Metformin és a molekuláris öregedés prediabetesben
A Metformin-kezelés hatása az öregedés szurrogát markereire (leukocita telomérhossz és telomeráz aktivitás), a hosszú élet génjeinek expressziójára (Sirtuin 1, p66Shc, p53 és az emlősök rapamicin célfehérjéje) észak-indiai prediabeteses egyénekben: egy randomizált kontrollált vizsgálat
A 2-es típusú diabetes mellitus (T2DM) előfordulási gyakorisága és prevalenciája világszerte növekszik. A cukorbetegség globális prevalenciája 1980 óta majdnem megduplázódott, a felnőtt lakosság körében 4,7%-ról 8,5%-ra emelkedett. Az ázsiai indiaiak az egyik legmagasabb előfordulási aránnyal rendelkeznek a prediabetes (10,3%) és a 2-es típusú diabetes mellitus (T2DM) (8,8%) esetében az összes nagyobb etnikai csoport között, és a prediabetesből cukorbetegségbe való átalakulás ebben a populációban gyorsabban következik be.
Bebizonyosodott, hogy a metformin hatékonyan megakadályozza a prediabetes diabétesszé való előrehaladását. Továbbá a metformin az állatmodellek élettartamát egy mTOR által vezérelt öregedésgátló útvonalon keresztül javítja. Azt is kimutatták, hogy a metformin védi az endotélsejteket a hiperglikémiás károsodástól azáltal, hogy közvetlenül stimulálja a Sirtuin-1 (SIRT1) expresszióját, egy deacetilázt, amely a metabolizmusban és a hosszú életben vesz részt a SIRT1 lefelé irányuló célpontjainak, a FoxO1-nek és a p53/p21-nek a módosításával. Fontos megjegyezni, hogy a SIRT1 és a rapamicin mammalian célpontja (mTOR) egy olyan hálózatot alkot, amely összeköti a sejtes anyagcserét és a hosszú élet programjait.
Csak egy tanulmány áll rendelkezésre, amely a metformin és a hosszú élet kapcsolatát vizsgálta. Egy korábbi tanulmányban egyszemélyes vak randomizált placebo-kontrollált vizsgálatot végeztek prediabeteses alanyokon Olaszországban (n=38), akik metformint (1500 mg/nap, n=19) vagy placebót (n=19) kaptak 2 hónapig. Bebizonyították, hogy a metformin használata jelentősen növelte az inzulinérzékenységet és a metabolikus paramétereket, a SIRT1 gén/fehérje expresszióját és a SIRT1 promotor kromatin hozzáférhetőségét. Azt is kimutatták, hogy a metformin használata növelte az mTOR gén expresszióját egyidejűleg a p70S6K foszforiláció csökkenésével, és megváltoztatta a plazma N-glikán profilt. Ezek a szerzők arra a következtetésre jutottak, hogy prediabeteses egyéneknél a metformin javította az effektor útvonalakat, amelyekről kimutatták, hogy szabályozzák az élettartamot állatmodellekben.
A kutatók nemrégiben tanulmányt végeztek 797 észak-indiai prediabeteses nőn (akik közül 492 elhízott volt). Ebben a tanulmányban a kutatók arról számoltak be, hogy az életkor, az elhízás és a subcután zsírszövet (főleg törzsi) a leukocita telomér rövidülés fő okai. Még nem ismert, hogy a metformin hogyan befolyásolja az öregedéssel kapcsolatos géneket és az öregedés szurogát markereit az ázsiai indiai populációban.
Ez a klinikai vizsgálat célja a metformin kezelés hatásainak értékelése az öregedés szurogát markerére (leukocita telomér hossz és telomeráz aktivitás) prediabetes kontextusában. Szándékunkban áll a hat hónapos metformin kezelés összehasonlítása placebóval prediabeteses alanyokban. Értékelni fogjuk az öregedés szurogát markereit (leukocita telomér hossz és telomeráz aktivitás) és a hosszú élet génjeinek (SIRT1, p66Shc, p53 és mTOR) expresszióját perifériás vér mononukleáris sejtekben (PBMC) a hat hónapos metformin kezelés előtt és után.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Kutatási módszertan és eredményváltozók:
- Klinikai anamnézis és vizsgálat: Klinikai anamnézis és vérnyomás.
