Metformine en Moleculaire Veroudering bij Prediabetes
Het effect van metforminebehandeling op surrogaatmerkers van veroudering (leukocyten-telomeerlengte en telomerase-activiteit), expressie van langlevendheidsgenen (Sirtuin 1, p66Shc, p53 en mammalian target of rapamycin), bij Noord-Indiase individuen met prediabetes: een gerandomiseerde gecontroleerde studie
De incidentie en prevalentie van diabetes mellitus type 2 (T2DM) nemen wereldwijd toe. De wereldwijde prevalentie van diabetes is sinds 1980 bijna verdubbeld, van 4,7% naar 8,5% in de volwassen populatie. Aziatische Indiërs hebben een van de hoogste incidentiecijfers van prediabetes (10,3%) en diabetes mellitus type 2 (T2DM) (8,8%) onder alle grote etnische groepen, en de overgang van prediabetes naar diabetes vindt sneller plaats in deze populatie.
Metformine is effectief gebleken in het voorkomen van de progressie van prediabetes naar manifeste diabetes. Bovendien verbetert metformine de levensduur in diermodellen via een anti-verouderingspad dat wordt aangedreven door mTOR. Metformine is ook aangetoond dat het endotheelcellen beschermt tegen hyperglykemische schade door direct de expressie van Sirtuïne-1 (SIRT1) te stimuleren, een deacetylase betrokken bij metabolisme en levensduur door SIRT1 downstream targets FoxO1 en p53/p21 te moduleren. Het is belangrijk op te merken dat SIRT1 en het zoogdierlijke doelwit van rapamycine (mTOR) een netwerk vormen dat cellulaire stofwisseling en levensduurprogramma's met elkaar verbindt.
Er is slechts één studie beschikbaar die de relatie van metformine met levensduur heeft onderzocht. Een eerdere studie voerde een enkelblind gerandomiseerd placebo-gecontroleerd onderzoek uit bij prediabetische proefpersonen in Italië (n=38) die gedurende 2 maanden metformine 1500 mg/dag (n=19) of placebo (n=19) kregen. Zij toonden aan dat het gebruik van metformine de insulinegevoeligheid en metabole parameters, SIRT1-gen/eiwitexpressie en SIRT1-promoterchromatintoegankelijkheid significant verhoogde. Zij toonden ook aan dat het gebruik van metformine de mTOR-genexpressie verhoogde met een gelijktijdige afname van p70S6K-fosforylering en het plasma N-glycaanprofiel veranderde. Deze auteurs concludeerden dat bij individuen met prediabetes, metformine effectorpaden verbeterde waarvan is aangetoond dat ze de levensduur in diermodellen reguleren.
De onderzoekers hebben recentelijk een studie uitgevoerd bij 797 prediabetische vrouwen uit Noord-India (waarvan 492 obesitas hadden). In deze studie meldden de onderzoekers dat leeftijd, obesitas en subcutane adipositas (voornamelijk romp) de belangrijkste oorzaken zijn van verkorting van leukocytentelomeren. Het is nog onbekend hoe metformine verouderingsgerelateerde genen en surrogaatmarkers van veroudering beïnvloedt in de Aziatisch-Indiase populatie.
Deze klinische studie heeft tot doel de effecten van metforminebehandeling op surrogaatmarkers van veroudering (leukocytentelomeerlengte en telomeraseactiviteit) te evalueren in de context van prediabetes. Wij zijn van plan om de behandeling met metformine gedurende zes maanden te vergelijken met placebo bij prediabetische proefpersonen. Wij zullen de surrogaatmarkers van veroudering (leukocytentelomeerlengte en telomeraseactiviteit) en de expressie van levensduurgenen SIRT1, p66Shc, p53 en mTOR in perifere bloedmononucleaire cellen (PBMC's) beoordelen voor en na 6 maanden metforminebehandeling.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Onderzoeksmethodologie en uitkomstmaten:
- Klinische geschiedenis en onderzoek: Klinische geschiedenis en bloeddruk.
- Body mass index: BMI wordt berekend met de formule gewicht (kg)/lengte (m²).
