Skuteczność i bezpieczeństwo lipotransferu wspomaganego komórkami w leczeniu wysiłkowego nietrzymania moczu

Pozyskiwanie tkanki tłuszczowej. Pacjenci zostaną poddani liposukcji w znieczuleniu miejscowym. W tej procedurze roztwór Ringera ze znieczulającą lidokainą i adrenaliną zwężającą naczynia krwionośne podaje się do przedziału tłuszczowego, aby zminimalizować utratę krwi i zanieczyszczenie tkanki przez komórki krwi obwodowej. Po 15 minutach wprowadzano do przestrzeni podskórnej przez małe (0,5 cm) nacięcie wydrążoną, tępo zakończoną kaniulę 3 mm. Kaniula przymocowana do strzykawki i pod delikatnym zasysaniem przesuwała się przez przedział tłuszczowy, mechanicznie rozrywając tkankę tłuszczową. Objętość zasysania - około 150 cm3. Czas zabiegu - 30 minut.

Izolacja ADRC. Pobraną tkankę tłuszczową umieszczono w sterylnych probówkach z pożywką transportową i dostarczono do laboratorium w ciągu 15 minut. Aby wyizolować ADRC, część lipoaspiratu (około 100 cm3) intensywnie przemyto równymi objętościami soli fizjologicznej buforowanej fosforanami i trawiono kolagenazą. Po neutralizacji aktywności enzymu rozłożona tkanka tłuszczowa została wyeliminowana, a ADRC przemyty 3-krotnie solą fizjologiczną. Komórki podzielone na 3 porcje. Pierwsza porcja stosowana do liczenia, oceny żywotności i sterylności. Druga porcja przygotowana do zamrożenia w ciekłym azocie. Trzecia porcja zmieszana z mikroprzeszczepem tłuszczu.

Preparat mikroprzeszczepu wzbogacony w tkankę tłuszczową. Uzyskaną tkankę tłuszczową (około 20-30 cm3) przemywa się wielokrotnie. Zasysany tłuszcz osadzał się w strzykawkach ustawionych w pozycji pionowej, po czym eliminowano tę płynną frakcję. Strzykawki z tłuszczem napełnić roztworem Ringera i powtórzyć zabieg osadzania 3-5 razy. Umyty tłuszcz umieszcza się na metalowej siatce i rozciera za pomocą metalowej szpatułki. Zhomogenizowany tłuszcz zmieszano z przygotowanym ADRC i zebrano do strzykawki do dalszego wstrzyknięcia. Stosunek mikroprzeszczepu tłuszczu do tłuszczu dla ADRC oszacowany na podstawie objętości aspiratu i zwykle wynosi 1:10. Na przykład ADRC uzyskany ze 100 cm3 tkanki tłuszczowej należy zmieszać z 10 cm3 mikroprzeszczepu tłuszczu.

Przygotowanie mikroprzeszczepu tłuszczu jest również możliwe w Puregraft System (Cytori Therapeutics Inc) - zamkniętym jednorazowym systemie do selektywnego płukania tkanki tłuszczowej.

Okołocewkowe wstrzyknięcie mikroprzeszczepu tłuszczowego wzbogaconego w ADRC Cewkę moczową nakłuto kilkakrotnie okrężnie w obszarze bulwiasto-błoniastym na głębokość 5 mm pod kontrolą endoskopową i każdorazowo wstrzyknięto 0,5-1 ml mikroprzeszczepu tłuszczowego wzbogaconego w ADRC. Całkowita objętość wstrzykniętego roztworu - około 8 ml. Po wstrzyknięciu mikroprzeszczepu tłuszczu cewnik cewkowy z balonem umieszczono i usunięto następnego dnia.