Mastzellaktivierungstest bei allergischen Erkrankungen

Ziel dieser Studie ist es, zu beurteilen, ob Patienten mit schweren allergischen Erkrankungen ein hohes Maß an Mastzellaktivierung aufweisen, wie durch den von den Forschern entwickelten diagnostischen Mastzellaktivierungstest festgestellt wurde. Sie gehen davon aus, dass Patienten mit schweren allergischen Reaktionen in der Anamnese im diagnostischen Test zur Mastzellaktivierung auf Blutbasis als High-Responder auftreten werden. Darüber hinaus gehen sie davon aus, dass durch die Verwendung von Microarray-Analysen als Ansatz für Genexpressionsstudien genomische Biomarker, die mit der hochfunktionellen Aktivierung der von diesen Patienten stammenden In-vitro-Mastzellen korrelieren, leicht identifiziert werden können.

Etwa 100 ml peripheres venöses Blut von einzelnen Patienten werden in heparinisierte Spritzen aufgezogen und in einem Silikat enthaltenden Blutsammelbeutel/-röhrchen gesammelt. Der Beutel/das Röhrchen wird umgehend für die Generierung primärer menschlicher Mastzellkulturen unter Verwendung des zuvor entwickelten Protokolls verarbeitet [Inflammation Research 66: 25 (2017). Nach 9-wöchiger Kultivierung werden die resultierenden menschlichen Mastzellen sowohl auf ihre funktionelle Aktivität in Bezug auf die Histaminfreisetzung als Reaktion auf die Aktivierung von hochaffinen Immunglobulin E (IgE)-Rezeptoren in diesen Zellen als auch auf ihre Genexpressionsprofile mittels Microarray-Analyse analysiert . Die funktionellen und genomischen In-vitro-Daten werden mit spezifischen Diagnosen und Messungen von Blutprostaglandin D2 (PGD2), PGD2-Metaboliten, Tryptase- und Histaminspiegeln im Blut korreliert. Für Mediator-Assays wird Plasma von jedem Probanden nach dem Isolationsschritt Cluster of Differentiation 34 Positive (CD34+) gesammelt und die Proben werden aliquotiert und bei -80 Grad Celsius für die nachfolgende Analyse eingefroren.