- Testtömegindex: A BMI a következő képlet alapján kerül kiszámításra: súly (kg) / magasság (m2).
- Antropometriai értékelés: Minden kerületmérés (derék, csípő, comb középső része, kar középső része és nyak) és bőrredőmérés (bicepsz, tricepsz, elülső hónalj, lapockaalatti, csípőcsont feletti, oldalsó mellkasi és comb) elvégzésre kerül. Az összes mérést háromszor ismételjük meg ugyanazon a helyen és körülmények között.
Testösszetétel: A testösszetételt többfrekvenciás bioelektromos impedancia segítségével mérik (MF-BIA; InBody 770, Cerritos, CA, USA) 2. látogatás (90. nap) 3. látogatás (180. nap) Megfelelőség-ellenőrzés Prediabeteses alanyok felvétele (BMI>25 kg/m2) (n=112) Vizsgálatok: Éhomi vércukorszint, csökkent glükóztolerancia (75 g-os glükózt terhelés utáni 2. órai érték) és HbA1c I. csoport: Metformin csoport (n=56) II. csoport: Placebo csoport (n=56) Végső elemzés Az 1. látogatáshoz hasonló mérések Alapvizsgálatok: Klinikai és táplálkozási profil, vérnyomás, antropometriai értékelések [testtömegindex, kerületek (derék, csípő, comb középső része, kar középső része és nyak) és bőrredők (bicepsz, tricepsz, lapockaalatti, csípőcsont feletti, comb, oldalsó mellkasi és lábikra)], testzsír, kézszorító izomerő, glikémiás és lipidprofil, egyéb metabolikus paraméterek, éhomi szérum inzulin, C-peptid és HOMA-IR, leukocita telomeráz hossz és telomeráz aktivitás, valamint a SIRT1, mTOR, p53, p66Shc gének génexpressziója.
Randomizálás: 1. látogatás (0. nap) Szűrés Diéta és testmozgás (kéthetes bevezető időszak) 5
- Kézszorító izomerő: Az ökölbiztonságot egy Jamar analóg kéz dinamométerrel mérik, a résztvevők ülő helyzetben, könyökükkel a test mellett, derékszögben hajlítva, semleges csuklóállásban, a dinamométer fogantyújának II-es helyzetében és a dinamométer alatti támasz biztosításával.
- Biokémiai mérések: A vérvétel 12 órás éjszakai éhség után történik, az alany az előző három napban normál táplálkozást folytatott. 75 g-os OGTT kerül végrehajtásra. A vérvétel a következőkre történik: vércukorszint, A1C, lipidek, éhomi inzulin, C-peptid, Homeostasis Model Assessment (HOMA) - inzulinrezisztencia (IR), valamint HOMA-Béta (ß%) és szérum glükagon szint.
- DNS izolálás és kvantifikálás: A DNS-t perifériás vér mononukleáris sejtekből izolálják a QIAamp DNS kit (Qiagen, Hilden, Németország) segítségével, és -20°C-on tárolják a későbbi kísérletekhez. A DNS izolálása után a DNS mintákat kvantifikálják és 50 ng/µL-re hígítják. A DNS koncentrációját és minőségét nanodrop (Nanodrop Technologies, Wilmington, NC, USA) segítségével mérik, és a vizsgálatba bevonandó mintáknak az optikai sűrűség aránya A 260/A280> 1,8 kell legyen. h) Leukocita telomérhossz mérése: A LTL-t kvantitatív polimeráz láncreakció (qPCR) alapú technikával elemzik, amely összehasonlítja a telomér ismétlődő szekvencia másolatszámát (T) egy referencia egyetlen másolatú gén másolatszámával (S). Az egyes minták telomérhosszát a telomér és az egyetlen másolatú gén arányának (T/S arány) segítségével becsülik meg a ΔCt [Ct (telomér)/Ct(egy gén)] kiszámításával. Az egyes minták (x) T/S arányát normalizálják a referencia minta átlagos T/S arányához [2-(ΔCtx-ΔCtr) = 2-ΔΔCt], amelyet a standard görbehez használnak, mind referencia mintaként, mind validációs mintaként.
