Wiederherstellung und Lebensdauer von roten Blutkörperchen aus erregerreduzierten, gelagerten Bluteinheiten (BIO-CR-RBC)

Jeder Proband erhält gleichzeitig eine Infusion mit autologen, radioaktiv markierten und BioRBC-markierten INTERCEPT-RBCs (Test-RBCs) und eine Infusion mit autologen BioRBC-markierten unbehandelten RBCs (Kontroll-RBCs). Jede Infusion enthält etwa 20 ml, d. h. 10 ml 51-Chrom-markierte Erythrozyten und 10 ml entweder BioRBC-6 oder BioRBC-18, die wie oben angegeben basierend auf der Test- oder Kontrollbezeichnung stratifiziert werden.

Behandlungs-Compliance Gesunde Probanden, die die Studienverpflichtungen verstehen und die Einverständniserklärung unterzeichnen, werden in die Studie aufgenommen. Die Einhaltung der Behandlung und Folgetests werden vom Prüfarzt nachverfolgt, auf dem Fallberichtsformular (CRF) aufgezeichnet und vom Sponsor überwacht.

BEWERTUNG DER WIRKSAMKEIT

Wirksamkeitsparameter

Zu den Wirksamkeitsendpunkten gehören:

Primärer Wirksamkeitsendpunkt(24)

- 24 Stunden nach der Infusion Gewinnung von autologen RBC, die 35 Tage lang in AS-5 gelagert und dann entweder mit 51 Cr oder Biotin markiert wurden.

Sekundäre Wirksamkeitsendpunkte(25)

• Mittlere Lebensdauer von autologen Erythrozyten, die 35 Tage gelagert und dann entweder mit 51 Cr oder Biotin markiert wurden
• Mittlere Lebensdauer (T50) von autologen Erythrozyten, die 35 Tage gelagert und dann entweder mit 51 Cr oder Biotin markiert wurden

• Fläche unter der Kurve (AUC), bestimmt anhand von Datenpunkten, die für die Lebensdauer der roten Blutkörperchen von autologen, radioaktiv markierten oder Bio-RBCs gesammelt wurden

  e) Dosisbestimmung und Dauer

Methoden und Zeitpunkt der Wirksamkeitsparameter Diese Studie besteht aus einem einzelnen Behandlungszeitraum, in dem biotinylierte Kontrollen (unter Verwendung einer Erythrozyten-Oberflächendichte von 6 oder 18 µg Sulfo-NHS-Biotin pro ml Erythrozyten) verabreicht werden, d. h. an einem einzigen Punkt co-infundiert werden rechtzeitig mit Test INTERCEPT-behandelten biotinylierten RBC (unter Verwendung einer Konzentration von 18 oder 6 µg Sulfo-NHS-Biotin pro ml RBC) und INTERCEPT-behandelten, radioaktiv markierten (51Cr) RBC. Alle 6 Probanden erhalten gleichzeitig sowohl Kontroll- als auch S-303-behandelte (Test-) RBCs, und der einzige Unterschied zwischen den zwei Sätzen von 3 Probanden wird der Grad der Biotinylierung der Kontroll- oder Test-RBC sein.

Die Studie ist stratifiziert und Kontroll- oder Test-RBC werden alternativ mit entweder 6 oder 18 µg Sulfo-NHS-Biotin pro ml RBC markiert. RBC von drei Personen (Probanden 1, 3 und 5) werden mit 6 bzw. 18 µg Sulfo-NHS-Biotin pro ml RBC für Kontroll- bzw. Test-RBC markiert. Die anderen drei Personen (Probanden 2, 4 und 6) werden mit 6 bzw. 18 µg Sulfo-NHS-Biotin pro ml RBC für Kontroll- bzw. Test-RBC markiert. Das Ziel dieser Stratifizierung besteht darin, sicherzustellen, dass durch die Biotin-Markierungsdichte keine Verzerrung in einen der Studienarme eingeführt wird.

f) Beschreibung der Beobachtungen und Messungen

Am Tag 0 jeder Behandlungsperiode spendet das Subjekt zwei Einheiten verpackter RBC (automatisierte Doppel-RBC-Spende, Trima - Terumo BCT-Apheresesystem); die Einheiten werden durch Inline-Filtration leukozytenreduziert und die RBC-Konzentrate werden in Additivlösung (AS-5) hergestellt.

