Co-enzym Q10-suppletie en ontwikkeling van pre-eclampsie

Dit onderzoek zal worden uitgevoerd in samenwerking tussen de Experimentele Farmacologie en Cellulair Metabolisme van het Biomedisch Centrum van de Centrale Universiteit van Ecuador en de Afdeling Obstetrische Pathologie in het Gynaecologie en Verloskunde Ziekenhuis "Isidro Ayora" (HGOIA) in Quito, Ecuador. Er wordt een beschrijvende, prospectieve, dubbelblinde, gerandomiseerde en placebogecontroleerde experimentele studie voorgesteld om oorzaak-gevolg te identificeren in plaats van effectiviteit van de behandeling waarin, na goedkeuring van de Bio-ethische Commissie (COBI) van het Biomedisch Centrum evenals de Bio-ethische Commissie van de HGOIA, wordt elk van de mogelijke vrouwen die in het onderzoek worden opgenomen, na een zorgvuldige en gedetailleerde lezing en uitleg over de doelstellingen en procedures door een van de onderzoekers uitgenodigd om eraan deel te nemen en wordt gevraagd om te zingen de respectieve geïnformeerde toestemming.

Aangezien pre-eclampsie een ziekte is die vooral jonge en primiparae vrouwen treft, en omdat we eerder in verschillende studies een prevalentie van 12% vonden, is het noodzakelijk om een ​​betrouwbaarheid van 95% en een power van 80% te garanderen. in totaal 190 vrouwen (95 in elke arm), daarom is het de bedoeling om in totaal 200 zwangere vrouwen, primigravidae, jonger dan 25 jaar en zonder voorgeschiedenis van ziekten die verband houden met het cardiovasculaire, endocriene, metabolische of voortplantingsstelsel, die momenteel vóór week 20 van de zwangerschap naar de polikliniek van de HGOIA gingen voor zwangerschapscontrole. Die vrouwen met positieve inclusiecriteria en die accepteerden om deel te nemen aan het onderzoek, zullen worden gerandomiseerd naar een van de behandelingsgroepen.

Van elk van deze vrouwen zal het klinische onderzoeksteam een ​​verloskundig, antropometrisch en klinisch dossier verkrijgen volgens de huidige voorschriften van het Ecuadoraanse Ministerie van Volksgezondheid. Vrouwen met een voorgeschiedenis van hypertensie, die momenteel medicijnen gebruiken of die niet aan het onderzoek willen deelnemen, worden uitgesloten. Alle geïncludeerde vrouwen zullen vanaf week 20 van de zwangerschap elke 4 weken onder een gedetailleerde prenatale controle staan, dit omvat zwangerschapsduur, gewicht, navelstrengomtrek, hoogte van de baarmoeder, foetale hartfrequentie en maternale bloeddruk. Deze informatie zal worden verzameld in het klinische dossier van de HGOIA en in een speciaal daarvoor bestemde vorm die nuttig is voor latere gegevensinvoer in een elektronische database (Epi Info V6.04).

Bovendien zal bij elk gepland bezoek een urinetest worden gedaan (om proteïnurie weg te nemen), ook zal een veneus bloedmonster (10 ml) in gehepariniseerde buisjes worden genomen en onmiddellijk naar het Biomedisch Centrum worden vervoerd voor centrifugatie en plasma-isolatie. Plasma-aliquots van 500 µl worden tot aan de analyse bij -80°C ingevroren. Tijdens dit hele proces worden monsters beschermd tegen direct licht met aluminiumfolie en tegen extreme temperaturen met een gekoelde kolf. Monsters die in het Biomedisch Centrum worden ontvangen, worden alleen geïdentificeerd met een code; daarom zal biochemische analyse ook op een blinde manier worden uitgevoerd. In week 20 worden alle vrouwen (met behulp van een tabel met gerandomiseerde getallen) toegewezen aan een van de volgende groepen: a) interventiegroep, die twee capsules van 100 mg co-enzym Q10 tweemaal daags krijgt tot aan de bevalling; of b) controlegroep, die tweemaal daags twee capsules van de overeenkomstige placebo krijgt tot aan de bevalling. Zowel de actieve capsules als de placebocapsules worden vervaardigd door dezelfde leverancier (Jarrow Formulas, Los Angeles, CA, VS) om te garanderen dat gewicht, grootte, geur en kleur vergelijkbaar zijn. De verschillende flessen voor die vrouwen zullen worden bereid door een lid van het team dat niet gerelateerd is aan de klinische controle van vrouwen, en er zal een zorgvuldige controle van het aantal tabletten in elke fles worden uitgevoerd om later de voltooiing van de behandelingen te analyseren. De blinde codes worden verkregen voordat de interventie begint en vallen tot het einde van het onderzoek onder de verantwoordelijkheid van de hoofdonderzoeker.

