V-immune: nowa terapia immunoglobulinowa w przypadku niedoboru odporności (VIP)

Wstęp:

Immunoglobulina jest stosowana jako leczenie różnych schorzeń, nie tylko ze względu na jej zdolność do zwalczania infekcji jako terapii zastępczej, ale także ze względu na jej działanie przeciwzapalne i immunomodulujące. Immunoglobuliny charakteryzują się przede wszystkim funkcją przeciwciał, z różnymi klasami i podklasami, które pełnią różne role. Komórki B są przede wszystkim odpowiedzialne za humoralną adaptacyjną odpowiedź immunologiczną (za pośrednictwem przeciwciał). Immunoglobuliny, które są cząsteczkami z funkcją przeciwciał, służą jako receptory komórek B, zakotwiczone w błonie poprzez kompleks molekularny złożony z cząsteczek, które zarówno zakotwiczają immunoglobulinę, jak i promują transdukcję sygnału do komórki. Umożliwia to aktywację komórek B, wywołując kaskadę sygnalizacyjną, która prowadzi do końcowego różnicowania w komórkach plazmatycznych lub komórkach pamięci.

Wrodzone błędy odporności (pierwotne odporności immunku- PIDS) reprezentują dużą, heterogeniczną i szybko rosnącą grupę chorób genetycznych, głównie (ale nie wyłącznie) spowodowanych mutacjami linii zarodkowej utraty lub wzmocnienia funkcji w genach związanych z odpowiedzią immunologiczną. Pomimo ich indywidualnej rzadkości błędy wrodzone wspólnie wpływają na znaczny odsetek pacjentów, z szacunkową globalną częstością występowania 1 na 1 200-2000. Obecnie obejmują one około 500 znanych przyczyn genetycznych, podzielonych na 10 kategorii wymienionych w klasyfikacji 2022 przez Międzynarodową Związek Stowarzyszeń Immunologicznych (IUI), z których około dwie trzecie zidentyfikowano w ciągu ostatniej dekady. Jako dowód dynamicznego rozwoju w dziedzinie opisano około 30 nowych chorób w ostatnich latach.

Na całym świecie najczęstsze wady wśród PIDS-około 60%-upośledzone wytwarzanie przeciwciał, z selektywnym niedoborem IgA i powszechnym zmiennym niedoborem odporności. Co najmniej 80% pacjentów ze zdiagnozowanym niedoborem przeciwciał otrzymuje terapię zastępczą IgG. PID mogą być nierozpoznanym stanem podstawowym związanym z chorobami autoimmunologicznymi, alergicznymi i limfoproliferacyjnymi, a zatem mogą pozostać nierozpoznane przez wiele lat. Pacjenci ze zdiagnozowanym dysfunkcją komórek B i wynikające z tego niedobory przeciwciał wymagają wymiany immunoglobuliny G (IGG), bezpiecznej i skutecznej opcji terapeutycznej w zapobieganiu zakażeniom u pacjentów z PIDS.

Dożylna immunoglobina jest stosowana w leczeniu szerokiej gamy chorób. Jednak jego zatwierdzone wskazania można podzielić na trzy główne kategorie: niedobory przeciwciał pierwotnych i wtórnych przeciwciało, przenoszone pionowo HIV, przewlekła białaczka limfocytowa (CLL), ciężkie infekcje trombocytopeniczne (ITP). Zaleca się inicjowanie terapii zastępczej immunoglobuliny u wszystkich pacjentów, którzy spełniają kryteria diagnostyczne dla IgG Hypogammaglobulinemia, niezależnie od tego, czy mają one agammaglobulinemię, badacze powszechne zmienne niedobór odporności (CVID) lub IGG podklasowy deficesyjnych z podklasą podklasową z podklasą IGG. Produkt immunoglobuliny do stosowania dożylnego w stężeniu 5%, marki V-MMUNE, do leczenia wrodzonych błędów odporności humoralnej / pierwotnych immunodenalizacji obejmujących upośledzoną produkcję IgG klasy immunoglobulin przez limfocyty B.

Biorąc pod uwagę względną niedostępność produktów krwionośnych, wśród których immunoglobuliny są w najważniejszej kategorii, zatwierdzenie nowych produktów w naszym kraju ma ogromne znaczenie ze względu na rosnącą zapotrzebowanie na ten lek na temat zespołu leku, takie jak dyplomatowa, chronicalowa, chronicalowa serwisowa. (CIDP) i warunki hematologiczne, takie jak purpura małopłytkowe odpornościowe. Kilka czynników przyczyniło się do tego niedoboru, w tym coraz bardziej rygorystyczne wymagania bezpieczeństwa; Trudność w uzyskaniu wysokiej jakości osocza, która spełnia standardy głównych agencji regulacyjnych, takich jak FDA i EMA; potrzeba poprawy procesów produkcyjnych; zmniejszenie liczby dawców z powodu pandemii COVID-19; oraz zwiększone zapotrzebowanie na IVIG na początku pandemii, kiedy immunoglobulina zastosowano jako terapeutyczną próbę choroby ówczesnej.

Dlatego dostępność nowych produktów, takich jak Vimmune wytwarzane przez laboratoria Virchow w Indiach, które są skuteczne w leczeniu wyraźnie zdefiniowanych wskazań i mają niezbędne minimalne reakcje niepożądane z profilem bezpieczeństwa podczas i po użyciu klinicznym.

Badacze obecni tutaj badanie kliniczne dotyczące zatwierdzenia regulacyjnego nowego immunogloblin V-IMMUNE® na brazylijskim rynku pierwotnego niedoboru odporności.

Cele

Celem badania są:

1. W celu oceny skuteczności normalnego preparatu immunoglobuliny ludzkiej V-immune® u pacjentów z pierwotnym humoralnym niedoborem odporności w zapobieganiu szybkości poważnej infekcji bakteryjnej w ciągu 12 miesięcy w porównaniu z kontrolami historycznymi;
2. Ocena bezpieczeństwa normalnego preparatu immunoglobuliny ludzkiej V-immune® w odniesieniu do zaobserwowanego odsetka infuzji z jednym lub więcej czasowo związanym z nimi zdarzeń niepożądanych u pacjentów z pierwotnym humoralnym niedoborem odporności;

3. Aby ocenić farmakokinetykę dożylnego V-immune® u pacjentów z pierwotnym humoralnym niedoborem odporności.

   Metody:

   Projekt badania Jest to prospektywne, fazowe III, otwarte, nierandomizowane, wieloośrodkowe, jednoośrodkowe, jednoośrodkowe badanie z historyczną kontrolą regularnego podawania V-immune® drogą dożylną.

   Rekrutacja planu rekrutacji odbędzie się za pośrednictwem 10 krajowych ośrodków immunologicznych specjalizujących się w leczeniu pierwotnego niedoboru odporności za pomocą dożylnego wlewu immunoglobuliny. Pacjenci, którzy już otrzymują regularną dożylną terapię immunoglobulinową i spełniają kryteria kwalifikowalności, zostaną zaproszeni do udziału w badaniu, przechodząc z obecnego produktu na produkt badawczy (IP) na 12 miesięcy.

   Podejście do rekrutacji pacjentów, którzy spełniają kryteria włączenia i już otrzymują leczenie IgG w uczestniczących ośrodkach, zostaną zwrócone do włączenia do badania VIP. Po podpisaniu formularza świadomej zgody (ICF) uczestnik rozpocznie otrzymywanie V-IMMUNE® (On-Pharma) zgodnie z protokołem badania.

   Ponieważ jest to badanie jednorazowe, randomizacja nie zostanie wykonana. Oszczędność, biorąc pod uwagę, że jest to badanie jednorazowe, a kwalifikujący się pacjenci są już leczeni inną dostępną w handlu immunoglobuliną, która zostanie zastąpiona VIMimmune®, zaślepianie uważa się za niepotrzebne.

   Interwencja eksperymentalna Produktem badającym (IP) jest V-immun®, normalna ludzka immunoglobulina i.p. 5% (5G/100 ml), wyprodukowane z kwalifikowanego ludzkiego osocza do użytku dożylnego. Każda fiolka zawiera ludzką immunoglobulinę 50 g/l, maltozę 100 g/l i wodę do wstrzyknięcia. 5% ludzkiego roztworu immunoglobuliny do podawania dożylnego i.p. jest sterylnym, bez pirogenowym przygotowaniem normalnej ludzkiej immunoglobuliny w postaci pojedynczej dawki do infuzji dożylnej. Każdy 10 ml, 50 ml i 100 ml zawiera odpowiednio 0,5 g, 2,5 g i 5 g normalnej ludzkiej immunoglobuliny i jest wytwarzany z wykwalifikowanego ludzkiego osocza za pomocą filtracji błonowej, połączonych etapów chromatograficznych i inaktywacji wirusowej. Treść IGA nie przekracza 2 mg/ml. Rozkład podklasy IgG jest podobny do stwierdzonej w normalnej ludzkiej surowicy.

   Proces produkcyjny wykorzystuje plazmę zebraną od dawców, którzy są badani na podstawie historii medycznej, zgodnie z wytycznymi organów regulacyjnych. Krew jest testowana pod kątem obowiązkowych chorób zakaźnych. W tym procesie stosuje się tylko osocze, które testuje ujemne dla przeciwciał HBSAG, HCV i HIV.

   Normalna ludzka immunoglobulina i.p. 5% (5G/100 ml) V-immune® będzie podawane w dawce 600 mg/kg co 3 tygodnie (+/- 3 dni) drogą dożylną (IV) przy określonej poniżej, w ciągu 3 do 6 godzin:

   0,01 ml/kg/min 0-30 min, 0,02 ml/kg/min 31 do 45 min, 0,04 ml/kg/min 46 do 60 min i 0,06 ml/kg/min 61 min do końca infuzji.

   Eskalacja dawki eskalacji dawki występuje stopniowo, chyba że wystąpią zdarzenia niepożądane (AES). Dawka jest zwiększona tylko wtedy, gdy istnieje dobra tolerancja, bez obecności zdarzeń niepożądanych. Jeśli nastąpi AE, infuzja musi zostać zatrzymana na 20 do 30 minut. Zastosowanie loratadyny, paracetamolu i ondansetronu będzie dozwolone. Niezależnie, można zastosować inny lek z tej samej klasy, pod warunkiem, że poinformowano centrum badań farmakokinetycznych. Po poprawie pacjenta infuzja jest wznawiana ze zmniejszoną szybkością, powraca do początkowej prędkości wlewu. Pacjent będzie obserwowany przez 60 minut po zakończeniu infuzji w celu oceny klinicznej i monitorowania potencjalnych zdarzeń niepożądanych.

   Wstępne środki wstępne przed infuzją produktu badawczego: szybki wlew 500 ml 0,9% chlorku sodu (NaCl) IV, difenhydraminy 50 mg IV i hydrokortyzonu 200 mg IV, a następnie produktu badawczego podawanego przy postępowym zwiększaniu szybkości wlewania. Po infuzji 0,9% NaCl należy kontynuować przy 1 ml/kg/godzinę. Zastosowanie wstępnej zawodowej jest standardową praktyką medyczną i jest uważane za niezbędne dla bezpieczeństwa uczestników.

   Szybka izotoniczna wlew soli fizjologicznej przed podaniem i powolnym izotonicznym wlewem soli fizjologicznej w celu utrzymania dostępu żylnego przez co najmniej 30 do 40 minut jest konieczna i standardowa praktyka w podawaniu tych produktów krwionośnych. Szybki krystaloid przed infuzją zmniejsza ryzyko bólu głowy i aseptyczne zapalenie opon mózgowych po podawaniu, a także ryzyko zdarzeń zakrzepowo-zatorowych. Podawanie krystaloidowe po badaniu wlewu produktu zmniejsza ryzyko poważnych i potencjalnie zagrażających życiu zdarzeń niepożądanych z powodu reakcji anafilaktycznych poprzez umożliwienie szybkiego podawania leków IV u potencjalnie zszokowanego pacjenta, unikając potrzeby awaryjnego centralnego dostępu do żyły.

   Podsumowanie wstępne:

   Szybki wlew 500 ml 0,9% chlorku sodu (NaCl) IV

   Difenhydramina* 50 mg IV (dorosły); Pediatria: 1,25 mg/kg iv

   Hydrokortyzon ** 200 mg IV (dorosły); Pediatria: 3 mg/kg IV

   Po infuzji: 0,9% NaCl przy 1 ml/kg/godzinę przez godzinę

   Ryzyko zakrzepowo -zatorowości: Wykorzystaj najwolniejszy możliwy wskaźnik infuzji

   * Podaj 30 minut przed infuzją.

   ** Podaj 30 minut do 1 godziny przed infuzją.

   W przypadku osób narażonych na zakrzepowo -zatorowatą szybkość infuzji musi być utrzymywana tak niska, jak to możliwe.

   Czynniki ryzyka zakrzepowo -zatorowego obejmują: zaawansowany wiek, otyłość, nadciśnienie tętnicze, cukrzycę, historię poprzednich zdarzeń zakrzepowo -zatorowych, znanych lub wrodzonych zaburzeń zakrzepowych, przedłużające się unieruchomienie, ciężka hipowolemia lub zwiększona lepkość krwi.

   Odstępy leczenia między administracjami powinny pozostać stałe w całym badaniu, pod warunkiem, że poziomy IgG pozostają> 500 mg/l.

   Jeżeli zmiana masy ciała o więcej niż 5% w porównaniu do wyjściowej (wizyta w badaniu przesiewowym), dawka zostanie skorygowana w celu utrzymania stałej dawki masy ciała Mg/kg.

   W przypadku klinicznie istotnego niedociśnienia i/lub reakcji anafilaktycznych, oprócz zatrzymania wlewu i podawania odpowiedniej opieki wspomagającej (która może obejmować epinefrynę, leki przeciwhistaminowe, kortykosteroidy, uzupełniający tlen i rozszerzanie objętości) oraz rejestrowanie incydentu w CRF w CRF jako AE, uczestnik może zostać pobrane z badania badań nad badaniem. W takich przypadkach uczestnicy mogą, jeśli chcą, zakończyć wizyty kontrolne

   Przeciwwskazania i środki ostrożności związane z normalną ludzką immunoglobuliną do podawania dożylnego i.p. 5% jest przeciwwskazane u pacjentów z selektywnym niedoborem IGA.

   Pacjenci mogą doświadczać ciężkich reakcji nadwrażliwości lub anafilaksji w obecności wykrywalnych poziomów IgA po wlewych normalnej ludzkiej immunoglobuliny i.p. 5%. Występowanie ciężkich reakcji nadwrażliwości lub anafilaksji w takich warunkach powinno przyspieszyć rozważenie alternatywnej terapii.

   Dożylne roztwór normalnej ludzkiej immunoglobuliny należy podawać jedynie dożylnie.

   Dodatkowe wymienione środki ostrożności dotyczące stosowania normalnej ludzkiej immunoglobuliny i.p. 5% obejmuje:

   Nadwrażliwość: natychmiastowa nadwrażliwość i reakcje anafilaktyczne są rzadkie, ale możliwe. Jeśli wystąpi nadwrażliwość, natychmiast zatrzymaj infuzję i zainicjuj odpowiednie leczenie. Leki takie jak epinefryna i leki przeciwhistaminowe powinny być łatwo dostępne do natychmiastowego leczenia ostrej reakcji nadwrażliwości, w tym anafilaksji.

   Dysfunkcja nerek: ostra niewydolność nerek, nefropatia osmotyczna i śmierć mogą wystąpić przy użyciu IVIG. Upewnij się, że pacjent nie jest hipowolemiczny przed podaniem. U pacjentów narażonych na zaburzenia czynności nerek z powodu wcześniej istniejącej niewydolności nerek lub predyspozycji do ostrej niewydolności nerek (np. Cukrzyca, hipowolemia, otyłość, stosowanie leków nefrotoksycznych lub wieku> 65), IVIG należy podać w tempie infuzji minimalnej.

   Zespół aseptycznego zapalenia opon mózgowych (AMS): Rzadko występuje w leczeniu IVIG. Może rozpocząć się w ciągu kilku godzin do 2 dni po leczeniu. Odstawienie IVIG zwykle prowadzi do pełnego odzyskiwania bez następstw. Częściej z wysokimi dawkami (2 g/kg) i/lub szybkim wlewem.

   Hemoliza: produkty IVIG mogą zawierać przeciwciała grupowe, które działają jak hemolizyny, powlekanie czerwonych krwinek i powodujące pozytywny bezpośredni test antyglobuliny i, rzadko, hemolizę. Opóźniona niedokrwistość hemolityczna może wystąpić z powodu sekwestracji czerwonych krwinek i ostrej hemolizy, zgodnie z hemolizą wewnątrznaczyniową.

   Ostre uszkodzenie płuc związane z transfuzją (TRALI): Niecardiogenne obrzęk płuc może wystąpić po podaniu IVIG. TRALI charakteryzuje się ciężką niewydolnością oddechową, obrzękiem płuc, niedotoksemią, normalną funkcją lewej komory i gorączką, zwykle występującą od 1 do 6 godzin po leczeniu. Pacjentów należy monitorować pod kątem zdarzeń niepożądanych płuc. Jeśli podejrzewa się TRALI, należy przeprowadzić odpowiednie testy dla przeciwciał antyneustrofilowych zarówno w surowicy produktu, jak i pacjenta. Leczenie obejmuje terapię tlenową i wsparcie wentylacyjne.

   Środki przenoszone: normalna ludzka immunoglobulina i.p. 5% pochodzi z ludzkiego osocza. Ze względu na skuteczne procesy badań przesiewowych i produkcji dawcy ryzyko przenoszenia chorób wirusowych jest wyjątkowo niskie. Teoretyczne ryzyko przenoszenia choroby Creutzfeldt-Jakob (CJD) jest również uważane za wyjątkowo odległe.

   Monitorowanie - Testy laboratoryjne: Okresowe monitorowanie czynności nerek i moczu jest kluczowe u pacjentów o zwiększonym ryzyku ostrej niewydolności nerek. Funkcja nerek (w tym poziom mocznika w surowicy i kreatyniny) należy ocenić przed początkową infuzją i okresowo zgodnie z harmonogramem wizyty. Z powodu potencjalnie zwiększonego ryzyka zakrzepicy należy rozważyć wyjściową ocenę lepkości krwi krwi u pacjentów narażonych na hiperwiorganizację, w tym u pacjentów z krioglobulinemią, chylomikronemią na czczo/wyraźnie podwyższone trójglicerydy lub gammopatie monoklonalne. Jeśli zaobserwowane są objawy/objawy hemolizy po infuzji, należy przeprowadzić odpowiednie testy laboratoryjne. W przypadkach podejrzanego TRALI na produkcie i surowicy pacjenta należy przeprowadzić testy przeciwne-nebrezowe przeciwciała.

   Informacje o pacjencie: Pacjentów należy poinstruować, aby natychmiast zgłaszali objawy, takie jak zmniejszona produkcja moczu, nagłe przyrost masy ciała, zatrzymywanie płynów, obrzęk i/lub duszność oddechu-co może wskazywać na uszkodzenie nerek.

   Ciąża - Kategoria C: Badania reprodukcyjne na zwierzętach nie przeprowadzono z normalną ludzką immunoglobuliną do użycia IV. Nie wiadomo również, czy może to spowodować szkodę płodu po podaniu kobiety w ciąży, czy wpływać na zdolność reprodukcyjną. Powinien być stosowany podczas ciąży tylko wtedy, gdy jest to absolutnie konieczne. Kobiety w ciąży są częścią kryteriów wykluczenia tego badania.

   Prezentacja produktu badawczego (IP) Normalna ludzka immunoglobulina do podawania dożylnego i.p. 5%, V-Immune®, jest dostępny w fiolkach o 0,5 g/10 ml, 2,5 g/50 ml i 5 g/100 ml (stężenie 5%), w formacie jednokrotnie dawki do podawania dożylnego.

   Immunoglobulina V-Immune® V-Immune® jest wytwarzana, pakowana i oznaczana przez Virchow Biotech Private Limited i importowana przez Onpharma Importadora Exportadora e Distridaidora de Medicamentos LTDA, zgodnie z aktualnymi przepisami. Przygotowanie i etykietowanie IP jest zgodne z wytycznymi dotyczącymi dobrej praktyki produkcyjnej (GMP) oraz wytycznych jego dystrybucji do dobrej praktyki dystrybucji (PKB). Etykiety IP będą w języku portugalskim i spełniają brazylijskie wymagania prawne.

   Warunki przechowywania i używania immunoglobuliny IP V-immune® muszą być przechowywane w bezpiecznym obszarze o ograniczonym dostępie, najlepiej w zablokowanej szafce, chronionych przed światłem i utrzymywanym w temperaturze między 2 ° C a 8 ° C. V-IMMUNE® nie można zamrozić.

   Procedury ograniczania pacjentów pacjenci, którzy nie wybierani do analizy farmakokinetycznej (PK) muszą przybyć do ośrodków badań 60 minut przed infuzją i pozostać w obserwacji przez 60 minut po zakończeniu infuzji w celu oceny klinicznej i monitorowania zdarzeń niepożądanych.

   W przypadku pacjentów wybranych/kwalifikujących się do analizy PK ten sam okres spożywania będzie miał zastosowanie w dniach 1 do 8 i 10 do 17. Jednak w dniu 9 pacjentów ci muszą przybyć 60 minut przed infuzją i pozostać w centrum do 6 godzin po wlewie do pobrania próbek krwi. Muszą również powrócić po remonty krwi po 24 godzinach, 72 godzinach, 7 dniach, 14 dniach i 21 dniach po 9. wlewach.

   Parametry farmakokinetyczne

   Dla tego badania zostaną określone następujące parametry farmakokinetyczne:

   CMAX: osiągnęło maksymalne stężenie w osoczu, na podstawie danych eksperymentalnych uzyskanych bezpośrednio z krzywej stężenia w osoczu.

   AUC₀-T (obszar pod krzywą): Obszar pod krzywą stężenia w osoczu od zera czasu do ostatniego stężenia powyżej dolnej granicy kwantyfikacji, obliczonej przy użyciu reguły trapezoidalnej.

   AuCinf: Obszar pod krzywą stężenia w osoczu od czasu zero czasu do nieskończoności (ekstrapolowana), obliczona jako AuCinf = Auc₀-T + CT/KEL, gdzie CT jest ostatnim wymiernym stężeniem, a Kel jest stałą szybkości eliminacji.

   Tmax: Czas dotrzeć do CMAX. KEL: stała szybkości eliminacji, oszacowana na zboczu liniowej regresji logarytmu naturalnego stężenia w porównaniu do czasu dla co najmniej trzech punktów danych powyżej dolnej granicy kwantyfikacji.

   T½ (okres półtrwania): Eliminacja półtrwania, obliczona jako LN (2)/Kel. VD (objętość dystrybucji): objętość dystrybucji z fazy końcowej krzywej farmakokinetycznej, obliczona jako dawka/(KEL × AuCinf).

   Próbki harmonogramu próbkowania zostaną pobierane przy użyciu rur 7,5 ml z separatorami żelowymi, oznaczonymi numerem uczestnika, numeru kolekcji, punktu czasowego, numeru infuzji, kodu produktu (IGG) i numeru protokołu. Próbki krwi wynoszące 7,5 ml zostaną zebrane przed numerem infuzji 0 (wcześniejsze leczenie IVIG stosowane przez uczestnika) i przed infuzjami od 1 do 9 V-Immune®.post-infuzyjne próbki farmakokinetyczne zostaną zebrane po dziewiątym etapie analitycznym infuzyjnym zgodnie z literaturą. Może to być poprzedzone przez redukcję i/lub alkilowanie, a następnie trawienie enzymatyczne.

   Cytatowane podejście do przygotowania ma na celu opracowanie i zastosowanie solidnej i selektywnej metody MRM (monitorowanie wielu reakcji), zdolnej do wykrycia specyficznej pary jonów Q1/Q3 pochodzącej z trawienia docelowego białka w tym przypadku, IgG-thus pośrednio określające jego stężenie plazmy. Biorąc pod uwagę istnienie wielu podklas IgG (IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4), specyficzne fragmenty peptydowe można znaleźć w bazach danych białkowych i literaturze naukowej, które są unikalne dla każdej podklasy. Przyjmowano następujące sekwencje peptydowe jako punkt wyjścia do opracowania bioanalitycznej metody kwantyfikacji całkowitego IgG i jej podklas:

   Peptyd fnwyvdgvevhnak - specyficzny dla peptydu IgG1 CCVECPPCPAPPVAGPPPSVFLFPPKPKPK - specyficzny dla peptydu IgG2, ponieważ analit jest substancją bioanalityczną IgG3 za pomocą MATROGATIFIX (W tym przypadku konieczne jest osocze bydlęce). Ten surogat zostanie wykorzystany do generowania krzywych kalibracji i próbek kontroli jakości przetwarzanych w podobny sposób jak nieznane próbki od uczestników badania.

   W przypadku przygotowania próbki i analizy LC-MS/MS można zastosować następujące odczynniki, jeśli wymagana jest ekstrakcja z wcześniejszą redukcją i alkilowaniem: między innymi dwuwarowęglan amonu, 2,2,2-trifluoroetanol, DL-Ditiothreitol, jodoacetamid, kwas formowy lub kwas ocytowy. Jeśli wykonywane jest tylko wytrącanie białka, a następnie trawienie enzymatyczne, można zastosować odczynniki, takie jak aceton, izopropanol, kwas nadchlorowy, acetonitryl lub metanol.

   W obu przypadkach próbkę należy inkubować z trypsyną klasy MS co najmniej sugerowanym stężeniem 1 g/l.

   Metody chromatograficzne wykorzystują gradienty fazy ruchomymi w celu poprawy rozdziału różnych łańcuchów peptydów, które mogą być utworzone podczas ekstrakcji. System będzie działał przy ciśnieniach kompatybilnych z UPLC, z wodną fazą ruchomą zawierającą 0,1% kwasu mrówkowego i fazą organiczną składającą się z metanolu lub acetonitrylu, również z 0,1% kwasem mrówkowym. Zalecane kolumny obejmują typy rdzeniowe, takie jak wód X mostek C8 (3,0 × 30 mm, 3,5 µm) lub Eclipse Agilent plus C18 RRHD (1,8 μm, 2,1 × 100 mm).

   Wykrywanie analitów zostanie wykonane przy użyciu potrójnego spektrometru masowego kwadrupolowego, Model API6500 z SCIEX. Metoda zostanie zatwierdzona zgodnie z RDC nr 27, z dnia 17 maja 2012 r., Pokrywający parametry walidacji liniowości, precyzji, dokładności, przeniesienia, efektu macierzy, selektywności, stabilności w matrycy biologicznej i kontrola stabilności rozwiązania lub standardowe leczenie: grupa kontrolna będzie składać się z kontroli historycznych, jak opisano w współrzędnych literatury: żadne korepetenty nie będą dozwolone. Kontynuacja przez 12 miesięcy.

   Wizyty:

   • Wszystkie możliwości infuzji immunoglobuliny z gromadzeniem danych - przewiduje się, że w ciągu 1 roku odbędzie się 17 wizyt w infuzji V -immune®. Pacjenci zostaną zaobserwowani:

   • Bezpośrednio przed infuzją;
   • Podczas infuzji i do 60 minut później;
   • 24 i 72 godziny po rozpoczęciu infuzji produktu badawczego - przez kontakt telefoniczny (6).

   Dane laboratoryjne:

   W „Baseline” i przed wykonaniem 1., 3, 6, 9, 12 i 17 infuzji:

1. BHCG, CBC, płytki krwi, elektrolity, glukoza w surowicy, mocznik, kreatynina, ATT, ALT, LDH, całkowita i częściowa bilirubina moczu (typ 1)

Przed wykonaniem 1, 3, 6, 9, 12. i 17 infuzje:

1. Haptoglobin, Coombs

Przed wszystkimi infuzjami:

1. Wizyty badań przesiewowych IgG (T1 i T2)

Cel:

Zidentyfikuj kwalifikujących się pacjentów, oceniając kryteria włączenia i wykluczenia, mierząc poziomy IgG i uzyskując świadomą zgodę.

Zajęcia podczas pokazu wizyty T1: Odbiór i świadoma zgoda:

Podaj szczegółowe wyjaśnienie badania, w tym cele, procedury, ryzyko i świadczenia. Powojna świadomowa zgoda (ICF/zgoda) należy uzyskać przez kwalifikowany i delegowany personel i podpisany przez badacza przed przeprowadzeniem jakichkolwiek procedur badań lub laboratoriów badań przesiewowych.

Oceń czas od pierwotnej diagnozy niedoboru odporności. Oceń stosowanie premedykacji z wcześniejszym infuzją IgG. Sprawdź osmolarność i zawartość IgA poprzedniego IgG. Oceń przestrzeganie poprzedniego leczenia IgG (częstotliwość infuzji i dwa najnowsze poziomy koryta).

Uzyskaj pisemną świadomą zgodę.

Zbieranie danych demograficznych i medycznych:

Rekordowy wiek, seks, rasa, waga i BMI. Zbieraj historię medyczną, w tym infekcje i obecne leki.

Ocena kryteriów kwalifikowalności:

Przejrzyj kryteria włączenia (np. Potwierdzona diagnoza, odpowiedni wiek). Oceń kryteria wykluczenia (np. Choroba autoimmunologiczna, alergia IgG).

Badanie fizyczne i kliniczne:

Wykonaj egzamin fizyczny. Zapisz objawy życiowe (RR, HR, BP, temperatura).

Zbiór próbek do testów laboratoryjnych:

Poziomy wyjściowe IgG:

Jeśli dwa wcześniejsze poziomy IgG> 500 mg/dl w ciągu 90 dni, pacjent może kontynuować bez nowego laboratorium badań przesiewowych.

Jeśli jeden wcześniejszy poziom IgG> 500 mg/dl w ciągu 30 dni, przejdź do T2 do drugiego testu.

Jeśli IgG przy T1> 700 mg/dl, infuzja może kontynuować T2 nawet przed wynikem T2. Inne laboratoria na protokół. Jakość życia i objaw Kwestionariusze: Zastosuj kwestionariusz QOL SF-36. Oceń obecne objawy związane z tym stanem.

Zajęcia podczas badania wizyty T2:

Ponowna ponowna przestrzeganie leczenia IgG. Kryteria włączenia/wykluczenia echecka. Powtórz badanie fizykalne i życiowe. W razie potrzeby zbierz drugą próbkę IgG (może wystąpić ten sam dzień co pierwszy infuzja, jeżeli wcześniejszy poziom> 700 mg/dl).

Inne laboratoria specyficzne dla protokołu. Elastyczne okno: Badanie badań można przedłużyć (dyskrecja badacza) do czasu potwierdzenia wyjściowego IgG> 500 mg/dl.

Pierwsza wizyta w infuzji (i1) Cel: Potwierdź kwalifikowalność i rozpocznij administrację IP.

Działania: Wyniki przeglądu przeglądu:

Przejrzyj ustalenia laboratoryjne i kryteria kwalifikowalności. Omów nieprawidłowe wyniki i status kwalifikowalności.

Ocena kliniczna:

Zaktualizuj egzamin fizyczny i znaki życiowe. Przejrzyj zmiany stanu zdrowia. Zapewnij instrukcje dziennika objawów.

Potwierdzenie kwalifikowalności:

Ostateczne potwierdzenie kwalifikowalności. Przejrzyj jednocześnie leki.

Kolekcja próbek laboratoryjnych:

Wyjściowy IgG. Test ciążowy dla kobiet w wieku rozrodczym, chyba że na stałe sterylne. Inne testy: CBC z płytkami krwi, elektrolitów, glukozy, mocznika, kreatyniny, ATT, ALT, LDH, analizy moczu, pneumokoków i hemofilu przeciwciał przeciwciał.

IgG przed dawką z wcześniejszego produktu. Próbki PK przed dawką.

Pierwszy infuzja V-Immune®:

Wyjaśnij procedurę. Nagraj numer partii i datę ważności. Podaj protokół infuzji.

Monitorowanie zdarzeń niepożądanych (AES):

Zapisuj AE, wskaźnik infuzji przy początku, przerwy, wskaźnik ponownego uruchomienia, całkowity czas infuzji, całkowita dawka IgG i stosowanie premedizacji.

Zbieranie danych po infuzji:

Nagrywać AES, witalne po infuzyjnej (30-60 min) i stan ogólny. Rekord czasu rozładowania.

Instrukcje pacjenta:

Zapewnij wskazówki po infuzji, instrukcje awaryjne i kontakt zespołu. Poinformuj, że połączenia kolejne nastąpi po 24 i 72 godzinach. Zaplanuj następną wizytę. Infuzje od 2 do 16 (I2 do I16) Cel: Prowadzić infuzje co 3 tygodnie (± 3 dni).

Działania:

Przejrzyj poprzednie wyniki i status kliniczny:

Przejrzyj poprzednie laboratoria i objawy. Zaktualizuj egzamin fizyczny i witalne. Przejrzyj infekcje, hospitalizacje, antybiotyki, czas na rozwiązanie i utracone dni pracy.

SF-36 w infuzjach 8 i 16.

Kolekcja laboratorium:

IgG przed infuzją dla wszystkich wizyt. Próbki PK przed dawką dla infuzji 1-9. Łącznie 12 próbek PK na osobę dorosłą; Dzieci tylko przed dawką. Infuions 3, 6*, 9, 12, 17: Test ciążowy dla kobiet o potencjale dzieci. Inne laboratoria: CBC, elektrolity, glukoza, mocznik, kreatynina, AST, ALT, LDH, analiza moczu, haptoglobina, test Coombs.

*Infuzja 6: Miana przeciwciała pneumokokowego i Haemophilus.

Infuzja V-Immune®:

Nagrywać partię i wygaśnięcie. Administrować na protokół. Monitoruj i dokumentuj AES oraz wszystkie szczegóły infuzji jak w i1.

Po infuzji:

Nagryj AES, Post-infuzyjne (30-60 min), czas rozładowania, PK na sekcję

Instrukcje pacjenta:

Wytyczne po infuzji, kontakt zespołu, 24h/72H połączenia kolejne, następne harmonogram wizyty.

Badanie fizyczne

Przeprowadzone przez wykwalifikowanego personelu, obejmuje:

Ogólny wygląd, głowa/ENT, klatka piersiowa, sercowo -naczyniowa, oddechowa, brzuch, mięśniowo -szkieletowy, płciowy, skóra.

Klinicznie istotne zmiany są rejestrowane jako AES. Znaki życiowe

Być konsekwentnie gromadzone w tej samej pozycji:

Skurczowy/rozkurczowy BP, HR (BPM), RR (oddech/min), temperatura (° C). Infuzja końcowa (I17) i wizyta na koniec studiów

Działania:

Ciężkie infekcje na rok pacjenta:

Całkowita liczba, rodzaj, leczenie i wyniki.

Infuzje z AES:

Całkowite infuzje vs. liczba z AES.

Ocena bezpieczeństwa i AE:

AE związane z infuzją: nasilenie, czas trwania, wynik, przyczynowość. Poważne AES (SAE): Szczegóły, działania, wyniki.

Ogólna ocena kliniczna:

Pełne egzamin fizyczny, znaki życiowe.

Jakość życia:

SF-36, zadowolenie pacjenta.

Przestrzeganie leczenia:

Potwierdź comiesięczne infuzje, pominięte/opóźnione dawki, powody.

Ostateczne podsumowanie uczestników:

Podsumowanie leczenia, plany kontrolne po studiach.

Ostateczne procedury wizyty:

Zameldowanie, aktualizacje kontaktu, dokumentuj AES, omów wyniki i zamknięcie studiów. Strategie zminimalizowania straty w przypadku pominiętych wizyt i zaplanowanych odchyleń próbek w ciągu 7 dni. Zaznacz jako „nieudany/niedostępny”, jeśli pacjent nie może uczestniczyć. Dopiero sklasyfikowane jako strata do obserwacji, jeśli kontakt nie jest możliwy do końca badania, pomimo wszystkich wysiłków.

Odstawienie pacjenta z badania

Występuje, jeśli:

Proszony przez pacjenta. Dwie kolejne lub trzy całkowite nieudane wizyty. Rozwój HBV, HCV lub HIV. SAE wykonuje dalsze dawkowanie IP nieodpowiednie (dyskrecja badacza). Zastosowanie leków wykluczających wycofanie zgody Uczestnik będzie uważany za „wycofanie zgody”, jeśli zdecydują się zaprzestać uczestnictwa w dalszych procedurach badań. To prawo zostanie uznane i potwierdzone za pomocą formularza świadomej zgody (Formularz ICF/zgoda). Po wycofaniu zgody nie zostaną przeprowadzone żadne dodatkowe procedury badań i nie zostaną zebrane żadne dalsze dane. Dane zebrane aż do wycofania pozostaną w bazie danych badania; Jeśli jednak uczestnik poprosi o usunięcie swoich danych, nie zostanie ono używane.

Obliczenie wielkości próby i plan analizy statystycznej. Badacze obejmą 50 pacjentów w celu spełnienia wielkości próby wymaganej do oceny skuteczności

Bezpieczeństwo:

41 uczestników z co najmniej kompletnymi danymi zapewnia nam 90% prawdopodobieństwo znalezienia górnej granicy jednostronnego 95% przedziału ufności <0,40, zakładając, że prawdziwa zaobserwowana odsetek infuzji z jednym lub więcej czasowo powiązanymi AE jest mniejsza niż 20%. Dane krajowe potwierdzają powyższą przesłankę

Skuteczność:

Wymaganych jest 50 uczestników. Zakładając poważny wskaźnik infekcji na osobę w roku <1, śledczy będą mieli 90% uprawnienia do odrzucenia jednostronnego H0, że poważny wskaźnik infekcji ≥ 1 na osobę, z 1% poziomem istotności i 20% stratą. Liczba ta jest zgodna z zasadą FDA, która sugeruje, że górna granica 99% przedziału ufności powinna być <1 poważna infekcja na osobę. Badacze planują analizę tymczasową po 6 miesiącach leczenia lub po osiągnięciu 50%próbki, w zależności od tego, co nastąpi najpierw, przy poziomie istotności 0,5%, w oparciu o kryterium Pococka, aby utrzymać ogólny poziom istotności 1%.

Farmakokinetyka:

Liczba pacjentów na grupę wiekową jest zgodna z zaleceniami EMA. Będzie 20 uczestników dorosłych lub nastolatków w wieku 16 lat lub starszych. Zgodnie z zaleceniami EMA wartości koryta zostaną zebrane dla dzieci, ale bez pełnej krzywej farmakokinetycznej w celu zmniejszenia ciężaru wielu zbiorów krwi dla tej grupy wiekowej. Uczestnicy są tacy sami, jak w badaniu skuteczności i bezpieczeństwa.