Eine der beiden Einheiten wird sofort 35 Tage lang bei 1-6 °C gelagert (Kontrolleinheit). Diese herkömmliche RBC-Komponente repräsentiert die Kontroll-RBCs in dieser Studie.

Die Test-RBC-Einheit wird durch Verarbeitung mit dem INTERCEPT Blood System for Red Blood Cells vorbereitet. Biochemische und morphologische In-vitro-Parameter der RBC-Komponenten der Studie (Tabelle 1) werden am Tag 0 nach der Zubereitung der RBC-Konzentrate in AS-5 (vor der Studienbehandlung), nach der Verarbeitung und vor der Lagerung (nur Test) und erneut gemessen am Tag 35 (vor der Infusion zurück in die Studienteilnehmer), um die RBC-Qualität der verarbeiteten/gelagerten RBC-Einheiten zu bewerten. Die für die In-vitro-Eigenschaften erhobenen Daten werden anhand deskriptiver Statistiken zusammengefasst.

Tabelle 1. Biochemische Parameter, analysiert an Tag 0 und Tag 35 der Lagerung von Kontroll- und behandelten RBC-Einheiten.

Parameter Hb-Gehalt/Einheit Hämolyse pH pO2 pCO2 Glucose (extrazellulär) Laktat (extrazellulär) Bicarbonat (extrazellulär) Natrium (extrazellulär) Kalium (extrazellulär)

An Tag 35 der RBC-Lagerung jeder Behandlungsperiode wird ein Aliquot der Kontroll-RBCs biotinyliert (6 oder 18 mcg/ml). Aus der Testeinheit werden zwei Aliquots entnommen; Das erste Aliquot wird mit 51 Cr radioaktiv markiert und das zweite Aliquot wird mit 6 oder 18 µg/ml biotinyliert. Die Reinfusion der beiden biotinylierten autologen Erythrozyten (Kontrolle und Test) zusammen mit den 51Cr-markierten autologen Erythrozyten (Test) misst Erholung und Überleben (ungefähr insgesamt: 20 mcCi). Ebenfalls an Tag 35 wird dem Probanden eine 20-ml-Probe frischen Bluts entnommen und die RBCs mit 99mTc und Bio-54 markiert. Die Reinfusion der frischen 99mTc-RBC und des frischen Bio-54 ermöglicht die Bestimmung des Blutvolumens des Patienten oder der Anzahl der zirkulierenden RBC.

Fünf Arten von Erythrozyten werden gemischt und infundiert: a) frische Erythrozyten, markiert mit 99mTc und BioRBC-54; b) frische Bio-54-markierte RBC; c) gelagerte, Kontroll- oder Test-RBC biotinyliert bei einer Dichte von 6 mcg/ml; d) gelagerte, Test- oder Kontroll-RBC biotinyliert bei einer Dichte von 18 mcg/ml; und e) gelagert, Test, RBC markiert mit 51 Cr. Alle Aliquots werden separat etikettiert und für ein Volumen von ~50 ml gemischt. Die 50 ml der autologen Erythrozyten werden durch eine periphere Vene mit einer 18-19-Gauge-Butterfly-Nadel (mit einer ungefähren Geschwindigkeit von 5 ml/min) infundiert.

Blutproben aus dem kontralateralen Arm des Patienten werden unmittelbar vor der Infusion sowie 5, 7,5, 10, 12,5, 15, 20, 30 Minuten und 24 Stunden nach Abschluss der Infusion entnommen, um eine Extrapolation auf T = 0 für die 51 Cr-Bestimmung zu ermöglichen des Blutvolumens, wie zuvor von unserer Gruppe veröffentlicht (16, 17, 26-30).

Zusätzliche Blutproben werden 48 und 72 Stunden und 7 Tage nach der Infusion und dann wöchentlich bis 28 Tage (Tage 37, 38, 42, 49, 56 und 63 nach der Infusion) und von da an alle zwei Wochen (Tage 77, 91, 105, 119, 133, 147). Nach der Entnahme der letzten Blutprobe in Behandlungszeitraum 2 werden die Probanden aus der Studie entlassen.

