Koenzym Q10 tilskudd og utvikling av svangerskapsforgiftning

Denne forskningen vil bli utført i samarbeid mellom eksperimentell farmakologi og cellulær metabolisme ved det biomedisinske senteret i Central University of Ecuador og avdelingen for obstetrisk patologi på Gynecology and Obstetrics Hospital "Isidro Ayora" (HGOIA) i Quito, Ecuador. Det foreslås en beskrivende, prospektiv, dobbeltblind, randomisert og placebokontrollert eksperimentell studie for å identifisere årsak-virkning i stedet for effektiviteten av behandlingen der, etter godkjenning av Bioethics Committee (COBI) ved Biomedical Center samt Bioethics Committee av HGOIA, vil hver av de mulige kvinnene som skal inkluderes i studien, etter en nøye og detaljert forelesning og forklaring om målene og prosedyrene av en av forskerne bli invitert til å ta del i den og vil bli bedt om å synge det respektive informerte samtykket.

Siden svangerskapsforgiftning er en sykdom som spesielt rammer unge og primiparøse kvinner, og på grunn av at vi tidligere i flere studier fant en prevalens på 12 %, for å sikre en konfidens på 95 % og en styrke på 80 %, er det nødvendig å inkludere en totalt 190 kvinner (95 i hver arm), derfor er det planlagt å ekskludere totalt 200 gravide kvinner, primigravidae, yngre enn 25 år og uten historie med sykdommer relatert til kardiovaskulære, endokrine, metabolske eller reproduktive systemer, som var for tiden tilstede på poliklinikken ved HGOIA for graviditetskontroll før enn uke 20 av svangerskapet. De kvinnene med positive inklusjonskriterier og som aksepterte å delta i studien vil bli randomisert til en av behandlingsgruppene.

Fra hver av disse kvinnene vil det kliniske forskningsteamet få en obstetrisk, antropometrisk og klinisk journal i henhold til gjeldende forskrifter fra det ecuadorianske folkehelsedepartementet. Kvinner med hypertensjon i anamnesen, som for tiden har tatt noen form for medisin, eller som ikke ønsker å delta i studien, vil bli ekskludert. Alle inkluderte kvinner vil være under en detaljert prenatal kontroll hver 4. uke fra uke 20 av svangerskapet, dette vil inkludere svangerskapsalder, vekt, navlestrengsomkrets, livmorhøyde, fosterets hjertefrekvens og mors blodtrykk. Denne informasjonen vil bli samlet inn i den kliniske journalen til HGOIA og i en spesiell utpekt form som er nyttig for senere dataregistrering i en elektronisk database (Epi Info V6.04).

I tillegg vil det i hvert planbesøk bli tatt en urinprøve (for å kassere proteinuri), også en venøs blodprøve (10 ml) i hepariniserte rør vil bli tatt og umiddelbart transportert til det biomedisinske senteret for sentrifugering og plasmaisolering. Plasmaalikvoter på 500 ul vil fryses ved -80°C frem til analysen. Under hele denne prosessen vil prøvene bli beskyttet mot direkte lys med aluminiumsfolie og mot ekstreme temperaturer med en nedkjølt kolbe. Prøver mottatt ved det biomedisinske senteret vil kun identifiseres med en kode; derfor vil biokjemisk analyse også bli utført på en blind måte. I løpet av uke 20 vil alle kvinner bli tildelt (ved hjelp av en randomisert talltabell) til en av følgende grupper: a) intervensjonsgruppe, som vil motta to kapsler på 100 mg koenzym Q10 to ganger daglig frem til fødsel; eller b) kontrollgruppe, som vil motta to kapsler av den korrespondent placebo to ganger daglig frem til levering. Både aktive og placebo-kapsler vil bli produsert av samme leverandør (Jarrow Formulas, Los Angeles, CA, USA) for å garantere at vekt, størrelse, lukt og farge er like. De forskjellige flaskene for disse kvinnene vil bli tilberedt av et medlem av teamet som ikke er relatert til klinisk kontroll av kvinner, og en nøye kontroll av antall tabletter i hver flaske vil bli tatt for senere å analysere gjennomføringen av behandlingene. Blindkodene vil bli innhentet før intervensjonen startet og vil være hovedutforskerens ansvar frem til slutten av studien.

Absolutt alle kvinner som deltar i studien vil kjenne til all kontaktinformasjon til det kliniske teamet og vil få lov til å be om medisinsk behandling så ofte de trenger, uavhengig av etablerte obstetriske kontroller. I tillegg, som en del av studien, vil deres oppmerksomhet i HGOIA være obligatorisk. Svangerskapsforgiftningsdiagnose vil kun utføres av kliniske forskere og basert på et vedvarende høyt blodtrykk høyere enn 140/90 mmHg målt to ganger med pasienten uthvilt i minst 10 minutter og med kvikksølvsfygmomanometer to ganger (Riester, Tyskland) og proteinuri høyere enn 300 mg/24 timer eller to kryss i en diskstip med 3-24 timers mellomrom.

Koenzym Q10 og alfa-tokoferol vil bli målt ved hjelp av et høyytelses væskekromatografiutstyr (HPLC) og metoden tidligere beskrevet og validert av vår gruppe. Kort fortalt vil plasmaprøver bli behandlet i en HPLC utstyrt med en omvendt fase ODS-C18-kolonne (5 um, 150x4,6 mm) med sin respektive vaktkolonne (5 um, 10x4,6 mm). Mobil fase vil være metanol/etanol (40:60 v/v) tidligere filtrert og med en kontinuerlig strøm på 1ml/min. UV-detektoren vil bli satt opp til en bølgelengde på 275 nm. Prøver (0,5 ml) vil bli blandet med 0,5 ml natriumdodecylsulfat (SDS) ved 20 % og 50 ul CoQ9-løsning i etanol som intern standard. Senere vil det tilsettes 2 ml av en metanol/propanol-løsning (95:5 v/v) og vil vorterex kraftig i 30 sekunder, etter det vil 5 ml heksan tilsettes og vorterex igjen etter 60 sekunder. Organiske og vandige løsningsmidler vil bli separert ved sentrifugering ved lav hastighet (1000 g i 5 min). Fire og en halv ml av den organiske fasen vil bli overført til et annet hetteglass og dissekert under kontinuerlig nitrogenstrøm og deretter rekonstituert med etanol. Forberedte prøver vil umiddelbart analyseres og holdes hele tiden under is og beskyttet lys. Målinger vil bli utført i duplikat og gjennomsnittsverdier vil bli brukt for den statistiske analysen. Intra og inter assay variasjonskoeffisienter, samt gjenvinningsprosent vil bli beregnet for å sikre ensartethet av analysene. Totalt kolesterol samt lipoproteiner med lavt og høyt kolesterol vil også bli målt ved hjelp av et spektrofotometer.

Primært endepunkt vil være antall preeklampsi-tilfeller i hver gruppe, og alvorlighetsgraden av sykdommen og kvaliteten på det nyfødte (vekt, høyde, cephalic perimeter og svangerskapsalder ved fødsel).