Zastosowanie syntetycznej makrocząsteczki (hydroksypropylocelulozy) i trehalozy jako dodatków do witryfikacji oocytów

Zeszklenie polega na przekształceniu roztworu wodnego w bardzo lepką substancję stałą, unikając tworzenia się lodu. Aby to osiągnąć, protokoły witryfikacji obejmują wysokie stężenia krioprotektantów rozpuszczonych w podłożu podstawowym uzupełnionym surowicą bogatą w białko. Tradycyjnie dostępne preparaty zawierają ludzką albuminę (HSA). Najczęściej stosowanym roztworem do witryfikacji jest syntetyczna surowica zastępcza (SSS) składająca się z syntetycznych glikoporotein i HSA. Zastąpienie albuminy ludzkiej innymi w pełni syntetycznymi składnikami umożliwia zgodność z europejskimi dyrektywami dotyczącymi klasyfikacji wyrobów medycznych klasy III zgodnie z Podręcznikiem klasyfikacji wyrobów medycznych w ramach regulacyjnych Wspólnoty Europejskiej, dzięki czemu nośniki te posiadają europejską Oznakowanie zgodności CE (dyrektywa 93/42/EWG). Zgodnie z przepisami europejskimi wyroby medyczne klasy III podlegają szczególnemu nadzorowi i wymagają egzaminu certyfikującego lub badania typu projektu przez jednostkę notyfikowaną. Nośniki komercyjne dostarczone przez firmę Kitazato Supplies ® (Tokio, Japonia) do wykorzystania w tym badaniu zostały poddane całemu procesowi oceny i certyfikacji przez jednostkę notyfikowaną BSI0086. Ze względu na właściwości fizyczne hydroksypropylocelulozy (HPC), w pełni syntetycznej makrocząsteczki, w tym zdolność do tworzenia lepkiego żelu w niskich temperaturach, makrocząsteczka ta została zaproponowana jako substytut albuminy pochodzenia ludzkiego (HSA). Kolejnym niezbędnym składnikiem pożywek witryfikacyjnych jest sacharoza, która działa jako czynnik osmotyczny. Trehaloza, disacharyd występujący w przyrodzie, jest wykorzystywany przez niektóre gatunki do przetrwania w ekstremalnych warunkach, będąc w stanie pozostać zeszklonym przez lata. Cukier ten był również wcześniej stosowany w kriobiologii w niektórych protokołach witryfikacji. Przetestowaliśmy HPC i trehalozę pod kątem witryfikacji oocytów w badaniu pilotażowym, wykazując, że nie wpływa to na pogorszenie wskaźników przeżywalności, rozwoju zarodka i wskaźników ciąż. Obecne badanie jest prospektywnym randomizowanym badaniem mającym na celu ocenę wyników cykli dawstwa komórek jajowych przeprowadzonych z zeszklonymi oocytami przy użyciu HPC i trehalozy w porównaniu z oocytami zeszklonymi przy użyciu tradycyjnych dostępnych roztworów zawierających HAS i sacharozę.