Nach Abschluss der Studie hat jeder der 6 Probanden 2 Einheiten Vollblut bereitgestellt und erhält 1 Infusion mit autologen radioaktiv markierten Test- oder Kontroll-RBCs und 1 Infusion mit autologen radioaktiv markierten Kontroll- oder Test-RBCs.

Die Studienbewertungen, die zur Bewertung sowohl der Wirksamkeit als auch der Sicherheit verwendet wurden, sind unten dargestellt (Abschnitt 1).

g) Klinische Verfahren, Labortests, Überwachung von Arzneimittelwirkungen und Minimierung von Risiken

Abschnitt 1: Studienbewertungen und Datenerfassung Screening: Tag -28 bis 0

• Erklären Sie das Studium dem Thema
• Holen Sie eine unterschriebene Einverständniserklärung ein
• Krankengeschichte
• Körperliche Untersuchung des Blutspenders
• Vitalfunktionen
• Begleitmedikationen, d. h. andere als die ausgeschlossenen
• Proben für Labortests: Screening-Panel für Hämatologie, Serumchemie und Blutspendertests (mikrobiologisch, ABO/Rh) (gemäß FDA/AABB-Anforderungen).
• Direkter und indirekter Antiglobulintest (DAT/IAT)
• ABO- und Rh-Typ (Teil des Spenderpanels)
• Serum- oder Plasmaprobe zum Testen auf Antikörper, die für INTERCEPT RBC spezifisch sind, und Antikörper, die spezifisch für biotinylierte RBC sind
• Stratifizieren Sie die Probanden, um BioRBC-6 oder BioRBC-18 für mit INTERCEPT behandelte RBCs zu erhalten
• Serum- oder Plasmaprobe zum Testen des Eisenstatus: Ferritin (sofern akzeptabel, Ferritin > 26 ng/ml) Vor der Blutentnahme, Tag 0
• Interkurrente Krankheit
• Vitalfunktionen
• Begleitmedikation
• Hämoglobin/Hämatokrit

Doppelte RBC-Entnahme, Tag 0 Trima-Entnahmeverfahren Parameter und Zeitplan (AC-Verhältnis usw.)

1. Antikoagulanz (AC)-Verhältnis Das AC-Verhältnis ist ein Parameter, der auf dem Trima-System konfiguriert werden kann. Die Erythrozyteneinheiten werden in einem Verhältnis von Vollblut zu Antikoagulans von 11 gesammelt.

2. Laufzeit Die Laufzeit wird auf maximal 120 Minuten begrenzt. Doppelte Erythrozytenprodukte werden gesammelt, wenn die Trima Erythrozyten- und Plasmasets verwendet werden, und es wird erwartet, dass sie insgesamt etwa 30 Minuten dauern.

   RBC-Komponente – vor Studienbehandlungstag 0

   - Sammeln Sie Proben aus den Kontroll- und Test-RBC-Einheiten der Studie für In-vitro-Laborbewertungen

   RBC-Komponente – Studienbehandlung, Tag 0-1

   • Verarbeiten und/oder führen Sie den INTERCEPT-Prozess für Erythrozyten in einer der beiden Blutspendeeinheiten durch.
   • Entnehmen Sie eine Probe aus der Test RBC-Komponente (In-vitro-Bewertungen)
   • Kontroll- und Test-RBC-Komponenten in die herkömmliche Blutbankaufbewahrung geben (1-6 °C).