Absoluut alle vrouwen die aan het onderzoek deelnemen, zullen alle contactgegevens van het klinische team kennen en mogen zo vaak medische zorg aanvragen als ze nodig hebben, onafhankelijk van het instellen van verloskundige controles. Bovendien zal hun aandacht in de HGOIA als onderdeel van het onderzoek verplicht zijn. De diagnose pre-eclampsie wordt alleen uitgevoerd door klinische onderzoekers en is gebaseerd op een aanhoudende hoge bloeddruk hoger dan 140/90 mmHg tweemaal gemeten met de patiënt gedurende ten minste 10 minuten rust en met een kwikbloeddrukmeter tweemaal (Riester, Duitsland) en proteïnurie hoger dan 300 mg/24 uur of twee kruisjes in een schijfstip met een tussenpoos van 3-24 uur.

Co-enzym Q10 en alfa-tocoferol zullen worden gemeten met behulp van een hoogwaardige vloeistofchromatografie-apparatuur (HPLC) en de eerder beschreven en gevalideerde methode door onze groep. Kortom, plasmamonsters zullen worden verwerkt in een HPLC die is uitgerust met een ODS-C18-kolom met omgekeerde fase (5 um, 150x4,6 mm) met de bijbehorende bewakingskolom (5 um, 10x4,6 mm). De mobiele fase is methanol/ethanol (40:60 v/v), vooraf gefilterd en met een continue stroom van 1 ml/min. De UV-detector wordt ingesteld op een golflengte van 275 nm. Monsters (0,5 ml) worden gemengd met 0,5 ml natriumdodecylsulfaat (SDS) 20% en 50 µl CoQ9-oplossing in ethanol als interne standaard. Later wordt 2 ml van een methanol/propanol-oplossing (95:5 v/v) toegevoegd en wordt krachtig gevorterex gedurende 30 seconden, daarna wordt 5 ml hexaan toegevoegd en opnieuw vorterex gedurende 60 seconden. Organische en waterige oplosmiddelen worden gescheiden door centrifugatie bij lage snelheid (1000 g per 5 min). Vier en een halve ml van de organische fase wordt overgebracht naar een ander flesje en onder een continue stikstofstroom gedisseceerd en vervolgens gereconstitueerd met ethanol. Bereide monsters worden onmiddellijk geanalyseerd en de hele tijd onder ijs en beschermd tegen licht bewaard. Metingen worden in tweevoud uitgevoerd en gemiddelde waarden worden gebruikt voor de statistische analyse. Variatiecoëfficiënten binnen en tussen assays, evenals het herstelpercentage, worden berekend om de uniformiteit van de assays te waarborgen. Ook het totale cholesterolgehalte, evenals lipoproteïnen met een laag en hoog cholesterolgehalte zullen worden gemeten met behulp van een spectrofotometer.

Het primaire eindpunt is het aantal gevallen van pre-eclampsie in elke groep en de ernst van de ziekte en kwaliteit van de pasgeborene (gewicht, lengte, hoofdomtrek en zwangerschapsduur bij de geboorte).