i) Génexpresszió valós idejű PCR-vel: A teljes RNS-t egy RNeasy Mini Kit (QIAGEN) segítségével izolálják, a cDNS-t pedig egy iScript cDNS szintézis kit (Bio-Rad, USA) segítségével szintetizálják. A Q-PCR vizsgálatot egy Thermal Cyclerben (iCycler iQ5, Bio-Rad, Hercules, CA) hajtják végre. A Sirt1, p66Shc, p53 és mTOR primereket a GenBank adatbázisból származó szekvenciák alapján tervezik a Primer 3 (Whitehead Institute, Massachusetts, USA) és az Operon's Oligo szoftver (Operon, California, USA) segítségével, amelyeket az Eurofins MWG-től (Ebersberg, Németország) vásárolnak. A küszöbérték-ciklusok összehasonlító módszerét (ΔΔCq), amely a csoportok közötti küszöbérték-ciklus értékek különbségeit hasonlítja össze, alkalmazzák a génexpresszió relatív változásának meghatározására.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Fázis
- Nem alkalmazható
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
National Capital Territory of Delhi
-
New Delhi, National Capital Territory of Delhi, India, 110048
- Anoop misra
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
- Felnőtt
Egészséges önkénteseket fogad
Leírás
Bevételi kritériumok:
Életkor: 30-60 év Mindkét nem (férfi és nő)
Pre-diabetes diagnózisa, mely a következőképpen definiálható:
Sérült szűrési glükóz (IFG): Szűrési plazmaglükóz 100-125 mg/dL ÉS/VAGY Sérült glükóz tolerancia (IGT): 2 órás plazmaglükóz 140-199 mg/dL 75 g-os száj úton történő glükóz tolerancia teszt (OGTT) után
Az IGT kötelező (azaz minden résztvevőnek IGT-vel kell rendelkeznie, még akkor is, ha IFG is jelen van)
Kizárási kritériumok:
1-es típusú diabetes mellitus 2-es típusú diabetes mellitus Terhesség vagy szoptatás Hipoglikémia (vércukor <70 mg/dL) gyógyszer után Akut vagy krónikus gyulladásos betegségek Immunológiai betegségek (pl. autoimmun betegségek) Szervátültetés előzménye Jelenlegi vagy közelmúltbeli szteroid terápia Kontrollálatlan arteriális hypertonia Metforminhoz való ismert allergia vagy intolerancia Főbb műtét vagy kardiovaszkuláris események (pl. szívroham, agyvérzés) az elmúlt 3 hónapban
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Kezelés
- Kiosztás: Véletlenszerűsített
- Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
- Maszkolás: Hármas
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Kísérleti: placebo hat hónapig
Két hetes diéta- és edzésparancsot követő időszak után a résztvevők véletlenszerűen metformin (500 mg naponta kétszer étkezés után) vagy megfelelő placebó kerülnek hat hónapig.
Minden résztvevő havonta otthon fogja figyelni az éhgyomri és az étkezés utáni vércukorszintet (reggeli, ebéd, vacsora után) egy glükóméter segítségével.
Mindkét csoport napi naplót fog vezetni a tablettafogyasztásról és az esetleges kihagyott adagokról.
Minden látogatáskor három hónapra elegendő gyógyszerkészletet kapnak, a visszamaradt tabletták számlálásával értékelik a betartást.
|
Egy független statisztikus fog létrehozni egy számítógéppel generált randomizációs sorozatot egy korlátlan sémával. A kiosztást sorszámozott, lezárt, átlátszatlan borítékokban fogják elrejteni, amelyeket a tanulmányon kívüli irodai személyzet fog tartani. Egy kéthetes diéta- és edzésbevezető időszak után a résztvevők randomizált módon kapnak metformint (500 mg naponta kétszer) vagy placebót hat hónapon keresztül. A résztvevők havonta otthon fogják monitorozni az éhgyomri és étkezés utáni vércukorszintet. A gyógyszeradherenciát napi naplókon és háromhavi látogatásokon történő tablettaszámlálásokon keresztül fogják nyomon követni. A betartást (cél ≥85%) kéthetes telefonhívások (városi területeken), kéthavi otthonlátogatások egészségügyi dolgozók által (vidéki területeken) és háromhavi motivációs üléseken keresztül fogják fenntartani.