   Nach der Blutentnahme, Tag 1 (24 ± 6 Stunden nach der Spende)

   • Begleitmedikation
   • Interkurrente Krankheit
   • Erfassung von UEs und SUEs (Hinweis: Diese Daten können telefonisch erfasst werden)

   RADIOKENNZEICHNUNG, BIOTINYLIERUNG UND RE-INFUSION VON AUTOLOGEN RBC-ALIQUOTS Vor der Re-Infusion von autolog markierten, Tag 35 (innerhalb von 6 Stunden vor der Infusion)

   • Entnehmen Sie eine frische 20-ml-Probe des Bluts des Probanden für die 99mTc- und BioRBC-54-Kennzeichnung
   • ABO-Typ
   • Bestätigen Sie die Identität der RBC-Studienkomponente durch eine genaue Analyse der Dokumentation der Kontrollkette und der Blutbeuteletiketten gemäß Industriestandards und AABB/FDA-Vorschriften
   • Proben für Labortests: Hämatologie und Serumchemie
   • Schwangerschaftstest (bei weiblicher Versuchsperson)
   • Serum- oder Plasmaproben für INTERCEPT-Antikörper RBC und Anti-BioRBC-Antikörper
   • Proben für RBC-Erholung, Masse, Lebensdauer
   • Interkurrente Krankheit
   • Vitalfunktionen
   • Größe und Gewicht
   • Begleitmedikation
   • Sammle UEs und SUEs seit der Spende.

   RBC-Komponente:

   Vor der Infusion, Tag 35

   - Beschriften Sie 10-ml-Aliquots von 35 Tage alten Erythrozyten der Studie mit 51Cr

   • Frisches 10-ml-Aliquot der Erythrozyten des Probanden mit 99mTc und BioRBC-54 beschriften
   • Entnehmen Sie eine Probe der RBC-Komponente der Studie (für In-vitro-Bewertungen)

   Infusion von autologen Studien-RBCs, Tag 35

   - Infusion einer Mischung aus fünf ~10 ml (insgesamt ~50 ml) Aliquots autologem Blut (alle zusammengemischt und mit einer Geschwindigkeit von 5-7 ml/min infundiert), einschließlich: a) frischer roter Blutkörperchen, markiert mit 99mTc und BioRBC-54; b) frische Bio-54-markierte RBC; c) gelagerte, Kontroll- oder Test-RBC biotinyliert bei einer Dichte von 6 mcg/ml; d) gelagerte, Test- oder Kontroll-RBC biotinyliert bei einer Dichte von 18 mcg/ml; und e) gelagert, Test, RBC markiert mit 51 Cr. Alle Aliquots werden separat etikettiert und für ein Volumen von ~50 ml gemischt. Die 50 ml der autologen Erythrozyten werden durch eine periphere Vene mit einer 18-19-Gauge-Butterfly-Nadel (mit einer ungefähren Geschwindigkeit von 5 ml/min) infundiert. (Hinweis: Der Rest der beiden 35 Tage alten INTERCEPT-behandelten und unbehandelten RBC-Kontrolleinheiten wird verworfen.)

   • Begleitmedikation

   • Sammeln Sie UEs und SUEs

     • Hämatologische Tests: CBC einschließlich Hämoglobin, Hämatokrit, Blutplättchen, MCV, MCH, MCHC, RDW ** Serumchemische Tests: Calcium, Bicarbonat, Chlorid, anorganisches Phosphat, Kalium, Natrium, Cholesterin, Glukose, Gesamtprotein, Triglyceride, LDH, ALT, AST, Gesamtbilirubin, BUN und Kreatinin.

       • Beinhaltet: Serum- oder Plasma-Ferritin, Eisen, Eisenbindungskapazität, Transferrinsättigung † Vitalfunktionen: Herzfrequenz, Atemfrequenz, Blutdruck und Temperatur. Bei Fieber innerhalb von 24 Stunden nach der Infusion (Temperatur > 39 °C oder > 38 °C bei Schüttelfrost) den Probanden und den Erythrozytenbeutel kultivieren.

   Die Bewertungen und Datenerhebung beginnend am Tag nach der RBC-Infusion bis zum Studientag 147 (Tag 112 nach der Infusion) sind in Tabelle 1 dargestellt.

   BEWERTUNG DER SICHERHEIT Der Zeitpunkt der Sicherheitsbewertungen der Studie ist in der Tabelle dargestellt.

   Sicherheitsparameter

   Zu den Sicherheitsendpunkten gehören:

   Primärer Sicherheitsendpunkt

   • Auftreten von Antikörpern, die spezifisch für mit INTERCEPT behandelte Erythrozyten sind
   • Inzidenz von Antikörpern, die für biotinylierte Erythrozyten spezifisch sind Sekundärer Sicherheitsendpunkt
   • Auftreten von unerwünschten und schwerwiegenden unerwünschten Ereignissen, wie unten im Abschnitt „Erfassen und Melden von unerwünschten Ereignissen“ beschrieben. Das medizinische Gerät des INTERCEPT-Behandlungssystems wird auf Gerätemängel, einschließlich Fehlfunktionen und nachteilige Auswirkungen des Geräts, überwacht.

   Methoden und Zeitpunkt der Sicherheitsparameter In dieser Studie hat der Sponsor/Untersucher, J.A. Cancelas wird unerwünschte Ereignisse (AEs) für 24 Stunden nach der Entnahme jeder Vollbluteinheit und für 24 Stunden nach jeder Infusion von Erythrozyten der Studie sammeln und aufzeichnen. Schwerwiegende unerwünschte Ereignisse (SAE) werden ab dem Zeitpunkt der Entnahme der ersten Vollbluteinheit bis zum Abschluss der Studie erfasst und aufgezeichnet (Tabelle).

   Die Probanden werden während der Blutentnahme und während der Erythrozyteninfusionen der Studie und bis zu ihrer Entlassung aktiv auf UE überwacht. Nach der Entlassung werden alle dem qualifizierten Studienpersonal gemeldeten UEs erfasst. AE- und SAE-Daten können telefonisch oder persönlich vom Studienpersonal erhoben werden. Lebenszeichen werden vor und nach jeder Studieninfusion gesammelt. Für den Fall, dass ein Proband innerhalb von 24 Stunden nach einer Erythrozytentransfusion in der Studie Postinfusionsfieber entwickelt, definiert als eine Temperatur > 39 °C oder eine Temperatur > 38 °C mit Schüttelfrost (Rigor) oder Anzeichen und Symptome, die mit einer bakteriellen Sepsis übereinstimmen, Das Blut des Probanden wird kultiviert und das Blutzentrum wird benachrichtigt, die in einem Segment verbleibenden Erythrozyten oder die restlichen Erythrozytenkomponenten des Tests oder der Kontrolle zu kultivieren.

   Unsere Gruppe wird das Serum oder Plasma der Probanden auf Antikörper testen, die für INTERCEPT RBCs und BioRBC spezifisch sind; diese Proben werden von jedem Probanden vor der Infusion, 14 Tage nach der Infusion und 28 Tage nach der Infusion und danach monatlich bis zum Studientag 147 erhalten (siehe Tabelle). Wenn ein Antikörper identifiziert wird, der für mit INTERCEPT behandelte Erythrozyten spezifisch ist, werden die Proben zur Bestätigung an ein unabhängiges Labor geschickt (UCLA/Amerikanisches Rotes Kreuz, Pomona). Blutproben für Hämatologie- und Chemie-Panels werden an den Studientagen jedes Probanden entnommen: vor der Infusion (Tag 35), 24 Stunden nach der Infusion (Tag 36), 56 Tage nach der Infusion (Tag 91) und 112 Tage nach der Infusion (Tag 147). , am Ende der Studie). Klinisch signifikante Laborbefunde werden als unerwünschte Ereignisse aufgezeichnet. Die Laborbewertungen sind in Tabelle 1 aufgeführt.

   Transfusionsreaktionen Obwohl Transfusionsreaktionen aufgrund des geringen Infusionsvolumens unwahrscheinlich sind, werden klinisch signifikante Transfusionsreaktionen als unerwünschte Ereignisse aufgezeichnet.

   Verdacht auf transfusionsbedingte Sepsis Die Probanden werden auf infusionsbedingte unerwünschte Ereignisse, einschließlich infusionsbedingter Sepsis, nach der Studieninfusion überwacht. Um eine unveränderte Probe des einem Probanden transfundierten Blutinfusionsaliquots bereitzustellen, wird der Rest dieses Aliquots zur Bakterienkultur geschickt.

   Für den Fall, dass ein Proband Postinfusionsfieber entwickelt, definiert als eine Temperatur von > 39 °C oder eine Temperatur von > 38 °C mit Schüttelfrost (Rigor) oder Anzeichen und Symptome, die mit einer bakteriellen Sepsis innerhalb von 24 Stunden nach einer Erythrozyteninfusion der Studie übereinstimmen, das Blut des Subjekts wird kultiviert und die verbleibende gelagerte Komponente wird kultiviert.

   Die Kulturen werden von Ermittlern des Hoxworth Blood Center gemäß den Standardarbeitsanweisungen des Hoxworth Blood Center durchgeführt. Wenn Bakterien sowohl aus dem Blut des Patienten als auch aus der RBC-Komponente gewonnen werden, werden Proben der Isolate an das Labor des University of Cincinnati Hospital geschickt, um festzustellen, ob die gewonnenen Organismen identisch sind. Eine infusionsinduzierte Sepsis wird nicht festgestellt, es sei denn, der/die gleiche(n) Organismus(se) wird/werden sowohl aus der RBC-Komponente als auch aus der Studienperson gewonnen.

   Nachweis und Bestätigung von Antikörpern, die für INTERCEPT-Erythrozyten spezifisch sind Obwohl dies in dieser Studie aufgrund der begrenzten Exposition gegenüber Erythrozyten im Test nicht zu erwarten ist, werden alle Probanden bei Studieneintritt auf das Vorhandensein von Antikörpern getestet, die für mit INTERCEPT behandelte Erythrozyten spezifisch sind (natürlich vorkommende Antikörper). zu bestimmten Zeiten während der Studie (Tabelle 1).

   Das Vorhandensein von Antikörpern wird mithilfe einer formal validierten IAT-Gelkarte bewertet, die routinemäßig in vielen Blutzentren für Transfusionskompatibilitätstests in Verbindung mit einer Reihe von INTERCEPT-RBCs aus gefrorenen Reagenzien verwendet wird. Das gefrorene RBC-Screening-Panel besteht aus Reagenz-RBCs von 3 spezifisch phänotypisierten Spendern der Blutgruppe O und ist analog zu routinemäßigen Antikörper-Screening-Panels, die in der regulären Blutbankpraxis verwendet werden. Jede Zelle in der Reihe von 3 besteht aus unbehandelten RBCs, Zellen, die einen "hohen" Gehalt an Acridin-Addukten tragen, und Zellen, die einen "niedrigen" Gehalt an Acridin-Addukten tragen. Das Screening-Panel wurde als sensitiver Screening-Test für das Vorhandensein von INTERCEPT RBC-Antikörpern in Gegenwart der gängigsten Alloantikörper konzipiert. Die Agglutination der Gelkarte wird basierend auf den Empfehlungen des Herstellers mit 1+ bis 4+ bewertet.

   Für die Ergebnisinterpretation gilt: Wenn der Score des Erythrozyten-Screening-Panels positiv ist, wobei 3/3 der INTERCEPT-Erythrozyten entweder „hohe“ und/oder „niedrige“ Konzentrationen von Acridin-Addukten aufweisen UND 0/3 mit den entsprechenden unbehandelten Erythrozyten der Kontrolle, wird die Probe klassifiziert als „reaktiv für INTERCEPT RBC-Antikörper.

   Die Antikörperbestätigung und -charakterisierung wird im ARC Immunohematology Reference Laboratory, Pomona, durchgeführt und umfasst die Acridinspezifität durch Agglutinationshemmung (Neutralisierung) unter Verwendung eines löslichen Acridinanalogs von Amustalin, Antikörpertiter, Antikörperisotyp und thermische Amplitude.

   Wenn das Vorhandensein eines für INTERCEPT RBC spezifischen Antikörpers festgestellt wird, bestimmt dies nicht, ob dieser Antikörper physiologisch aktiv oder klinisch signifikant ist, dies kann nur anhand eines der folgenden Kriterien bestimmt werden, die auf eine beschleunigte RBC-Clearance ohne aktive Blutung hinweisen: organvermittelte Erythrozyten-Sequestrierung, schwere erythroide Hypoplasie oder andere gleichzeitige medizinische Ursache für eine akute Anämie, die nicht mit einer Transfusion in Zusammenhang steht.

   Nachweis und Bestätigung von Antikörpern, die für BioRBC spezifisch sind Wie bei INTERCEPT-RBCs werden die Probanden vor der Transfusion auf das Vorhandensein von natürlich vorkommenden oder bereits vorhandenen Antikörpern gegen BioRBC gescreent (18). Dies erfolgt unter Verwendung der gleichen Gelkarten-Agglutination wie für die INTERCEPT-RBCs, jedoch unter Verwendung von BioRBCs, die mit Serum oder Plasma des Patienten inkubiert wurden. Kurz gesagt, 50 ul 0,8 % Hämatokrit-Ziel-BioRBC-N oder unmarkierte RBC werden von einem Blut-GpO-Spender hergestellt und der Gelsäule hinzugefügt. Subjektplasma (25 µl) wird zu den Ziel-RBCs gegeben und 30 min lang bei 37 °C inkubiert. Anschließend werden Gelkarten für 10 min zentrifugiert. Das Vorhandensein von BioRBC-Agglutination wird unter Verwendung der gradationsspezifischen Definitionen der Reaktivität des Herstellers quantifiziert. Reaktivitätswerte basieren auf den Herstellerempfehlungen 0–4+, aber zusätzlich wird ein Wert von 1+ (d. h. Agglutination in der unteren Hälfte der Matrix) weiter in drei zunehmend reaktive 1+-Bezeichnungen unterteilt: 1) ± zeigt an ein schräges Pellet mit einigen agglutinierten RBC; 2) 1w zeigt ein schräges Pellet mit stärker agglutinierten RBC an; und 3) 1+ zeigt ein aufgebrochenes RBC-Pellet mit mehr agglutinierten Zellen an. Wie beim Nachweis von INTERCEPT-spezifischen Antikörpern bestimmt der Nachweis von spezifischen Antikörpern gegen BioRBC nicht, ob diese Antikörper physiologisch aktiv oder klinisch signifikant sind.

   Bestätigungstests zur Induktion von BioRBC-induzierten Antikörpern werden durch Agglutinationshemmung (Neutralisation) mit Biotinverbindungen durchgeführt, z. B. Biocytin, biotinylierte Gelatine oder biotinyliertes Albumin sind in der Lage, Anti-BioRBC-Antikörper zu neutralisieren. Bisher werden alle identifizierten, bereits existierenden, natürlich vorkommenden Anti-BioRBC-Antikörper durch Biotinverbindungen neutralisiert, während erwartet wird, dass die induzierten Anti-BioRBC-Antikörper durch BioRBC und nicht durch freies Biotin gehemmt werden, wie zuvor von unserer Gruppe veröffentlicht wurde (5).

   Aufzeichnung und Meldung von unerwünschten Ereignissen Definition von unerwünschten Ereignissen Ein UE ist definiert als ein unerwünschtes medizinisches Ereignis bei einem Patienten oder Probanden einer klinischen Prüfung, dem ein pharmazeutisches Produkt verabreicht wurde und das nicht unbedingt in einem kausalen Zusammenhang mit dieser Behandlung steht. Ein unerwünschtes Ereignis kann jedes ungünstige und unbeabsichtigte Zeichen (einschließlich eines anormalen Laborbefunds), Symptom oder Krankheit sein, die zeitlich mit dem Arzneimittel (in dieser Studie BioRBC und INTERCEPT RBC) in Verbindung steht, unabhängig davon, ob es mit dem Arzneimittel in Zusammenhang steht oder nicht (International Conference on Harmonisation der Technischen Anforderungen für die Registrierung von Humanarzneimitteln (ICH-E2A, Abschnitt 2.1)

   Definition eines schwerwiegenden unerwünschten Ereignisses

   Einige UE gelten als „ernsthaft“, wenn das Ergebnis des Ereignisses eine Bedrohung für das Leben oder den Funktionszustand eines Patienten darstellt. Ein schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis (SAE) ist ein UE, das zu den folgenden Ergebnissen führt:

   • Führt zum Tod
   • Lebensgefährlich
   • Erfordert einen stationären Krankenhausaufenthalt oder die Verlängerung eines bestehenden Krankenhausaufenthalts
   • Führt zu anhaltender oder erheblicher Behinderung/Unfähigkeit
   • Ist eine angeborene Anomalie/Geburtsfehler
   • Wichtige medizinische Ereignisse, die möglicherweise nicht zum Tod führen, lebensbedrohlich sind oder einen Krankenhausaufenthalt erfordern, können als schwerwiegend angesehen werden, wenn sie nach angemessener medizinischer Beurteilung den Patienten gefährden und/oder einen Eingriff erfordern können, um eines der hier aufgeführten Ergebnisse zu verhindern Definition (ICH E2A Abschnitt II/B).

