Mastcelleaktiveringstest ved allergisk sykdom

Målet med denne studien er å vurdere om pasienter med alvorlige allergiske sykdommer viser høye nivåer av mastcelleaktivering som bestemt av den diagnostiske mastcelleaktiveringstesten etterforskerne har utviklet. De forventer at pasienter med en historie med alvorlige allergiske reaksjoner vil vise seg som høye respondere i den blodbaserte mastcelleaktiveringsdiagnostiske testen. Dessuten, ved å bruke mikroarray-analyse som tilnærming for genekspresjonsstudier, forventer de videre at genomiske biomarkører som er korrelert med den høye funksjonelle aktiveringen av in vitro-mastcellene avledet fra disse pasientene, lett kan identifiseres.

Omtrent 100 ml perifert veneblod fra individuelle pasienter vil trekkes inn i hepariniserte sprøyter og samles i en blodoppsamlingspose/rør som inneholder silika. Posen/røret vil bli behandlet umiddelbart for generering av primære humane mastcellekulturer ved å bruke protokollen som tidligere er utviklet [Inflammation Research 66: 25 (2017). Etter dyrking i 9 uker, vil de resulterende humane mastcellene analyseres for både deres funksjonelle aktivitet når det gjelder histaminfrigjøring som respons på aktiveringen av høyaffinitets immunoglobulin E (IgE) reseptorer i disse cellene og deres genekspresjonsprofiler ved bruk av mikroarray-analyse . In vitro funksjonelle og genomiske data vil bli korrelert med spesifikke diagnoser og målinger av blodprostaglandin D2 (PGD2), PGD2 metabolitter, tryptase og histaminnivåer i blod. For mediatoranalyser vil plasma fra hvert individ samles inn etter klyngen av differensieringspositiv 34 (CD34+) isolasjonstrinnet, og prøvene vil bli alikvotert og frosset ved -80 grader celsius for påfølgende analyse.