Más nevek:
|
|
Kísérleti: A metformin kezelés hatása a leukocita telomer hosszára
A T/S arány qPCR-rel történt analízise.
|
Egy független statisztikus fog létrehozni egy számítógéppel generált randomizációs sorozatot egy korlátlan sémával. A kiosztást sorszámozott, lezárt, átlátszatlan borítékokban fogják elrejteni, amelyeket a tanulmányon kívüli irodai személyzet fog tartani. Egy kéthetes diéta- és edzésbevezető időszak után a résztvevők randomizált módon kapnak metformint (500 mg naponta kétszer) vagy placebót hat hónapon keresztül. A résztvevők havonta otthon fogják monitorozni az éhgyomri és étkezés utáni vércukorszintet. A gyógyszeradherenciát napi naplókon és háromhavi látogatásokon történő tablettaszámlálásokon keresztül fogják nyomon követni. A betartást (cél ≥85%) kéthetes telefonhívások (városi területeken), kéthavi otthonlátogatások egészségügyi dolgozók által (vidéki területeken) és háromhavi motivációs üléseken keresztül fogják fenntartani.
Más nevek:
qPCR-rel elemezve T/S arányra.
|
|
Kísérleti: A metformin kezelés hatásának értékelése a telomeráz aktivitásra
A telomeráz aktivitást ELISA módszerrel határoztuk meg
|
Egy független statisztikus fog létrehozni egy számítógéppel generált randomizációs sorozatot egy korlátlan sémával. A kiosztást sorszámozott, lezárt, átlátszatlan borítékokban fogják elrejteni, amelyeket a tanulmányon kívüli irodai személyzet fog tartani. Egy kéthetes diéta- és edzésbevezető időszak után a résztvevők randomizált módon kapnak metformint (500 mg naponta kétszer) vagy placebót hat hónapon keresztül. A résztvevők havonta otthon fogják monitorozni az éhgyomri és étkezés utáni vércukorszintet. A gyógyszeradherenciát napi naplókon és háromhavi látogatásokon történő tablettaszámlálásokon keresztül fogják nyomon követni. A betartást (cél ≥85%) kéthetes telefonhívások (városi területeken), kéthavi otthonlátogatások egészségügyi dolgozók által (vidéki területeken) és háromhavi motivációs üléseken keresztül fogják fenntartani.
Más nevek:
|
|
Kísérleti: A hosszú élet génjeinek kifejeződése: SIRT1, p66Shc, p53 és mTOR
A kutatók értékelték a hosszú élet génjeinek (SIRT1, p66Shc, p53 és mTOR) expresszióját perifériás vér mononukleáris sejtjeiben (PBMC) a metformin kezelés előtt és 6 hónapos kezelés után.
|
Egy független statisztikus fog létrehozni egy számítógéppel generált randomizációs sorozatot egy korlátlan sémával. A kiosztást sorszámozott, lezárt, átlátszatlan borítékokban fogják elrejteni, amelyeket a tanulmányon kívüli irodai személyzet fog tartani. Egy kéthetes diéta- és edzésbevezető időszak után a résztvevők randomizált módon kapnak metformint (500 mg naponta kétszer) vagy placebót hat hónapon keresztül. A résztvevők havonta otthon fogják monitorozni az éhgyomri és étkezés utáni vércukorszintet. A gyógyszeradherenciát napi naplókon és háromhavi látogatásokon történő tablettaszámlálásokon keresztül fogják nyomon követni. A betartást (cél ≥85%) kéthetes telefonhívások (városi területeken), kéthavi otthonlátogatások egészségügyi dolgozók által (vidéki területeken) és háromhavi motivációs üléseken keresztül fogják fenntartani.
Más nevek:
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Leukocita-telomeráz hossza
Időkeret: 06 hónap
|
Leukocita-telomérhossz mérése: A LTL-t kvantitatív polimeráz láncreakció (qPCR) segítségével elemezték, a telomér ismétlődő szekvencia másolatszámát (T) egy referencia egyszeri másolatú génhez (S) hasonlítva.
A génkifejezés relatív többszörös változásait a komparatív küszöbciklus módszerrel (ΔΔCq) határozzák meg, a csoportok közötti küszöbciklus-értékek különbségeit összehasonlítva.
|
06 hónap
|
|
Telomeráz aktivitás
Időkeret: 06 hónap
|
A telomeráz aktivitást ELISA módszerrel végezték
|
06 hónap
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A hosszú élet génjeinek expressziója: SIRT1, p66Shc, p53 és mTOR
Időkeret: 6 HÓNAP
|
A teljes RNS-t a RNeasy Mini Kit (QIAGEN) segítségével nyerjük ki, majd a cDNA-t egy iScript cDNA szintézis készlettel (Bio-Rad, USA) szintetizáljuk.
A Q-PCR vizsgálatot egy Thermal Cyclerben (iCycler iQ5, Bio-Rad, Hercules, CA) végezzük.
A Sirt1, p66Shc, p53 és mTOR primerjeit a GenBank adatbázisból származó szekvenciák alapján tervezzük meg a Primer 3 (Whitehead Institute, Massachusetts, USA) és az Operon Oligo szoftver (Operon, Kalifornia, USA) segítségével, amelyeket az Eurofins MWG-től (Ebersberg, Németország) vásárolunk.
A relatív génexpresszió változás meghatározásához a komparatív küszöbciklus módszert (ΔΔCq) alkalmazzuk, amely a csoportok közötti küszöbciklus értékek különbségeit hasonlítja össze.
|
6 HÓNAP
|
Egyéb eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Súly
Időkeret: 06 hónap
|
A testsúlyt sztenderd súlymérő géppel mérték
|
06 hónap
|
|
Magasság
Időkeret: 06 hónap
|
A magasságot standard magasságmérővel mérték
|
06 hónap
|
|
Testtömegindex
Időkeret: 6 HÓNAP
|
BMI a testsúly kilogrammban (kg) kifejezett értékének és a testmagasság méterben (m2) kifejezett értékének négyzetével való elosztásával számítva.
|
6 HÓNAP
|
|
Kerületek
Időkeret: 06 hónap
|
A kerületek (derék, csípő, combközép, kar közép és nyak) mérése rugalmas, nem nyúló mérőszalaggal történt
|
06 hónap
|
|
Bőrredő-vastagság
Időkeret: 06 hónap
|
A bőrredők (bicepsz, tricepsz, szubszkapularis, szuprailikus, comb, laterális thoracalis és vádli) mérése bőrredőmérővel történt
|
06 hónap
|
|
Testösszetétel
Időkeret: 6 HÓNAP
|
Mérése MF-BIA (InBody 770, CA, USA) segítségével történt.
|
6 HÓNAP
|
|
Fogóerő izomerősség
Időkeret: 6 HÓNAP
|
Ellenőrizve egy Jamar Dinamométerrel, könyökök behajlítva.
|
6 HÓNAP
|
|
Éhgyomorra és 75g-os OGTT
Időkeret: 6 HÓNAP
|
Vért mintákat gyűjtöttek 12 órás éhgyomorra követően egy 75 g-os OGTT-hez, a glükóz elemzésére
|
6 HÓNAP
|
|
HAB1C
Időkeret: 06 hónap
|
Az A1C-t sztenderd laboratóriumban végezték
|
06 hónap
|
|
Lipidek
Időkeret: 06 hónap
|
A lipideket RANDOX készlettel mérték
|
06 hónap
|
|
Inzulin
Időkeret: 06 hónap
|
Szerum inzulin ELISA készlettel meghatározva
|
06 hónap
|
|
C-peptid
Időkeret: 06 hónap
|
C-peptid ELISA készletekkel meghatározva
|
06 hónap
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Tényleges)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- 2.5/FCDOC/EC/HAO/2022-23
Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)
Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .