Suplementación con coenzima Q10 y desarrollo de preeclampsia

Esta investigación se realizará en colaboración entre el Departamento de Farmacología Experimental y Metabolismo Celular del Centro Biomédico de la Universidad Central del Ecuador y el Departamento de Patología Obstétrica del Hospital de Ginecología y Obstetricia "Isidro Ayora" (HGOIA) de Quito, Ecuador. Se propone un estudio experimental descriptivo, prospectivo, doble ciego, aleatorizado y controlado con placebo para identificar causa-efecto más que efectividad del tratamiento en el que, previa aprobación del Comité de Bioética (COBI) del Centro Biomédico y del Comité de Bioética del HGOIA, cada una de las posibles mujeres a ser incluidas en el estudio, luego de una cuidadosa y detallada exposición y explicación de los objetivos y procedimientos por parte de una de las investigadoras, será invitada a participar del mismo y se le pedirá que cante el respectivo consentimiento informado.

Como la preeclampsia es una enfermedad que afecta especialmente a mujeres jóvenes y primíparas, y debido a que previamente en varios estudios encontramos una prevalencia del 12%, para asegurar una confianza del 95% y una potencia del 80%, es necesario incluir una total de 190 mujeres (95 en cada brazo), por lo que se prevé recluir a un total de 200 gestantes, primigrávidas, menores de 25 años y sin antecedentes de enfermedades relacionadas con el sistema cardiovascular, endocrino, metabólico ni reproductivo, que actualmente acudían a la consulta externa del HGOIA para control de embarazo antes de la semana 20 de gestación. Aquellas mujeres con criterios de inclusión positivos y que aceptaron participar en el estudio serán aleatorizadas a uno de los grupos de tratamiento.

De cada una de esas mujeres el equipo de investigación clínica obtendrá una ficha clínica, obstétrica y antropométrica siguiendo las normas vigentes del Ministerio de Salud Pública del Ecuador. Serán excluidas las mujeres con antecedentes de hipertensión arterial, que actualmente toman algún tipo de medicación o que no deseen participar en el estudio. Todas las mujeres incluidas tendrán un control prenatal detallado cada 4 semanas a partir de la semana 20 de gestación, este incluirá edad gestacional, peso, perímetro umbilical, altura uterina, frecuencia cardiaca fetal y presión arterial materna. Esta información se recopilará en la historia clínica del HGOIA y en un formulario especial designado útil para la posterior entrada de datos en una base de datos electrónica (Epi Info V6.04).

Además, en cada visita programada se realizará un análisis de orina (para descartar proteinuria), también se tomará una muestra de sangre venosa (10 ml) en tubos heparinizados y se transportará inmediatamente al Centro Biomédico para su centrifugación y aislamiento del plasma. Se congelarán alícuotas de plasma de 500 ul a -80°C hasta el momento del análisis. Durante todo este proceso las muestras se protegerán de la luz directa con papel de aluminio y de las temperaturas extremas con un matraz refrigerado. Las muestras recibidas en el Centro Biomédico serán identificadas únicamente con un código; por lo tanto, el análisis bioquímico también se realizará de forma ciega. Durante la semana 20, todas las mujeres serán asignadas (mediante una tabla de números aleatorios) a uno de los siguientes grupos: a) grupo de intervención, que recibirá dos cápsulas de 100 mg de coenzima Q10 dos veces al día hasta el parto; o b) grupo control, que recibirá dos cápsulas del placebo correspondiente dos veces al día hasta el parto. Tanto las cápsulas activas como las de placebo serán fabricadas por el mismo proveedor (Jarrow Formulas, Los Ángeles, CA, EE. UU.) para garantizar que el peso, el tamaño, el olor y el color sean similares. Los diferentes frascos para aquellas mujeres serán preparados por un miembro del equipo no relacionado con el control clínico de mujeres, y se llevará un control cuidadoso del número de comprimidos de cada frasco para luego analizar la realización de los tratamientos. Los códigos ciegos se obtendrán antes del inicio de la intervención y serán responsabilidad del investigador principal hasta el final del estudio.

Absolutamente todas las mujeres que participen en el estudio conocerán todos los datos de contacto del equipo clínico y podrán solicitar atención médica con la frecuencia que necesiten, independientemente de establecer controles obstétricos. Además, como parte del estudio será obligatoria su atención en el HGOIA. El diagnóstico de preeclampsia será realizado únicamente por investigadores clínicos y se basará en una presión arterial alta persistente superior a 140/90 mmHg medida dos veces con la paciente en reposo durante al menos 10 minutos y con un esfigmomanómetro de mercurio dos veces (Riester, Alemania) y proteinuria superior de 300 mg/24 horas o dos cruces en un diskstip con 3-24 horas de diferencia.

La coenzima Q10 y el alfa tocoferol se medirán mediante un equipo de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y el método previamente descrito y validado por nuestro grupo. En resumen, las muestras de plasma serán procesadas en un HPLC equipado con una columna ODS-C18 de fase inversa (5 um, 150x4,6 mm) con su respectiva precolumna (5 um, 10x4,6 mm). La fase móvil será metanol/etanol (40:60 v/v) previamente filtrada y con un flujo continuo de 1ml/min. El detector UV se configurará a una longitud de onda de 275 nm. Las muestras (0,5 ml) se mezclarán con 0,5 ml de dodecilsulfato de sodio (SDS) al 20% y 50 ul de solución de CoQ9 en etanol como patrón interno. Posteriormente se agregarán 2 ml de una solución de metanol/propanol (95:5 v/v) y se agitará vigorosamente por 30 segundos, luego se agregarán 5 ml de hexano y se agitará nuevamente por 60 segundos. Los disolventes orgánicos y acuosos se separarán por centrifugación a baja velocidad (1000 g por 5 min). Se transferirán cuatro ml y medio de la fase orgánica a otro vial y se disecarán bajo flujo continuo de nitrógeno y luego se reconstituirán con etanol. Las muestras preparadas serán inmediatamente analizadas y mantenidas todo el tiempo bajo hielo y protegidas de la luz. Las mediciones se realizarán por duplicado y los valores promedio se utilizarán para el análisis estadístico. Se calcularán los coeficientes de variación intraensayo e interensayo, así como el porcentaje de recuperación para garantizar la uniformidad de los ensayos. Además, el colesterol total, así como las lipoproteínas de colesterol bajo y alto se medirán utilizando un espectrofotómetro.

El punto final primario será el número de casos de preeclampsia en cada grupo, y la gravedad de la enfermedad y la calidad del recién nacido (peso, talla, perímetro cefálico y edad gestacional al nacer).