- Antropometrische beoordeling: Alle omtrekken (taille, heupen, midden dij, midden arm en nek) en huidplooien (biceps, triceps, voorste oksel, subscapulair, supra-iliacaal, laterale thoracale en dij) worden gemeten. Alle metingen worden drie keer herhaald op dezelfde positie en onder dezelfde omstandigheden.
Lichaamssamenstelling: Lichaamssamenstelling wordt gemeten via multi-frequente bio-elektrische impedantie (MF-BIA; InBody 770, Cerritos, CA, USA) Bezoek-2 (dag 90) Bezoek-3 (dag 180) Controle op therapietrouw Inschrijving van prediabetespatiënten (BMI>25kg/m²) (n=112) Onderzoeken: Nuchtere bloedsuiker, IGT (2 uur na orale glucoselading (75g) en HBA1c Groep-I: Metforminegroep (n=56) Groep-II: Placebogroep (n=56) Eindevaluatie Metingen zoals bij bezoek 1 Basisonderzoeken: Klinische en voedingsprofielen, bloeddruk, antropometrische beoordelingen [body mass index, omtrekken (taille, heupen, midden dij, midden arm en nek) en huidplooien (biceps, triceps, subscapulair, supra-iliacaal, dij, laterale thoracale en kuit)], lichaamsvet, handknijpkracht, glykemisch en lipidenprofiel andere metabole parameters, nuchter seruminsuline, C-peptide en HOMA-IR, leukocytentelomeerlengte en telomeraseactiviteit en genexpressie van SIRT1, mTOR, p53, p66Shc genen.
Randomisatie: Bezoek 1 (dag 0) Screening Dieet en lichaamsbeweging (inloopperiode van twee weken) 5
- Handknijpkracht: Knijpkracht wordt gemeten met een Jamar Analoge Handdynamometer met deelnemers zittend, elleboog langs het lichaam en gebogen in een rechte hoek, pols in neutrale positie, dynamometerhandgreep positie II en ondersteuning onder de dynamometer.
- Biochemische metingen: Het bloedmonster wordt afgenomen na 12 uur vasten, waarbij de proefpersoon de voorgaande drie dagen een normaal dieet heeft gevolgd. Een 75-g OGTT wordt uitgevoerd. Bloedmonsters worden geanalyseerd op: bloedglucose, A1C, lipiden, nuchter insuline, C-peptide, Homeostasis Model Assessment (HOMA)-Insulineresistentie (IR), HOMA-Beta (β%) en serumglucagonwaarden.
- DNA-isolatie en kwantificering: DNA wordt gescheiden van perifere bloedmononucleaire cellen met de QIAamp DNA-extractiekit (Qiagen, Hilden, Duitsland) en wordt opgeslagen bij -20°C voor toekomstige experimenten. Na DNA-isolatie worden de DNA-monsters gekwantificeerd en verdund tot 50 ng/μL. De concentratie en kwaliteit van DNA worden beide gemeten met een nanodrop (Nanodrop Technologies, Wilmington, NC, USA) en monsters worden geïncludeerd voor analyse als ze een optische dichtheidsratio A260/A280 > 1,8 hebben. h) Meting van leukocytentelomeerlengte: LTL wordt geanalyseerd met een kwantitatieve polymerasekettingreactie (qPCR) gebaseerde techniek die het telomeerherhalingssequentie kopienummer (T) vergelijkt met een referentie enkelvoudig kopie-gen kopienummer (S). De telomeerlengte voor elk monster wordt geschat met de telomeer-tot-enkelvoudig-gen ratio (T/S-ratio) door berekening van ΔCt [Ct(telomeer)/Ct(enkelvoudig gen)]. De T/S-ratio voor elk monster (x) wordt genormaliseerd naar de gemiddelde T/S-ratio van het referentiemonster [2-(ΔCtx-ΔCtr) = 2-ΔΔCt], dat wordt gebruikt voor de standaardcurve, zowel als referentiemonster als validatiemonster.
i) Genexpressie door real-time PCR: Totaal RNA wordt geëxtraheerd met een RNeasy Mini Kit (QIAGEN), cDNA wordt gesynthetiseerd met een iScript cDNA-synthesekit (Bio-Rad, USA). Q-PCR-assay wordt uitgevoerd in een thermische cycler (iCycler iQ5, Bio-Rad, Hercules, CA). Primers voor Sirt1, p66Shc, p53 en mTOR worden ontworpen op basis van sequenties uit de GenBank-database met Primer 3 (Whitehead Institute, Massachusetts, USA) en Operon's Oligo-software (Operon, California, USA), gekocht bij Eurofins MWG (Ebersberg, Duitsland). De vergelijkende drempelcyclusmethode (ΔΔCq), die verschillen in drempelcycluswaarden tussen groepen vergelijkt, wordt gebruikt om de relatieve verandering in genexpressie te verkrijgen.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Fase
- Niet toepasbaar
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
National Capital Territory of Delhi
-
New Delhi, National Capital Territory of Delhi, Indië, 110048
- Anoop misra
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
- Volwassen
Accepteert gezonde vrijwilligers
Beschrijving
Inclusiecriteria:
Leeftijd: 30-60 jaar Beide geslachten (man en vrouw)
Diagnose van prediabetes, gedefinieerd als:
Gestorde nuchtere glucose (IFG): Nuchtere plasmaglucose 100-125 mg/dL EN/OF Gestorde glucosetolerantie (IGT): 2-uurs plasmaglucose 140-199 mg/dL na 75 g orale glucosetolerantietest (OGTT)
IGT is verplicht (d.w.z. elke deelnemer moet IGT hebben, zelfs als IFG ook aanwezig is)
Exclusiecriteria:
Diabetes mellitus type 1 Diabetes mellitus type 2 Zwangerschap of borstvoeding Hypoglykemie (bloedglucose <70 mg/dL) na medicatie Acute of chronische ontstekingsziekten Immunologische ziekten (bijv. auto-immuunziekten) Voorgeschiedenis van orgaantransplantatie Huidige of recente steroïdtherapie Ongecontroleerde arteriële hypertensie Bekende allergie of intolerantie voor metformine Grote operatie of cardiovasculaire gebeurtenissen (bijv. myocardinfarct, beroerte) in de afgelopen 3 maanden
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Behandeling
- Toewijzing: Gerandomiseerd
- Interventioneel model: Parallelle opdracht
- Masker: Verdrievoudigen
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Experimenteel: placebo gedurende zes maanden
Na een voorbereidingsperiode van twee weken met dieet en lichaamsbeweging zullen de proefpersonen willekeurig worden toegewezen om gedurende zes maanden ofwel metformine (500 mg tweemaal daags na de maaltijd) ofwel een overeenkomend placebo te ontvangen.
Alle deelnemers zullen maandelijks thuis nuchtere en postprandiale bloedglucose (na het ontbijt, na de lunch, na het avondeten) monitoren met behulp van een glucosemeter.
Beide groepen zullen dagelijks dagboeken bijhouden waarin de tabletinname en eventuele gemiste doses worden geregistreerd.
Bij elk bezoek wordt een medicatievoorraad voor drie maanden verstrekt, waarbij resterende tabletten worden geteld om de therapietrouw te beoordelen.
|
Een door een computer gegenereerde randomisatiesequentie zal worden gemaakt door een onafhankelijke statisticus met behulp van een onbeperkt schema. Toewijzing zal worden verborgen in opeenvolgend genummerde, verzegelde, ondoorzichtige enveloppen die worden bewaard door niet-onderzoek kantoorpersoneel. Na een inloopperiode van twee weken met dieet en lichaamsbeweging, zullen proefpersonen worden gerandomiseerd om gedurende zes maanden ofwel metformine (500 mg tweemaal daags) of een placebo te ontvangen. Deelnemers zullen maandelijks thuis nuchtere en postprandiale bloedglucose monitoren. Medicatietrouw zal worden bijgehouden via dagboeken en pilentellingen tijdens driemaandelijkse bezoeken. Naleving (doel ≥85%) zal worden gehandhaafd via tweewekelijkse telefoongesprekken (stedelijke gebieden), tweemaandelijkse huisbezoeken door gezondheidswerkers (landelijke gebieden) en driemaandelijkse motiverende sessies.
Andere namen:
|
|
Experimenteel: Effect van metforminebehandeling op leukocyten telomeerlengte
Geanalyseerd door qPCR voor T/S-ratio.
|
Een door een computer gegenereerde randomisatiesequentie zal worden gemaakt door een onafhankelijke statisticus met behulp van een onbeperkt schema. Toewijzing zal worden verborgen in opeenvolgend genummerde, verzegelde, ondoorzichtige enveloppen die worden bewaard door niet-onderzoek kantoorpersoneel. Na een inloopperiode van twee weken met dieet en lichaamsbeweging, zullen proefpersonen worden gerandomiseerd om gedurende zes maanden ofwel metformine (500 mg tweemaal daags) of een placebo te ontvangen. Deelnemers zullen maandelijks thuis nuchtere en postprandiale bloedglucose monitoren. Medicatietrouw zal worden bijgehouden via dagboeken en pilentellingen tijdens driemaandelijkse bezoeken. Naleving (doel ≥85%) zal worden gehandhaafd via tweewekelijkse telefoongesprekken (stedelijke gebieden), tweemaandelijkse huisbezoeken door gezondheidswerkers (landelijke gebieden) en driemaandelijkse motiverende sessies.
Andere namen:
Geanalyseerd met qPCR voor T/S-ratio.
|
|
Experimenteel: Om de effecten van metforminebehandeling op telomeraseactiviteit te evalueren
Telomerase-activiteit werd uitgevoerd met de ELISA-methode
|
Een door een computer gegenereerde randomisatiesequentie zal worden gemaakt door een onafhankelijke statisticus met behulp van een onbeperkt schema. Toewijzing zal worden verborgen in opeenvolgend genummerde, verzegelde, ondoorzichtige enveloppen die worden bewaard door niet-onderzoek kantoorpersoneel. Na een inloopperiode van twee weken met dieet en lichaamsbeweging, zullen proefpersonen worden gerandomiseerd om gedurende zes maanden ofwel metformine (500 mg tweemaal daags) of een placebo te ontvangen. Deelnemers zullen maandelijks thuis nuchtere en postprandiale bloedglucose monitoren. Medicatietrouw zal worden bijgehouden via dagboeken en pilentellingen tijdens driemaandelijkse bezoeken. Naleving (doel ≥85%) zal worden gehandhaafd via tweewekelijkse telefoongesprekken (stedelijke gebieden), tweemaandelijkse huisbezoeken door gezondheidswerkers (landelijke gebieden) en driemaandelijkse motiverende sessies.
Andere namen:
|
|
Experimenteel: Expressie van langlevendheidsgenen SIRT1, p66Shc, p53 en mTOR
Onderzoekers hebben de expressie van de levensduurgenen SIRT1, p66Shc, p53 en mTOR in perifere bloedmononucleaire cellen (PBMCs) beoordeeld vóór en na 6 maanden behandeling met metformine.
|
Een door een computer gegenereerde randomisatiesequentie zal worden gemaakt door een onafhankelijke statisticus met behulp van een onbeperkt schema. Toewijzing zal worden verborgen in opeenvolgend genummerde, verzegelde, ondoorzichtige enveloppen die worden bewaard door niet-onderzoek kantoorpersoneel. Na een inloopperiode van twee weken met dieet en lichaamsbeweging, zullen proefpersonen worden gerandomiseerd om gedurende zes maanden ofwel metformine (500 mg tweemaal daags) of een placebo te ontvangen. Deelnemers zullen maandelijks thuis nuchtere en postprandiale bloedglucose monitoren. Medicatietrouw zal worden bijgehouden via dagboeken en pilentellingen tijdens driemaandelijkse bezoeken. Naleving (doel ≥85%) zal worden gehandhaafd via tweewekelijkse telefoongesprekken (stedelijke gebieden), tweemaandelijkse huisbezoeken door gezondheidswerkers (landelijke gebieden) en driemaandelijkse motiverende sessies.
Andere namen:
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Lengte van leukocyttelomerase
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Leukocyt Telomeerlengte Meting: LTL werd geanalyseerd met behulp van kwantitatieve polymerasekettingreactie (qPCR), waarbij het telomeerherhalingssequentie-kopieaantal (T) werd vergeleken met een referentie enkelkopiegen (S).
Relatieve vouwveranderingen in genexpressie zullen worden bepaald met behulp van de vergelijkende drempelcyclusmethode (ΔΔCq), waarbij verschillen in drempelcycluswaarden tussen groepen worden vergeleken.
|
06 maanden
|
|
Telomerase-activiteit
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Telomerase-activiteit werd bepaald met de ELISA-methode
|
06 maanden
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Expressie van langlevendheidsgenen SIRT1, p66Shc, p53 en mTOR
Tijdsspanne: 6 MAANDEN
|
Totaal RNA wordt geëxtraheerd met een RNeasy Mini Kit (QIAGEN). cDNA wordt gesynthetiseerd met een iScript cDNA-synthesekit (Bio-Rad, VS).
De Q-PCR-test wordt uitgevoerd in een thermocycler (iCycler iQ5, Bio-Rad, Hercules, CA).
Primers voor Sirt1, p66Shc, p53 en mTOR worden ontworpen op basis van sequenties afkomstig uit de GenBank-database met behulp van Primer 3 (Whitehead Institute, Massachusetts, VS) en Operon's Oligo-software (Operon, Californië, VS), en worden aangekocht bij Eurofins MWG (Ebersberg, Duitsland).
De vergelijkende drempelcyclusmethode (ΔΔCq), die verschillen in drempelcycluswaarden tussen groepen vergelijkt, wordt gebruikt om de relatieve vouwverandering in genexpressie te verkrijgen.
|
6 MAANDEN
|
Andere uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Gewicht
Tijdsspanne: 06 maand
|
Het lichaamsgewicht werd gemeten met een standaard weegschaal
|
06 maand
|
|
Lengte
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Hoogte werd gemeten met een standaard hoogteschaal
|
06 maanden
|
|
Body Mass Index
Tijdsspanne: 6 MAANDEN
|
BMI door het gewicht in kilogram (kg) te delen door het kwadraat van de lengte in meters (m2).
|
6 MAANDEN
|
|
Omtrekken
Tijdsspanne: 06 maanden
|
De meting van omtrekken (taille, heup, midden dij, midden arm en nek) werd gemeten met een flexibel, niet-rekbaar meetlint
|
06 maanden
|
|
Huidplooi dikte
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Huidplooien (biceps, triceps, subscapular, suprailiacaal, dij, lateraal thoracaal en kuit) werden gemeten met behulp van huidplooimeters
|
06 maanden
|
|
Lichaamssamenstelling
Tijdsspanne: 6 MAANDEN
|
Gemeten via MF-BIA (InBody 770, CA, USA).
|
6 MAANDEN
|
|
Handgreepspierkracht
Tijdsspanne: 6 MAANDEN
|
Beoordeeld met een Jamar-dynamometer met gebogen ellebogen.
|
6 MAANDEN
|
|
Nuchter en 75g OGTT
Tijdsspanne: 6 MAANDEN
|
Bloedmonsters werden afgenomen na een 12 uur durend vasten voor een 75-g OGTT, waarbij glucose werd geanalyseerd
|
6 MAANDEN
|
|
HAB1C
Tijdsspanne: 06 maanden
|
A1C werd uitgevoerd door een gestandaardiseerd laboratorium
|
06 maanden
|
|
Lipiden
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Lipiden werden bepaald met de RANDOX kit
|
06 maanden
|
|
Insuline
Tijdsspanne: 06 maanden
|
Seruminsuline bepaald met ELISA-kit
|
06 maanden
|
|
C-peptide
Tijdsspanne: 06 maanden
|
C-peptide uitgevoerd met ELISA-kits
|
06 maanden
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- 2.5/FCDOC/EC/HAO/2022-23
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .