrate

   * 30 Minuten vor der Infusion verabreichen.

   ** 30 Minuten bis 1 Stunde vor der Infusion verabreichen.

   Für Personen, die das Risiko von Thromboembolie ausgesetzt sind, muss die Infusionsrate so niedrig wie möglich gehalten werden.

   Zu den Risikofaktoren von Thromboembolismus gehören: fortgeschrittenes Alter, Fettleibigkeit, Bluthochdruck, Diabetes mellitus, Vorgeschichte früherer thromboembolischer Ereignisse, bekannte erworbene oder angeborene thrombophile Störungen, längere Immobilisierung, schwere Hypovolämie oder erhöhte Blutviskosität.

   Die Behandlungsintervalle zwischen den Verwaltungen sollten während der gesamten Studie konstant bleiben, sofern die IgG -Trogspiegel> 500 mg/l bleiben.

   Wenn sich das Körpergewicht im Vergleich zum Ausgangswert um mehr als 5% ändert (Screening -Besuch), wird die Dosis angepasst, um eine konsistente Mg/kg -Körpergewichtsdosis aufrechtzuerhalten.

   Im Falle einer klinisch signifikanten Hypotonie und/oder anaphylaktischen Reaktionen, zusätzlich zur Beendigung der Infusion und der Verabreichung einer angemessenen unterstützenden Versorgung (zu der auch Epinephrin, Antihistaminika, Kortikosteroiden, ergänzende Sauerstoff und Volumenerweiterung gehören können) und die Expansion des Volumens) und die Aufzeichnung des CRF -Vorfalls im Untersuchung des Vorfalls. In solchen Fällen können die Teilnehmer, wenn sie dies wünschen

   Kontraindikationen und Vorsichtsmaßnahmen im Zusammenhang mit dem IP -normalen menschlichen Immunglobulin für die intravenöse Verabreichung i.p. 5% sind bei Patienten mit selektivem IgA -Mangel kontraindiziert.

   Patienten können bei der Infusion von normalem menschlichem Immunglobulin i.p. 5%. Das Auftreten schwerer Überempfindlichkeitsreaktionen oder Anaphylaxie unter solchen Bedingungen sollte eine alternative Therapie in Betracht ziehen.

   Die intravenöse Lösung des normalen menschlichen Immunglobulin sollte nur intravenös verabreicht werden.

   Zusätzliche vorgeschriebene Vorsichtsmaßnahmen in Bezug auf die Verwendung normaler menschlicher Immunglobulin I.P. 5% beinhalten:

   Überempfindlichkeit: Sofortige Überempfindlichkeit und anaphylaktische Reaktionen sind selten, aber möglich. Wenn eine Überempfindlichkeit auftritt, stoppen Sie sofort die Infusion und leiten Sie eine angemessene Behandlung ein. Medikamente wie Epinephrin und Antihistaminika sollten für die sofortige Behandlung akuter Überempfindlichkeitsreaktionen, einschließlich der Anaphylaxie, leicht zur Verfügung stehen.

   Nierenfunktionsstörung: Akute Nierenversagen, osmotische Nephropathie und Tod können bei der IVIG -Verwendung auftreten. Stellen Sie sicher, dass der Patient vor der Verabreichung nicht hypovolemisch ist. Bei Patienten mit dem Risiko einer Nierenfunktionsstörung aufgrund bereits bestehender Niereninsuffizienz oder Veranlagung zu akutem Nierenversagen (z. B. Diabetes mellitus, Hypovolämie, Fettleibigkeit, Verwendung von Nephrotoxic-Medikamenten oder Alter> 65) sollte IVIG mit der minimalen Infusionsrate verabreicht werden.

   Das Aseptic -Meningitis -Syndrom (AMS): tritt selten bei der IVIG -Behandlung auf. Kann innerhalb von Stunden bis 2 Tagen nach der Behandlung beginnen. Das Absetzen von IVIG führt normalerweise zu einer vollständigen Erholung ohne Folgen. Häufiger bei hohen Dosen (2 g/kg) und/oder einer schnellen Infusion.

   Hämolyse: IVIG -Produkte können Blutgruppenantikörper enthalten, die als Hämolysine wirken, rote Blutkörperchen beschichten und einen positiven direkten Antiglobulin -Test und selten Hämolyse verursachen. Eine verzögerte hämolytische Anämie kann aufgrund der Sequestrierung der roten Zellen und der akuten Hämolyse auftreten, was mit der intravaskulären Hämolyse übereinstimmt.

   Transfusionsbedingte akute Lungenverletzung (Trali): Nicht kardiogene Lungenödeme können nach der IVIG-Verabreichung auftreten. Trali ist durch schwere Atemnot, Lungenödeme, Hypoxämie, normale linksventrikuläre Funktion und Fieber gekennzeichnet, die typischerweise 1 bis 6 Stunden nach der Behandlung auftreten. Die Patienten sollten auf pulmonale unerwünschte Ereignisse überwacht werden. Wenn Trali vermutet wird, sollten geeignete Tests für Anti-neutrophilen Antikörper sowohl im Produkt als auch im Patientenserum durchgeführt werden. Die Behandlung umfasst Sauerstofftherapie und Beatmungsunterstützung.

   Übertragbare Wirkstoffe: Normale menschliche Immunglobulin I.P. 5% stammen aus menschlichem Plasma. Aufgrund wirksamer Spender -Screening- und Herstellungsprozesse ist das Risiko einer Übertragung von Viruserkrankungen äußerst gering. Das theoretische Risiko einer Übertragung von CReutzfeldt-Jakob-Erkrankungen (CJD) wird ebenfalls als äußerst abgelegen angesehen.

   Überwachung - Labortests: Die regelmäßige Überwachung der Nierenfunktion und der Urinleistung ist bei Patienten mit erhöhtem Risiko für akutes Nierenversagen von entscheidender Bedeutung. Die Nierenfunktion (einschließlich Serum Harnstoff und Kreatininspiegel) sollte vor der anfänglichen Infusion und regelmäßig gemäß dem Besuchsplan bewertet werden. Aufgrund eines potenziell erhöhten Thromboserisikos sollte bei Patienten mit einer Hyperviskosität, einschließlich Patienten mit Kryoglobulinämie, einer Chylomikronämie/deutlich erhöhten Triglyceriden oder monoklonalen Gammopathien, bei Patienten mit der Grundlinienblutsviskosität berücksichtigt werden. Wenn nach der Infusion Anzeichen/Symptome einer Hämolyse beobachtet werden, sollten geeignete Labortests durchgeführt werden. Bei Verdacht auf TRALI sollten Tests für Anti-neuutrophilen Antikörper am Produkt und des Patientenserums durchgeführt werden.

   Patienteninformationen: Die Patienten sollten angewiesen werden, sofort Symptome wie verringerte Urinausgabe, plötzliche Gewichtszunahme, Flüssigkeitsretention, Ödeme und/oder Atemnot aufzunehmen, die auf Nierenverletzungen hinweisen können.

   Schwangerschaft - Kategorie C: Reproduktionsstudien an Tieren wurden für die IV -Verwendung nicht mit normalem menschlichem Immunglobulin durchgeführt. Es ist auch nicht bekannt, ob es einen fetalen Schaden verursachen kann, wenn es einer schwangeren Frau verabreicht wird oder die Fortpflanzungskapazität beeinflusst. Es sollte nur während der Schwangerschaft verwendet werden, wenn sie unbedingt erforderlich sind. Schwangere Frauen sind Teil der Ausschlusskriterien dieser Studie.

   Präsentation des Normalen menschlichen Immunglobulins des Investitionsprodukts (IP) für die intravenöse Verabreichung i.p. 5%, V-immune®, ist in Fläschchen von 0,5 g/10 ml, 2,5 g/50 ml und 5 g/100 ml (5% Konzentration) erhältlich.

   Die IP-Herstellung und Kennzeichnung von V-immune® Immunoglobulin wird von Virchow Biotech Private Limited hergestellt, verpackt und von Virchow Biotech Limited gekennzeichnet und von Onpharma Importadora Exportadora e Distribuidora de Medicamentos LTDA gemäß den aktuellen Vorschriften importiert. Die Vorbereitung und Kennzeichnung der IP folgen den Richtlinien für die gute Fertigungspraxis (GMP), und ihre Verteilung hält die Richtlinien für die gute Verteilungspraxis (BIP). IP -Labels werden in Portugiesisch sein und die gesetzlichen Anforderungen der brasilianischen Rechtsbereitungen erfüllen.

   Speicher- und Verwendungsbedingungen des IP V-Immune®-Immunglobulins müssen in einem sicheren Bereich mit begrenztem Zugang gelagert werden, vorzugsweise in einem verschlossenen Schrank, vor Licht geschützt und bei einer Temperatur zwischen 2 ° C und 8 ° C gehalten werden. V-immune® darf nicht eingefroren werden.

   Patienten mit Patientenbeschränkungen, die nicht für die pharmakokinetische (PK) -Analyse ausgewählt wurden, müssen 60 Minuten vor der Infusion zu den Untersuchungszentren eintreffen und 60 Minuten nach dem Ende der Infusion für die klinische Beurteilung und Überwachung von unerwünschten Ereignissen beobachten.

   Bei Patienten, die für die PK -Analyse ausgewählt/berechtigt sind, gilt die gleiche Einschlusszeit für Infusionstage 1 bis 8 und 10 bis 17. An Tag 9 müssen diese Patienten jedoch 60 Minuten vor der Infusion eintreffen und bis zu 6 Stunden nach der Infusion für die Erfassung von Blutproben im Zentrum bleiben. Sie müssen auch nach 24 Stunden, 72 Stunden, 7 Tagen, 14 Tagen und 21 Tagen nach der 9. Infusion zu Blutstraßen zurückkehren.

   Pharmakokinetische Parameter

   Für diese Studie werden die folgenden pharmakokinetischen Parameter bestimmt:

   CMAX: Die maximale Plasmakonzentration erreicht auf der Grundlage experimenteller Daten, die direkt aus der Plasmakonzentrationskurve erhalten wurden.

   AUC₀-T (Fläche unter der Kurve): Fläche unter der Plasmakonzentrationszeitkurve von Zeit Null bis zur letzten Konzentration über der unteren Grenze der Quantifizierung, berechnet unter Verwendung der Trapezregel.

   AUCINF: Fläche unter der Plasmakonzentrationszeitkurve von Zeit Null bis unendlich (extrapoliert), berechnet als aucinf = auc₀-t + ct/kel, wobei CT die letzte messbare Konzentration und Kel ist die Eliminationsrate-Konstante.

   Tmax: Zeit, um Cmax zu erreichen. KEL: Die Eliminierungsrate -Konstante, geschätzt aus der Steigung der linearen Regression des natürlichen Logarithmus der Konzentration gegenüber der Zeit für mindestens drei Datenpunkte über der unteren Grenze der Quantifizierung.

   T½ (Halbwertszeit): Eliminierungs Halbwertszeit, berechnet als LN (2)/Kel. VD (Verteilungsvolumen): Verteilungsvolumen aus der Klemmephase der pharmakokinetischen Kurve, berechnet als Dosis/(Kel × Aucinf).

   Die Proben des Probenahmeplans werden unter Verwendung von 7,5 ml Röhrchen mit Gel -Separatoren gesammelt, die mit Teilnehmernummer, Sammelnummer, TimePoint, Infusionsnummer, Produktcode (IgG) und Protokollnummer gekennzeichnet sind. Blutproben von jeweils 7,5 ml werden vor der Infusionsnummer 0 (vorherige IVIG-Behandlung vom Teilnehmer) und vor Infusionen 1 bis 9 von V-immune®. Dies kann durch Reduktion und/oder Alkylierung gefolgt von enzymatischer Verdauung vorausgehen.

   Der zitierte Ansatz für die Herstellung zielt darauf ab, eine robuste und selektive MRM-Methode (Multiple Reaction Monitoring) zu entwickeln und anzuwenden, die ein spezifisches Q1/Q3-Ionenpaar nachweisen kann, das aus der Verdauung des Zielproteins in diesem Fall abgeleitet ist, IgG-dhus indirekt seine Plasmakonzentration. Angesichts der Existenz mehrerer IgG -Unterklassen (IgG1, IgG2, IgG3 und IgG4) können spezifische Peptidfragmente in Proteindatenbanken und wissenschaftliche Literatur zu finden, die für jede Unterklasse einzigartig sind. Die folgenden Peptidsequenzen wurden als Ausgangspunkt für die Entwicklung der bioanalytischen Methode zur Quantifizierung des Gesamt -IgGs und seiner Unterklassen angewendet:

   Peptid fnwyvdgvevhnak - spezifisch für IgG1 -Peptid CCVECPPCPAppvagpsvflfppkpk - Spezifisch für IgG2 -Peptid Wyvdgvevhnak - Spezifisch für IgG3 -Peptid -TTPPVLDSDGSFLYSR - Spezifisch für igG3 -matrox -matrox -matrox -matrox -matrog (in der Analyse -Substanz) ist ein endogenes Substanz. Fall, Rinderplasma) ist notwendig. Dieses Ersatz wird verwendet, um Kalibrierungskurven und Qualitätskontrollproben auf ähnliche Weise wie die unbekannten Proben von Studienteilnehmern zu erzeugen.

   Für die Probenpräparation und die LC-MS/MS-Analyse können die folgenden Reagenzien verwendet werden, wenn Extraktion mit vorheriger Reduktion und Alkylierung erforderlich ist: Ammoniumbicarbonat, 2,2,2-Trifluorethanol, Dl-Dithiothreit, Iodoacetamid, Formsäure oder Aktonsäure. Wenn nur eine Proteinausfällung gefolgt von enzymatischer Verdauung durchgeführt wird, können Reagenzien wie Aceton, Isopropanol, Perchlorsäure, Acetonitril oder Methanol verwendet werden.

   In beiden Fällen muss die Probe mit MS-Grad-Trypsin mindestens 1 g/l inkubiert werden.

   Chromatographische Methoden verwenden mobile Phasengradienten, um die Trennung der verschiedenen Peptidketten zu verbessern, die während der Extraktion gebildet werden können. Das System wird bei Drücken mit UPLC kompatibel, wobei eine wässrige mobile Phase 0,1% Ameisensäure und eine organische Phase aus Methanol oder Acetonitril enthält, ebenfalls mit 0,1% Ameisensäure. Zu den empfohlenen Säulen gehören Festkörpertypen wie das Wasser-Brücken-C8 (3,0 × 30 mm, 3,5 µm) oder eine Agilent Eclipse plus C18-RRHD (1,8 & mgr; m, 2,1 × 100 mm).

   Die Nachweis der Analyten wird unter Verwendung eines dreifachen Quadrupol -Massenspektrometers, Modell API6500 von Sciex durchgeführt. Die Methode wird gemäß den RDC Nr. 27 vom 17. Mai 2012 validiert und die Validierungsparameter von Linearität, Präzision, Genauigkeit, Übertragung, Matrixeffekt, Selektivität, Stabilität in biologischer Matrix und Lösungsstabilitätskontrolle oder Standardbehandlung abdecken: Die Kontrollgruppe besteht aus historischen Kontrollstücken, wie in den Literatur-Co-Inventionen beschrieben. Nachfolger für 12 Monate.

   Besuche:

   • Alle Immunoglobulin -Infusionsmöglichkeiten mit Datenerfassung - Es wird erwartet, dass es 17 Besuche für V -immune® -Infusion während eines Jahres geben wird. Patienten werden beobachtet:

   • Unmittelbar vor Infusion;
   • Während der Infusion und bis zu 60 Minuten danach;
   • 24 und 72 Stunden nach Beginn der Infusion des Untersuchungsprodukts - per Telefonkontakt (6).

   Labordaten:

   Bei "Baseline" und vor der Durchführung des 1., 3., 6., 9., 12. und 17. Infusions:

1..

Vor dem 1., 3., 6., 9., 12. und 17. Infusions:

1. Haptoglobin, Coombs

Vor allen Infusionen:

1. Besuche durch IgG -Screening (T1 und T2)

Objektiv:

Identifizieren Sie berechtigte Patienten, indem Sie die Einschluss- und Ausschlusskriterien bewerten, die IgG -Werte messen und die Einverständniserklärung einholen.

Aktivitäten beim Screening -Besuch T1: Empfang und Einverständniserklärung:

Geben Sie eine ausführliche Erläuterung der Studie an, einschließlich Zielen, Verfahren, Risiken und Vorteilen. Die geschriebene Einverständniserklärung (ICF/Zustimmung) muss von qualifiziertem und delegiertem Personal eingeholt und vom Ermittler unterschrieben, bevor Studienverfahren oder Screening -Labors durchgeführt werden.

Bewerten Sie die Zeit seit der primären Immundefizienzdiagnose. Bewerten Sie die Prämedikationsverwendung mit vorheriger IgG -Infusion. Überprüfen Sie die Osmolarität und den IgA -Inhalt des vorherigen IgGs. Bewerten Sie die Einhaltung früherer IgG -Behandlung (Infusionsfrequenz und zwei jüngste Trogspiegel).

Erhalten Sie eine schriftliche Einverständniserklärung.

Datenerfassung der Demografie und Krankengeschichte:

Rekordalter, Geschlecht, Rasse, Gewicht und BMI. Sammeln Sie die Anamnese, einschließlich Infektionen und aktuelle Medikamente.

Bewertung der Zulassungskriterien:

Überprüfung der Einschlusskriterien (z. B. bestätigte Diagnose, angemessenes Alter). Bewerten Sie die Ausschlusskriterien (z. B. Autoimmunerkrankung, IgG -Allergie).

Physikalische und klinische Untersuchung:

Eine körperliche Untersuchung durchführen. Aufzeichnen Sie Vitalfunktionen (RR, HR, BP, Temperatur).

Beispielsammlung für Labortests:

Basis -IgG -Werte:

Wenn zwei vorherige IgG -Werte> 500 mg/dl innerhalb von 90 Tagen> ohne neues Screening -Labor fortgesetzt werden können.

Wenn ein früherer IgG -Wert> 500 mg/dl innerhalb von 30 Tagen für den zweiten Test mit T2 fahren.

Wenn IgG bei T1> 700 mg/dl ist, kann die Infusion bei T2 noch vor dem T2 -Ergebnis fortgesetzt werden. Andere Labors pro Protokoll. Lebensqualität und Symptom Fragebögen: Wenden Sie SF-36 QOL-Fragebogen an. Bewerten Sie die aktuellen Symptome im Zusammenhang mit der Erkrankung.

Aktivitäten beim Screening -Besuch T2:

Neubewertungen der IgG -Behandlung. Echeck -Einschluss-/Ausschlusskriterien. Wiederholen Sie die körperliche Untersuchung und Vitale. Sammeln Sie bei Bedarf eine zweite IgG -Probe (kann am selben Tag wie der erste Infusion auftreten, wenn vorherige Stufe> 700 mg/dl).

Andere protokollspezifische Labors. Flexibles Fenster: Das Screening kann erweitert werden (Ermessen des Ermittlers), bis die Grundlinie IgG> 500 mg/dl bestätigt wird.

Erster Infusionsbesuch (i1) Ziel: Bestätigen Sie die Berechtigung und starten Sie die IP -Administration.

Aktivitäten: Überprüfung der Screening -Ergebnisse:

Überprüfen Sie die Laborergebnisse und Zulassungskriterien. Diskutieren Sie abnormale Ergebnisse und Zulassungsstatus.

Klinische Bewertung:

Aktualisieren Sie die körperliche Untersuchung und Vitalfunktionen. Überprüfen Sie Änderungen des Gesundheitszustands. Bereitstellung von Anweisungen für Symptom -Tagebuch.

Zulassungsbestätigung:

Abschlusspflicht Bestätigung. Überprüfung begleitende Medikamente.

Laborbeispielsammlung:

Grundlinien -IgG. Schwangerschaftstest für Frauen im gebärfähigen Alter, es sei denn, dauerhaft steril. Andere Tests: CBC mit Blutplättchen, Elektrolyten, Glukose, Harnstoff, Kreatinin, AST, ALT, LDH, Urinanalyse, Pneumokokken- und Haemophilus -Antikörpertitern.

Vordosis IgG aus früheren Produkten. Vordosis PK-Proben.

Erste Infusion von V-immune®:

Verfahren erklären. Stapelnummer und Ablaufdatum. Proteokoll für Infusionen verabreichen.

Überwachen Sie für unerwünschte Ereignisse (AES):

Aufzeichnung von AE, Infusionsrate bei Einsetzen, Unterbrechungen, Neustartrate, Gesamtinfusionszeit, Gesamt -IgG -Dosis und Prämedikatoren.

Datenerfassung nach der Infusion:

Aufzeichnung von AES, Nachinfusions-Vitalen (30-60 min) und allgemeiner Zustand. Aufzeichnungszeit.

Patientenanweisungen:

Geben Sie nach der Infusionsanleitung, Notfallanweisungen und Teamkontakt an. Informieren Sie, dass Follow-up-Anrufe nach 24 und 72 Stunden stattfinden werden. Zeitplan für den nächsten Besuch. Infusionen 2 bis 16 (I2 bis I16) Ziel: Führen Sie alle 3 Wochen (± 3 Tage) Infusionen durch.

Aktivitäten:

Überprüfen Sie frühere Ergebnisse und den klinischen Status:

Überprüfen Sie frühere Labors und Symptome. Aktualisieren Sie die körperliche Untersuchung und Vitale. Überprüfen Sie Infektionen, Krankenhausaufenthalte, Antibiotika, Zeit bis zur Lösung und Arbeitstage.

SF-36 bei Infusionen 8 und 16.

Laborsammlung:

Vorinfusion IgG für alle Besuche. Vordosis PK-Proben für Infusionen 1-9. Insgesamt 12 PK -Proben pro Erwachsener; Kinder nur vor Dosis. Infuionen 3, 6*, 9, 12, 17: Schwangerschaftstest für Frauen mit gebärfähigen Potenzial. Andere Labors: CBC, Elektrolyte, Glukose, Harnstoff, Kreatinin, AST, ALT, LDH, Urinanalyse, Haptoglobin, Coombs -Test.

*Infusion 6: Pneumokokken- und Haemophilus -Antikörpertiter.

V-immune®-Infusion:

Rekord -Stapel und Ablauf. Pro Protokoll verabreichen. Überwachen und dokumentieren Sie AES und alle Infusionsdetails wie in i1.

Nach der Infusion:

Aufzeichnung von AES, Nachinfusions-Vitalen (30-60 min), Entladungszeit, PK pro Abschnitt

Patientenanweisungen:

Nach der Infusionsanleitung, Teamkontakt, 24H/72H-Follow-up-Anrufe, Nächste Besuchsplanung.

Körperliche Untersuchung

Von qualifiziertem Personal durchgeführt, beinhaltet:

Allgemeines Aussehen, Kopf/Entsteuer, Thorax, Herz -Kreislauf, Atemweg, Bauch, Bewegungsapparat, Genitourinary, Haut.

Klinisch signifikante Veränderungen werden als AES aufgezeichnet. Vitalzeichen

Konsequent in derselben Position gesammelt werden:

Systolischer/diastolischer BP, HR (BPM), RR (Atemzüge/min), Temperatur (° C). Finale Infusion (I17) und Studienbesuch am Ende des Studiums

Aktivitäten:

Schwere Infektionen pro Patientenjahr:

Gesamtzahl, Typ, Behandlung und Ergebnisse.

Infusionen mit AES:

Gesamtinfusionen gegenüber der Anzahl mit AES.

Sicherheit und AE -Bewertung:

Infusionsbezogene AES: Schweregrad, Dauer, Ergebnis, Kausalität. Ernsthafte AES (SAES): Details, Aktionen, Ergebnisse.

Gesamtklinische Bewertung:

Vollständige körperliche Untersuchung, Vitalfunktionen.

Lebensqualität:

SF-36, Patientenzufriedenheit.

Behandlungseinhaltung:

Bestätigen Sie monatliche Infusionen, verpasste/verzögerte Dosen, Gründe.

Endbesprechung für Teilnehmer:

Zusammenfassung der Behandlung, Nachuntersuchungspläne nach dem Studium.

Letzte Besuchsverfahren:

Check-in, Kontaktaktualisierungen, dokumentieren AES, diskutieren die Ergebnisse und die Schließung von Studien. Strategien zur Minimierung des Verlustes gegen Follow-up-Besuche und geplante Stichprobenabweichungen innerhalb von 7 Tagen. Mark als "vermisst/nicht verfügbar", wenn der Patient nicht teilnehmen kann. Nur als Verlust für die Follow-up eingestuft, wenn trotz aller Bemühungen durch Studienende kein Kontakt möglich ist.

Patientenentzug aus der Studie

Tritt auf, wenn:

Angefordert von Patienten. Zwei aufeinanderfolgende oder drei Gesamtbesuche. Entwicklung von HBV, HCV oder HIV. SAE macht eine weitere IP -Dosierung unangemessen (Ermittlungsdauer des Ermittlers). Die Verwendung von Ausschlussmedikamenten Entzug der Einwilligung Ein Teilnehmer wird als "Einwilligung" zurückgezogen, wenn er sich dafür entscheidet, die Teilnahme an weiteren Studienverfahren einzustellen. Dieses Recht wird durch das Formular zur Einverständniserklärung (ICF/Zustimmung) bestätigt und bestätigt. Sobald die Zustimmung zurückgezogen ist, werden keine zusätzlichen Studienverfahren durchgeführt, und es werden keine weiteren Daten erfasst. Daten, die bis zum Rückzug gesammelt wurden, bleiben in der Studiendatenbank. Wenn der Teilnehmer jedoch die Entfernung seiner Daten fordert, wird er nicht verwendet.

Probengrößenberechnung und statistischer Analyseplan. Die Forscher werden 50 Patienten einschließen, um die Stichprobengröße zu erfüllen, die zur Bewertung der Wirksamkeit erforderlich ist

Sicherheit:

41 Teilnehmer mit mindestens vollständigen Daten bieten uns eine Wahrscheinlichkeit von 90%, eine Obergrenze des einseitigen 95% -Konfidenzintervalls <0,40 zu finden, da der tatsächliche beobachtete Anteil der Infusionen mit einem oder mehr zeitlich assoziierten AE weniger als 20% beträgt. Nationale Daten bestätigen die oben genannte Prämisse

Wirksamkeit:

50 Teilnehmer sind erforderlich. Unter der Annahme einer schwerwiegenden Infektionsrate pro Person-Jahr <1 haben die Ermittler eine Befugnis von 90%, die einseitige H0 abzulehnen, dass die schwerwiegende Infektionsrate ≥ 1 pro Person-Jahr mit einem Signifikanzniveau von 1% und einem Verlust von 20% gegen die Nachuntersuchung. Diese Zahl ist mit der FDA-Regel kompatibel, die darauf hindeutet, dass die Obergrenze des 99% -Konfidenzintervalls <1 eine schwerwiegende Infektion pro Personjahr sein sollte. Die Forscher planen eine Zwischenanalyse nach 6 Monaten Behandlung oder wenn 50%der Stichprobe erreicht werden, je nachdem, was zuerst auftritt, mit einem Signifikanzniveau von 0,5%, basierend auf dem Pocock -Kriterium, um ein Gesamtbedarf von 1%zu erhalten.

Pharmakokinetik:

Die Anzahl der Patienten pro Altersgruppe folgt EMA -Empfehlungen. Es werden 20 Erwachsene oder jugendliche Teilnehmer ab 16 Jahren oder älter sein. Wie von der EMA empfohlen, werden für Kinder Trogwerte gesammelt, aber ohne eine vollständige pharmakokinetische Kurve, um die Belastung mehrerer Blutsammlungen für diese Altersgruppe zu verringern. Die Teilnehmer sind die gleichen wie in der Wirksamkeits- und Sicherheitsstudie.