Odzyskiwanie i żywotność krwinek czerwonych z przechowywanych jednostek krwi o obniżonej zawartości patogenów (BIO-CR-RBC)

Każdy pacjent otrzyma jednocześnie jedną infuzję autologicznych, radioznakowanych i znakowanych BioRBC krwinek czerwonych INTERCEPT (testowe krwinki czerwone) oraz jedną infuzję autologicznych, nietraktowanych krwinek czerwonych znakowanych BioRBC (kontrolne krwinki czerwone). Każda infuzja będzie obejmowała około 20 ml, tj. 10 ml krwinek czerwonych znakowanych 51-chromem i 10 ml BioRBC-6 lub BioRBC-18, które zostaną podzielone na warstwy, jak wskazano powyżej, w oparciu o oznaczenie testu lub kontroli.

Przestrzeganie zaleceń dotyczących leczenia Do badania zostaną włączeni zdrowi uczestnicy, którzy rozumieją zobowiązania do udziału w badaniu i podpisują świadomą zgodę. Zgodność leczenia i badania kontrolne będą śledzone przez Badacza, rejestrowane w formularzu opisu przypadku (CRF) i monitorowane przez Sponsora.

OCENA SKUTECZNOŚCI

Parametry skuteczności

Punkty końcowe skuteczności obejmują:

Główny punkt końcowy skuteczności(24)

- 24 godziny po infuzji odzyskiwanie autologicznych erytrocytów przechowywanych w AS-5 przez 35 dni, a następnie znakowanych 51Cr lub biotyną.

Drugorzędowe punkty końcowe skuteczności(25)

• Średnia długość życia autologicznych krwinek czerwonych przechowywanych przez 35 dni, a następnie znakowanych 51Cr lub biotyną
• Średnia długość życia (T50) autologicznych krwinek czerwonych przechowywanych przez 35 dni, a następnie znakowanych 51Cr lub biotyną

• Pole pod krzywą (AUC) określone na podstawie punktów danych zebranych dla długości życia RBC autologicznych, radioznakowanych lub BioRBC

  e) Określenie dawki i czasu trwania

Metody i czas określania parametrów skuteczności Badanie to składa się z pojedynczego okresu leczenia, w którym podawana jest biotynylowana kontrola (przy użyciu gęstości powierzchniowej RBC wynoszącej 6 lub 18 mcg sulfo-NHS-biotyny na ml RBC), tj. współinfuzja w jednym punkcie w czasie z biotynylowanymi RBC traktowanymi Testem INTERCEPT (przy użyciu stężenia 18 lub 6 µg sulfo-NHS-biotyny na ml RBC) i erytrocytami czerwonymi traktowanymi INTERCEPT, znakowanymi radioaktywnie (51Cr). Wszystkich 6 osobników otrzyma jednocześnie zarówno kontrolne, jak i te traktowane S-303 (testowe) RBC, a jedyną różnicą między dwoma zestawami 3 osobników będzie poziom biotynylacji kontrolnych lub testowych RBC.

Badanie jest stratyfikowane, a kontrolne lub testowe krwinki czerwone będą znakowane alternatywnie 6 lub 18 mcg sulfo-NHS-biotyny na ml krwinek czerwonych. RBC od trzech osób (osoby 1, 3 i 5) zostaną oznaczone 6 i 18 mcg sulfo-NHS-biotyny na ml RBC odpowiednio dla kontroli i testu RBC. Pozostałe trzy osoby (osoby 2, 4 i 6) zostaną oznaczone 6 i 18 mcg sulfo-NHS-biotyny na ml RBC odpowiednio dla kontroli i testu RBC. Celem tego rozwarstwienia jest upewnienie się, że gęstość znacznika biotyny nie zostanie wprowadzona do jednego z ramion badania.

f) Opis obserwacji i pomiarów

W dniu 0 każdego okresu leczenia pacjent odda dwie jednostki zapakowanych krwinek czerwonych (zautomatyzowane dawkowanie podwójnych krwinek czerwonych, system aferezy BCT Trima - Terumo); jednostkami będą leukocyty zredukowane przez filtrację w linii, a koncentraty krwinek czerwonych zostaną przygotowane w roztworze dodatku (AS-5).

Jedno z dwóch urządzeń będzie natychmiast przechowywane w temperaturze 1-6ºC przez 35 dni (jednostka sterująca). Ten konwencjonalny składnik RBC reprezentuje kontrolne RBC w tym badaniu.

Jednostka testowa RBC zostanie przygotowana poprzez obróbkę przy użyciu systemu INTERCEPT Blood System for Red Blood Cells. Parametry biochemiczne i morfologiczne in vitro składników badanych krwinek czerwonych (tabela 1) zostaną zmierzone w dniu 0 po przygotowaniu koncentratów krwinek czerwonych w AS-5 (przed poddaniem badanemu leczeniu), po obróbce i przed przechowywaniem (tylko test) i ponownie w dniu 35 (przed ponownym podaniem infuzji uczestnikom badania) w celu oceny jakości RBC przetworzonych/przechowanych jednostek RBC. Dane zebrane dla charakterystyki in vitro zostaną podsumowane za pomocą statystyki opisowej.

Tabela 1. Parametry biochemiczne analizowane w dniu 0 i 35 dnia przechowywania kontrolnych i traktowanych jednostek RBC.

Parametr Zawartość Hb/jednostka Hemoliza pH pO2 pCO2 Glukoza (zewnątrzkomórkowa) Mleczan (zewnątrzkomórkowy) Wodorowęglan (zewnątrzkomórkowy) Sód (zewnątrzkomórkowy) Potas (zewnątrzkomórkowy)

W 35. dniu przechowywania krwinek czerwonych w każdym okresie leczenia podwielokrotność kontrolnych krwinek czerwonych będzie biotynylowana (6 lub 18 μg/ml). Z jednostki testowej zostaną pobrane dwie porcje; pierwsza porcja będzie znakowana radioaktywnie 51Cr, a druga porcja będzie biotynylowana w stężeniu 6 lub 18 mcg/ml. Ponowna infuzja dwóch biotynylowanych autologicznych próbek krwinek czerwonych (kontrola i test) wraz z autologicznymi krwinkami czerwonymi znakowanymi 51Cr (badanie) pozwoli zmierzyć powrót do zdrowia i przeżycie (łącznie w przybliżeniu: 20 mcCi). Również w dniu 35 od pacjenta zostanie pobrana próbka świeżej krwi o objętości 20 ml, a krwinki czerwone znakowane 99mTc i Bio-54. Ponowna infuzja świeżego 99mTc RBC i świeżego Bio-54 pozwoli na określenie objętości krwi pacjenta lub liczby krążących RBC.

Zostanie zmieszanych i podanych w infuzji pięć rodzajów krwinek czerwonych: a) świeże krwinki czerwone znakowane 99mTc i BioRBC-54; b) świeże krwinki czerwone znakowane Bio-54; c) Przechowywane, kontrolne lub testowe RBC biotynylowane przy gęstości 6 mcg/ml; d) Przechowywane, testowe lub kontrolne RBC biotynylowane przy gęstości 18 mcg/ml; oraz e) Przechowywane, Testowane, RBC znakowane 51Cr. Wszystkie porcje będą etykietowane oddzielnie i mieszane do objętości ~50 ml. 50 ml autologicznych erytrocytów zostanie podane przez żyłę obwodową za pomocą igły motylkowej o rozmiarze 18-19 (przy przybliżonej szybkości 5 ml/min).

Próbki krwi z przeciwległego ramienia pacjenta zostaną pobrane bezpośrednio przed infuzją oraz po 5, 7,5, 10, 12,5, 15, 20, 30 minutach i 24 godzinach po zakończeniu infuzji, aby umożliwić ekstrapolację do T=0 w celu oznaczenia 51Cr objętości krwi, jak wcześniej opublikowano przez naszą grupę (16, 17, 26-30).

Dodatkowe próbki krwi będą pobierane po 48 i 72 godzinach i 7 dniach po infuzji, a następnie co tydzień przez 28 dni (dni 37, 38, 42, 49, 56 i 63 po infuzji) i od tego momentu co dwa tygodnie (dni 77, 91, 105, 119, 133, 147). Po pobraniu końcowej próbki krwi w 2. okresie leczenia uczestnicy zostaną zwolnieni z badania.

Po zakończeniu badania każdy z 6 pacjentów otrzyma 2 jednostki krwi pełnej i otrzyma 1 infuzję autologicznych znakowanych radioaktywnie testowych lub kontrolnych erytrocytów oraz 1 infuzję autologicznych znakowanych radioaktywnie kontrolnych lub testowych erytrocytów.

Oceny badań zastosowane do oceny zarówno skuteczności, jak i bezpieczeństwa przedstawiono poniżej (Rozdział 1).

g) Procedury kliniczne, badania laboratoryjne, monitorowanie działania leków i minimalizowanie ryzyka

Część 1: Oceny badań i gromadzenie danych Badania przesiewowe: Dzień -28 do 0

• Wyjaśnij przedmiotowi naukę
• Uzyskaj podpisaną świadomą zgodę
• Historia medyczna
• Fizyczne badanie dawcy krwi
• Oznaki życia
• Leki towarzyszące, tj. inne niż wykluczone
• Próbki do badań laboratoryjnych: panel przesiewowy do badań hematologicznych, chemii surowicy i dawców krwi (mikrobiologiczny, ABO/Rh) (zgodnie z wymaganiami FDA/AABB).
• Bezpośredni i pośredni test antyglobulinowy (DAT/IAT)
• Typ ABO i Rh (część panelu dawcy)
• Próbka surowicy lub osocza do badania na obecność przeciwciał specyficznych dla INTERCEPT RBC i przeciwciał specyficznych dla biotynylowanych czerwonych krwinek
• Stratyfikuj pacjentów, aby otrzymali BioRBC-6 lub BioRBC-18 dla RBC leczonych INTERCEPT
• Próbka surowicy lub osocza do badania poziomu żelaza: ferrytyna (akceptowalna, ferrytyna > 26 ng/mL) Przed pobraniem krwi, dzień 0
• Choroba współistniejąca
• Oznaki życia
• Leki towarzyszące
• Hemoglobina/hematokryt

Podwójne pobieranie krwinek czerwonych, dzień 0 Parametry i harmonogram procedury pobierania krwinek czerwonych (współczynnik AC itp.)

1. Współczynnik antykoagulantu (AC) Współczynnik AC to parametr konfigurowalny w systemie Trima. Jednostki krwinek czerwonych zostaną zebrane przy stosunku krwi pełnej do antykoagulantu równym 11.

2. Czas pracy Czas pracy zostanie ograniczony do maksymalnie 120 minut. Podwójne produkty RBC będą pobierane podczas korzystania z zestawów Trima RBC, osocza i oczekuje się, że łącznie zajmie to około 30 minut.

   Składnik RBC — przed rozpoczęciem leczenia w dniu 0

   - Pobrać próbkę z jednostki kontrolnej i testowej RBC do oceny laboratoryjnej in vitro

   Składnik RBC — badane leczenie, dzień 0-1

   • Przetwórz i/lub wykonaj Proces INTERCEPT dla erytrocytów w jednej z dwóch oddanych jednostek krwi.
   • Pobierz próbkę z komponentu Test RBC (oceny in vitro)
   • Umieść kontrolne i testowe komponenty RBC w tradycyjnym banku krwi (1-6ºC).

   Po pobraniu krwi, dzień 1 (24 ± 6 godzin po oddaniu)

   • Leki towarzyszące
   • Choroba współistniejąca
   • Zbieraj AE i SAE (Uwaga: te dane mogą być zbierane przez telefon)

   OZNAKOWANIE RADIOZNAKOWANIE, BIOTYNYLACJA I POWTÓRNY WLEW AUTOLOGICZNYCH PODWIEWEK erytrocytów Przed ponowną infuzją autologicznych znakowanych, dzień 35 (w ciągu 6 godzin przed infuzją)

   • Pobierz świeżą 20 ml próbki krwi pacjenta do znakowania 99mTc i BioRBC-54
   • typu ABO
   • Potwierdź tożsamość składnika badania RBC, przeprowadzając urzędniczą analizę dokumentacji łańcucha dostaw i etykiet worków z krwią zgodnie ze standardami branżowymi i przepisami AABB/FDA
   • Próbki do badań laboratoryjnych: Hematologia i chemia surowicy
   • Test ciążowy (jeśli pacjentka)
   • Próbki surowicy lub osocza na przeciwciała INTERCEPT RBC i przeciwciała anty-BioRBC
   • Próbki do odzyskiwania krwinek czerwonych, masa, żywotność
   • Choroba współistniejąca
   • Oznaki życia
   • Wzrost i waga
   • Leki towarzyszące
   • Zbieraj AE i SAE od czasu darowizny.

   Składnik RBC:

   Przed infuzją, dzień 35

   - Oznacz 10 mL podwielokrotnością 35-dniowych badanych krwinek czerwonych z 51Cr

   • Oznakuj świeżą 10 ml porcję krwinek czerwonych osobnika za pomocą 99mTc i BioRBC-54
   • Pobierz próbkę badanego składnika KKCz (do oceny in vitro)

   Infuzja autologicznych badanych krwinek czerwonych, dzień 35

   - Infuzja mieszaniny pięciu ~10 ml (łącznie ~50 ml) podwielokrotności krwi autologicznej (wszystkie razem zmieszane i podane we wlewie z szybkością 5-7 ml/min), w tym: a) świeże krwinki czerwone znakowane 99mTc i BioRBC-54; b) świeże krwinki czerwone znakowane Bio-54; c) Przechowywane, kontrolne lub testowe RBC biotynylowane przy gęstości 6 mcg/ml; d) Przechowywane, testowe lub kontrolne RBC biotynylowane przy gęstości 18 mcg/ml; oraz e) Przechowywane, Testowane, RBC znakowane 51Cr. Wszystkie porcje będą etykietowane oddzielnie i mieszane do objętości ~50 ml. 50 ml autologicznych erytrocytów zostanie podane przez żyłę obwodową za pomocą igły motylkowej o rozmiarze 18-19 (przy przybliżonej szybkości 5 ml/min). (Uwaga: Pozostała część dwóch 35-dniowych kontrolnych jednostek RBC traktowanych i nietraktowanych INTERCEPT jest odrzucana.)

   • Leki towarzyszące

   • Zbieraj AE i SAE

     • Badania hematologiczne: CBC w tym hemoglobina, hematokryt, płytki krwi, MCV, MCH, MCHC, RDW ** Badania biochemiczne surowicy: wapń, wodorowęglany, chlorki, fosforany nieorganiczne, potas, sód, cholesterol, glukoza, białko całkowite, trójglicerydy, LDH, ALT, AspAT, bilirubina całkowita, BUN i kreatynina.

       • Obejmuje: ferrytynę w surowicy lub osoczu, żelazo, zdolność wiązania żelaza, wysycenie transferyny † Oznaki życiowe: tętno, częstość oddechów, ciśnienie krwi i temperatura. Jeśli w ciągu 24 godzin od infuzji wystąpi gorączka (temperatura >39°C lub >38˚C z drżącymi dreszczami), należy posiać osobnika i worek z krwinkami czerwonymi.

   Oceny i gromadzenie danych od dnia następującego po wlewie krwinek czerwonych do 147. dnia badania (112. dzień po wlewie) przedstawiono w Tabeli 1.

   OCENA BEZPIECZEŃSTWA Harmonogram oceny bezpieczeństwa badania przedstawiono w tabeli.

   Parametry bezpieczeństwa

   Punkty końcowe bezpieczeństwa obejmują:

   Główny punkt końcowy bezpieczeństwa

   • Występowanie przeciwciał specyficznych dla erytrocytów poddanych działaniu INTERCEPT
   • Częstość występowania przeciwciał specyficznych dla biotynylowanych czerwonych krwinek. Drugorzędowy punkt końcowy bezpieczeństwa
   • Częstość występowania niepożądanych i ciężkich zdarzeń niepożądanych, jak opisano poniżej w części zatytułowanej „Rejestrowanie i zgłaszanie zdarzeń niepożądanych”. Wyrób medyczny Systemu Leczenia INTERCEPT będzie monitorowany pod kątem braków urządzenia, w tym wadliwego działania i niepożądanych skutków działania urządzenia.

   Metody i synchronizacja parametrów bezpieczeństwa W tym badaniu sponsor/badacz, J.A. Cancelas będzie zbierać i rejestrować zdarzenia niepożądane (AE) przez 24 godziny po pobraniu każdej jednostki krwi pełnej i przez 24 godziny po każdym wlewie badanych krwinek czerwonych. Poważne zdarzenia niepożądane (SAE) będą zbierane i rejestrowane od momentu pobrania pierwszej jednostki krwi pełnej do zakończenia badania (tabela).

   Uczestnicy będą aktywnie monitorowani pod kątem zdarzeń niepożądanych podczas pobierania krwi i podczas badania wlewów krwinek czerwonych, aż do ich wypisu. Po wypisaniu ze szpitala wszystkie zdarzenia niepożądane zgłoszone wykwalifikowanemu personelowi badawczemu zostaną zarejestrowane. Dane AE i SAE mogą być zbierane telefonicznie lub osobiście przez personel badawczy. Parametry życiowe są zbierane przed i po każdej badanej infuzji. W przypadku wystąpienia u pacjenta w ciągu 24 godzin po badaniu gorączki po przetoczeniu krwinek czerwonych, zdefiniowanej jako temperatura >39°C lub >38°C z drżeniem dreszczy lub objawami przedmiotowymi i podmiotowymi odpowiadającymi posocznicy bakteryjnej, krew pacjenta zostanie pobrana, a Centrum Krwiodawstwa zostanie powiadomione o konieczności posiewu krwinek czerwonych pozostałych w segmencie lub resztkowych składników testowych lub kontrolnych RBC.

   Nasza grupa przetestuje surowicę lub osocze pacjenta pod kątem przeciwciał swoistych dla INTERCEPT RBC i BioRBC; próbki te będą pobierane od każdego osobnika przed infuzją, 14 dni po infuzji i 28 dni po infuzji, a następnie co miesiąc do dnia badania 147 (patrz Tabela). Jeśli zostanie zidentyfikowane przeciwciało specyficzne dla erytrocytów poddanych działaniu INTERCEPT, próbki zostaną wysłane do niezależnego laboratorium w celu potwierdzenia (UCLA/Amerykański Czerwony Krzyż, Pomona). Próbki krwi do paneli hematologicznych i chemicznych zostaną pobrane od każdego uczestnika Dni badania: przed infuzją (dzień 35), 24 godziny po infuzji (dzień 36), 56 dni po infuzji (dzień 91) i 112 dni po infuzji (dzień 147) , na koniec badania). Klinicznie istotne wyniki badań laboratoryjnych będą rejestrowane jako zdarzenia niepożądane. Oceny laboratoryjne przedstawiono w tabeli 1.

   Reakcje na transfuzję Chociaż reakcje na transfuzję są mało prawdopodobne ze względu na małą objętość infuzji, klinicznie istotne reakcje na transfuzję będą rejestrowane jako zdarzenia niepożądane.

   Podejrzenie posocznicy związanej z transfuzją Pacjenci będą monitorowani pod kątem zdarzeń niepożądanych związanych z infuzją, w tym posocznicy związanej z infuzją po infuzji badanego leku. Aby zapewnić pacjentowi niezmienioną próbkę porcji infuzyjnej krwi, pozostała część tej porcji zostanie przesłana do hodowli bakteryjnej.

   W przypadku, gdy u pacjenta wystąpi gorączka poinfuzyjna, definiowana jako temperatura >39°C lub temperatura >38°C z towarzyszącymi drżeniem dreszczami lub objawami przedmiotowymi i podmiotowymi odpowiadającymi posocznicy bakteryjnej w ciągu 24 godzin po infuzji badanego krwinek czerwonych, krew podmiotu zostanie wyhodowana, a pozostały przechowywany składnik zostanie wyhodowany.

   Hodowle będą przeprowadzane przez badaczy w Hoxworth Blood Center zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi w Hoxworth Blood Center. Jeśli bakterie zostaną odzyskane zarówno z krwi pacjenta, jak i składnika RBC, próbki izolatów zostaną wysłane do laboratorium szpitala University of Cincinnati w celu ustalenia, czy odzyskane organizmy są identyczne. Posocznica wywołana infuzją nie zostanie stwierdzona, dopóki ten sam organizm(y) nie zostanie wyizolowany zarówno ze składnika RBC, jak i od badanego osobnika.

   Wykrywanie i potwierdzenie obecności przeciwciał swoistych dla erytrocytów INTERCEPT Chociaż nie przewiduje się wystąpienia w tym badaniu ze względu na ograniczoną ekspozycję na badane erytrocyty, wszyscy uczestnicy zostaną przebadani na obecność przeciwciał swoistych dla erytrocytów leczonych INTERCEPT na początku badania (naturalnie występujące przeciwciało) i w określonych momentach badania (tab. 1).

   Obecność przeciwciał zostanie oceniona przy użyciu formalnie zatwierdzonej karty żelowej IAT, która jest rutynowo stosowana w wielu ośrodkach krwiodawstwa do testowania zgodności z transfuzją w połączeniu z panelem zamrożonych odczynników RBC INTERCEPT. Zamrożony panel przesiewowy RBC składa się z odczynników RBC od 3 specyficznie fenotypowanych dawców grupy krwi O i jest analogiczny do rutynowych paneli przesiewowych przeciwciał stosowanych w regularnej praktyce banków krwi. Każda komórka w panelu 3 składa się z nietraktowanych erytrocytów, komórek niosących „wysoki” poziom adduktów akrydyny i komórek niosących „niski” poziom adduktów akrydyny. Panel przesiewowy został zaprojektowany jako czuły test przesiewowy na obecność przeciwciał INTERCEPT RBC w obecności najczęściej spotykanych alloprzeciwciał. Aglutynacja z kartą żelową zostanie oceniona od 1+ do 4+ na podstawie zaleceń producenta.

   W celu interpretacji wyników, jeśli wynik panelu skriningowego RBC jest pozytywny przy 3/3 RBC INTERCEPT niosących „wysoki” i/lub „niski” poziom adduktów akrydyny ORAZ przy 0/3 przy odpowiednich kontrolnych nietraktowanych RBC, próbka jest klasyfikowana jako „reaktywne dla przeciwciał INTERCEPT RBC.

   Potwierdzenie i charakterystyka przeciwciał zostanie przeprowadzona w ARC Immunohematology Reference Laboratory, Pomona i będzie obejmować specyficzność akrydyny poprzez hamowanie aglutynacji (neutralizacja) przy użyciu rozpuszczalnego analogu akrydyny amustaliny, miana przeciwciał, izotypu przeciwciała i amplitudy termicznej.

   Jeżeli zostanie stwierdzona obecność przeciwciał specyficznych dla INTERCEPT RBC, nie określa to, czy to przeciwciało jest fizjologicznie aktywne lub ma znaczenie kliniczne. sekwestracja erytrocytów za pośrednictwem narządu, ciężka hipoplazja erytroidalna lub inna współistniejąca medyczna przyczyna ostrej niedokrwistości niezwiązanej z transfuzją.

   Wykrywanie i potwierdzanie obecności przeciwciał swoistych dla BioRBC Podobnie jak w przypadku krwinek czerwonych INTERCEPT, przed transfuzją badani zostaną poddani badaniu przesiewowemu na obecność naturalnie występujących lub istniejących wcześniej przeciwciał przeciwko BioRBC (18). Zostanie to wykonane przy użyciu tej samej aglutynacji z kartą żelową, co w przypadku czerwonych krwinek INTERCEPT, ale przy użyciu BioRBC inkubowanych z badaną surowicą lub osoczem. W skrócie, 50 µl 0,8% docelowego hematokrytu BioRBC-N lub nieznakowanego RBC zostanie przygotowane od dawcy krwi GpO i dodane do kolumny żelowej. Osocze osobnika (25 µl) dodaje się do docelowych erytrocytów i inkubuje w 37˚C przez 30 min. Karty żelowe są następnie wirowane przez 10 min. Obecność aglutynacji BioRBC oznacza się ilościowo, stosując definicje reaktywności specyficzne dla gradacji producenta. Oceny reaktywności będą oparte na zaleceniach producenta 0-4+, ale dodatkowo wynik 1+ (tj. aglutynacja w dolnej połowie matrycy) zostanie dalej podzielony na trzy coraz bardziej reaktywne oznaczenia 1+: 1) ± wskazuje pochyły osad z kilkoma zlepionymi krwinkami czerwonymi; 2) 1w oznacza ukośny osad z większą ilością aglutynowanych RBC; i 3) 1+ oznacza rozerwany osad RBC z większą liczbą aglutynowanych komórek. Podobnie jak w przypadku wykrycia przeciwciał swoistych dla INTERCEPT, wykrycie swoistych przeciwciał przeciwko BioRBC nie określa, czy przeciwciała te są fizjologicznie aktywne, czy też mają znaczenie kliniczne.

   Testy potwierdzające indukcję przeciwciał indukowanych przez BioRBC zostaną przeprowadzone poprzez hamowanie aglutynacji (neutralizację) związkami biotyny, np. biocytyna, biotynylowana żelatyna lub biotynylowana albumina są w stanie zneutralizować przeciwciała anty-BioRBC. Jak dotąd wszystkie zidentyfikowane wcześniej, naturalnie występujące przeciwciała anty-BioRBC są neutralizowane przez związki biotyny, podczas gdy oczekuje się, że indukowane przeciwciała anty-BioRBC będą hamowane przez BioRBC, a nie przez wolną biotynę, jak wcześniej opublikowano przez naszą grupę (5).

   Rejestrowanie i zgłaszanie zdarzeń niepożądanych Zdarzenie niepożądane Definicja Zdarzenie niepożądane definiuje się jako każde niepożądane zdarzenie medyczne u pacjenta lub uczestnika badania klinicznego, któremu podano produkt farmaceutyczny i które niekoniecznie ma związek przyczynowy z tym leczeniem. Zdarzenie niepożądane może być dowolnym niekorzystnym i niezamierzonym objawem (w tym nieprawidłowym wynikiem badań laboratoryjnych), objawem lub chorobą tymczasowo związaną z produktem leczniczym (w tym badaniu BioRBC i INTERCEPT RBC), niezależnie od tego, czy jest on związany z produktem leczniczym (Międzynarodowa Konferencja ds. Harmonizacji wymagań technicznych dotyczących rejestracji środków farmaceutycznych stosowanych u ludzi (ICH-E2A, sekcja 2.1)

   Definicja poważnego zdarzenia niepożądanego

   Niektóre zdarzenia niepożądane są uważane za „poważne”, gdy wynik zdarzenia stanowi zagrożenie dla życia lub stanu funkcjonalnego pacjenta. Poważne zdarzenie niepożądane (SAE) to zdarzenie niepożądane, którego skutkiem są następujące skutki:

   • Powoduje śmierć
   • Zagrażający życiu
   • Wymaga hospitalizacji w szpitalu lub przedłużenia istniejącej hospitalizacji
   • Powoduje trwałą lub znaczną niepełnosprawność/niezdolność
   • Jest wrodzoną anomalią/wadą wrodzoną
   • Ważne zdarzenia medyczne, które mogą nie prowadzić do zgonu, nie zagrażać życiu lub wymagać hospitalizacji, można uznać za poważne, jeżeli w oparciu o odpowiednią ocenę medyczną mogą narazić pacjenta na niebezpieczeństwo i/lub mogą wymagać interwencji w celu zapobieżenia jednemu ze skutków wymienionych w niniejszej definicja (ICH E2A sekcja II/B).

   Definicja niepożądanego efektu urządzenia Niekorzystny efekt urządzenia (ADE) definiuje się jako zdarzenie niepożądane związane z użyciem badanego wyrobu medycznego.

   Nieoczekiwany szkodliwy skutek Definicja Nieoczekiwany niekorzystny skutek (UAE) jest definiowany jako każdy poważny niekorzystny wpływ na zdrowie lub bezpieczeństwo lub jakikolwiek zagrażający życiu problem lub śmierć, spowodowany lub związany z procesem, jeżeli ten skutek, problem lub śmierć nie zostały wcześniej stwierdzony charakter, dotkliwość lub stopień częstości występowania w planie badania lub wniosku (w tym w planie lub wniosku uzupełniającym) lub jakikolwiek inny nieprzewidziany poważny problem związany z wyrobem, który ma związek z prawami, bezpieczeństwem lub dobrem uczestników (21 CFR 812.3).

   Zgłaszanie zdarzeń niepożądanych Zdarzenia niepożądane zostaną udokumentowane na odpowiednim formularzu opisu przypadku (CRF), niezależnie od tego, czy zostały sklasyfikowane jako związane z badanym produktem.

   Jeśli AE spełnia kryteria poważnego zdarzenia niepożądanego (SAE) lub nieoczekiwanego niepożądanego efektu urządzenia (UAE), jak opisano powyżej, sponsor/PI przerwie badanie i powiadomi FDA w ciągu 7 dni.

   Badacze będą przestrzegać obowiązujących wymogów regulacyjnych związanych ze zgłaszaniem poważnych zdarzeń niepożądanych do IRB. Badacz przedłoży Sponsorowi i dokonującemu przeglądowi IRB raport o wszelkich nieprzewidzianych niepożądanych skutkach urządzenia, które wystąpiły podczas badania, tak szybko, jak to możliwe, ale w żadnym wypadku nie później niż 10 dni roboczych po tym, jak Badacz po raz pierwszy dowiedział się o skutkach.

   Sponsor zgłosi podejrzewane nieoczekiwane poważne działania niepożądane i/lub nieprzewidziane działania niepożądane urządzenia, aby zachować zgodność z odpowiednimi wymogami prawnymi.

   Ocena powagi i dotkliwości zdarzenia niepożądanego Badacz ma obowiązek ocenić, czy zdarzenie niepożądane nie jest poważne, czy poważne, przy czym to drugie definiuje się jako zdarzenie, które spowodowało którykolwiek z następujących skutków: zgon, zdarzenie zagrażające życiu (wyniki w bezpośrednim zagrożeniu zgonem w wyniku reakcji, jaka wystąpiła), hospitalizacji stacjonarnej lub przedłużenia istniejącej hospitalizacji, trwałej lub znacznej niepełnosprawności/niesprawności, wady wrodzonej/wady wrodzonej lub innego ważnego zdarzenia medycznego.

   Termin „poważny” jest używany do opisania intensywności (dotkliwości) określonego zdarzenia (jak w przypadku łagodnego, umiarkowanego lub ciężkiego); samo zdarzenie może jednak mieć stosunkowo niewielkie znaczenie medyczne (takie jak silny ból głowy). Ciężkość to nie to samo, co „poważne”, które opiera się na wyniku pacjenta/zdarzenia lub kryteriach leczenia związanych ze zdarzeniami, które stanowią zagrożenie dla życia lub stanu funkcjonalnego pacjenta.

   Powaga (nie dotkliwość) służy jako przewodnik przy definiowaniu obowiązków sprawozdawczych regulacyjnych. National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE, wersja 4.03) służy do oceny i klasyfikacji intensywności/dotkliwości zdarzenia.

   Ocena związku przyczynowego zdarzeń niepożądanych Badacz oceni, czy istnieje uzasadnione prawdopodobieństwo, że pobranie krwi do badania lub infuzja krwinek czerwonych spowodowały lub przyczyniły się do wystąpienia zdarzenia niepożądanego.

   Określenie, czy istnieje uzasadnione prawdopodobieństwo, że badany składnik krwinek czerwonych spowodował lub przyczynił się do zdarzenia niepożądanego, obejmuje ocenę zależności czasowych, prawdopodobieństwa biologicznego, informacji o odstawieniu/ponownym podaniu leku (jeśli są dostępne), związku (lub braku związku) z chorobą podstawową oraz obecności (lub brak) bardziej prawdopodobnej przyczyny.

   Skala służąca do oceny związku przyczynowego zdarzenia niepożądanego z badanym komponentem RBC (poziomy przypisywalności) jest następująca:

   Skala oceny związku przyczynowego Poziom przypisywalności Wyjaśnienie Wyłączone Gdy istnieją rozstrzygające dowody ponad wszelką wątpliwość, aby przypisać zdarzenie niepożądane innym przyczynom. Mało prawdopodobne Gdy dowody wyraźnie przemawiają za przypisaniem zdarzenia niepożądanego przyczynom innym niż badany składnik RBC.

   1. Możliwe: gdy dowody nie pozwalają na przypisanie zdarzenia niepożądanego składnikowi czerwonych krwinek lub przyczynom alternatywnym.
   2. Prawdopodobne: Prawdopodobne Gdy dowody wyraźnie przemawiają za przypisaniem zdarzenia niepożądanego składnikowi RBC.
   3. Pewne: Gdy istnieją rozstrzygające dowody ponad wszelką wątpliwość, aby przypisać zdarzenie niepożądane składnikowi RBC.

   Ocena intensywności zdarzeń niepożądanych Od badacza wymaga się oceny intensywności (dotkliwości) każdego zdarzenia niepożądanego przy użyciu kryteriów CTCAE (ang. Common Terminology Criteria for Adverse Events) Narodowego Instytutu Raka.

   Kontynuacja zdarzenia niepożądanego Wszystkie SAE będą monitorowane do momentu ustąpienia lub gdy badacz uzna zdarzenie za chroniczne lub stabilne.

   Zasady zatrzymywania

   Następujące SR będą stosowane do wszystkich uczestników badania przez cały czas trwania badania, ilekroć sponsor/kierownik badania (José Cancelas, doktor nauk medycznych) i/lub monitor kliniczny (Patricia Carey, lek. med., profesor patologii, dyrektor medyczny, Hoxworth Blood Center)) zgadzają się, że wystąpiła jedna z poniższych sytuacji:

   1. SAE, co do którego ustalono, że jest prawdopodobnie, prawdopodobnie lub zdecydowanie związane z infuzją autologicznego BioRBC;
   2. AE związane z infuzją autologicznego BioRBC zagraża zdrowiu lub bezpieczeństwu podmiotu;
   3. AE wymagające interwencji medycznej lub chirurgicznej związanej z infuzją autologicznego BioRBC jest wymagane, aby zapobiec wystąpieniu SAE;
   4. Zdarzenie hemolizy po infuzji oceniane przez wykrywanie przeciwciał anty-BioRBC przy użyciu testu karty żelowej IgG opracowanego przez naszą grupę.

   Jeśli wystąpi którykolwiek z powyższych warunków, badanie zostanie wstrzymane i zgłoszone FDA i IRB zgodnie z obowiązującymi przepisami w celu oceny kontynuacji badania. Pacjenci, którym podano infuzję, będą obserwowani tak długo, jak będzie to konieczne do zidentyfikowania konsekwencji zidentyfikowanych zdarzeń niepożądanych. Ponieważ w ramach tego badania nie przeprowadza się żadnych dodatkowych eksperymentalnych transfuzji BioRBC, przez „kontynuację badania” należy rozumieć kontynuację monitorowania próbek biologicznych, jak już opisano w tym badaniu, ale być może obejmującą inne testy uznane za odpowiednie przez sponsora badania/PI, monitora klinicznego, FDA i/lub IRB.