Ruolo dei fattori angiogenici nello sviluppo della sindrome epatorenale

La disfunzione renale nei pazienti che soffrono anche di malattia epatica allo stadio terminale è associata a un aumento della morbilità e della mortalità rispetto ai pazienti che soffrono solo di malattia epatica. Se in un paziente con cirrosi e ascite si sviluppa un'insufficienza renale franca, il tempo mediano di sopravvivenza dall'insorgenza dell'insufficienza renale è di circa 2 settimane. La disfunzione renale può essere transitoria, secondaria all'accumulo di sangue nel letto splancnico e alla conseguente riduzione del flusso ematico renale. In questo caso, il trapianto di fegato e il ripristino dei normali schemi circolatori comporteranno il ritorno alla normale funzione renale.

Attualmente, non esiste un test diagnostico per distinguere tra disfunzione renale temporanea e permanente in presenza di malattia epatica allo stadio terminale. Di conseguenza, il numero di trapianti combinati fegato-rene è costantemente aumentato. Poco più del 20% (8 su 38) dei trapianti di fegato eseguiti dal nostro servizio nel 2004 sono stati trapianti combinati fegato-rene. La doppia procedura aumenta la durata dell'esposizione all'anestesia e il tempo chirurgico e la presenza del rene trapiantato può richiedere una maggiore immunosoppressione rispetto a un trapianto di solo fegato.

Intendiamo esaminare il ruolo dei fattori angiogenici nei modelli anomali del flusso sanguigno noti per essere associati alla sindrome epatorenale.

Analisi dei campioni: i livelli circolanti di citochine e fattori di crescita saranno misurati utilizzando ELISA disponibili in commercio. Le metalloproteine ​​della matrice saranno misurate mediante elettroforesi quantitativa.

L'espressione di A20 sarà determinata mediante estrazione dell'RNA totale da sangue intero usando Trizol e eseguita con la metodologia standard Northern blot. L'RNA verrà ibridato con sonde A20 marcate con [³²P]-dATP e sonde di gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH) o β-actina per correggere il carico non uniforme. Analoga estrazione di RNA verrà eseguita su tessuto epatico ottenuto al momento dell'intervento chirurgico. L'analisi di microarray sarà eseguita sull'estratto per identificare geni specifici che potrebbero essere coinvolti nella patogenesi dell'HRS.

I risultati delle analisi di laboratorio saranno correlati con i parametri clinici e si cercherà di identificare specifiche citochine o geni up-regolati con particolari fasi o grado o disfunzione renale in pazienti con malattia epatica. Analisi simili saranno eseguite in pazienti con altri tipi di malattie epatiche.