Rola czynników angiogennych w rozwoju zespołu wątrobowo-nerkowego

Dysfunkcja nerek u pacjentów, którzy również cierpią na schyłkową chorobę wątroby, wiąże się ze zwiększoną chorobowością i śmiertelnością w porównaniu z pacjentami cierpiącymi tylko na choroby wątroby. Jeśli u pacjenta z marskością wątroby i wodobrzuszem rozwinie się jawna niewydolność nerek, mediana czasu przeżycia od początku niewydolności nerek wynosi około 2 tygodni. Dysfunkcja nerek może być przejściowa, wtórna do gromadzenia się krwi w loży trzewnej iw konsekwencji do zmniejszenia przepływu krwi przez nerki. W takim przypadku przeszczep wątroby i przywrócenie prawidłowych wzorców krążenia spowoduje powrót prawidłowej czynności nerek.

Obecnie nie ma testu diagnostycznego pozwalającego na rozróżnienie przejściowej i trwałej dysfunkcji nerek w obecności schyłkowej niewydolności wątroby. W rezultacie liczba łączonych przeszczepów wątroby i nerek stale rośnie. Nieco ponad 20% (8 z 38) przeszczepów wątroby wykonanych przez naszą służbę w 2004 roku to przeszczepy połączone wątrobowo-nerkowe. Podwójna procedura wydłuża czas ekspozycji na znieczulenie i czas operacji, a obecność przeszczepionej nerki może wymagać zwiększonej immunosupresji w porównaniu z przeszczepem samej wątroby.

Planujemy zbadać rolę czynników angiogennych w nieprawidłowych wzorcach przepływu krwi, o których wiadomo, że są związane z zespołem wątrobowo-nerkowym.

Analiza próbki: Poziomy krążących cytokin i czynników wzrostu zostaną zmierzone przy użyciu dostępnych w handlu testów ELISA. Metaloproteiny macierzy będą mierzone metodą elektroforezy ilościowej.

Ekspresja A20 zostanie określona przez ekstrakcję całkowitego RNA z pełnej krwi przy użyciu Trizolu i przeprowadzona standardową metodologią Northern blot. RNA będzie hybrydyzował z sondami A20 wyznakowanymi [³²P]-dATP i dehydrogenazą gliceraldehydo-3-fosforanową (GAPDH) lub sondami β-aktyny, aby skorygować nierównomierne obciążenie. Podobna ekstrakcja RNA zostanie przeprowadzona na tkance wątroby uzyskanej podczas operacji. Ekstrakt zostanie poddany analizie mikromacierzy w celu zidentyfikowania konkretnych genów, które mogą być zaangażowane w patogenezę HRS.

Wyniki analiz laboratoryjnych zostaną skorelowane z parametrami klinicznymi i zostaną podjęte próby identyfikacji specyficznych cytokin lub genów regulowanych w górę o poszczególnych fazach lub stopniu lub dysfunkcji nerek u pacjentów z chorobami wątroby. Podobne analizy zostaną przeprowadzone u pacjentów z innymi typami chorób wątroby.