   Definition eines unerwünschten Geräteeffekts Ein unerwünschter Produkteffekt (ADE) ist definiert als ein unerwünschtes Ereignis im Zusammenhang mit der Verwendung eines medizinischen Prüfgeräts.

   Unerwartete nachteilige Wirkung Definition Eine unvorhergesehene nachteilige Wirkung (UAE) ist definiert als jede schwerwiegende nachteilige Wirkung auf die Gesundheit oder Sicherheit oder ein lebensbedrohliches Problem oder Tod, das durch den Prozess verursacht oder damit in Verbindung gebracht wird, wenn diese Wirkung, dieses Problem oder dieser Tod keine war zuvor im Prüfplan oder -antrag (einschließlich eines ergänzenden Plans oder Antrags) hinsichtlich Art, Schweregrad oder Inzidenzgrad identifiziert wurden, oder jedes andere unvorhergesehene schwerwiegende Problem im Zusammenhang mit einem Produkt, das die Rechte, die Sicherheit oder das Wohlergehen von Probanden betrifft (21 CFR 812.3).

   Melden von unerwünschten Ereignissen UEs werden auf dem entsprechenden Fallberichtsformular (CRF) dokumentiert, unabhängig davon, ob sie als mit dem Studienprodukt assoziiert eingestuft wurden oder nicht.

   Wenn ein UE die Kriterien eines schwerwiegenden unerwünschten Ereignisses (SAE) oder einer unerwarteten unerwünschten Gerätewirkung (UAE) wie oben beschrieben erfüllt, bricht der Sponsor/PI die Studie ab und benachrichtigt die FDA innerhalb von 7 Tagen.

   Die Ermittler werden die geltenden behördlichen Anforderungen in Bezug auf die Meldung schwerwiegender unerwünschter Ereignisse an den IRB erfüllen. Ein Prüfarzt muss dem Sponsor und dem überprüfenden IRB so schnell wie möglich einen Bericht über jede unvorhergesehene unerwünschte Wirkung des Produkts vorlegen, die während einer Untersuchung auftritt, jedoch in keinem Fall später als 10 Arbeitstage, nachdem der Prüfarzt zum ersten Mal von der Auswirkung erfahren hat.

   Der Sponsor wird mutmaßliche unerwartete schwerwiegende Nebenwirkungen und/oder unerwartete unerwünschte Wirkungen des Geräts melden, um die geltenden regulatorischen Anforderungen zu erfüllen.

   Bewertung der Ernsthaftigkeit und Schwere eines unerwünschten Ereignisses Der Prüfarzt muss beurteilen, ob das unerwünschte Ereignis nicht schwerwiegend oder schwerwiegend ist, letzteres ist definiert als ein Ereignis, das zu einem der folgenden Ergebnisse geführt hat: Tod, ein lebensbedrohliches Ereignis (Ergebnisse bei unmittelbarer Todesgefahr durch die eingetretene Reaktion), stationärer Krankenhausaufenthalt oder Verlängerung eines bestehenden Krankenhausaufenthaltes, einer anhaltenden oder erheblichen Behinderung/Unfähigkeit, einer angeborenen Anomalie/Geburtsfehler oder einem anderen wichtigen medizinischen Ereignis.

   Der Begriff „schwer“ wird verwendet, um die Intensität (Schwere) eines bestimmten Ereignisses (wie in leicht, mäßig oder schwer) zu beschreiben; das Ereignis selbst kann jedoch von relativ geringer medizinischer Bedeutung sein (z. B. starke Kopfschmerzen). Schweregrad ist nicht dasselbe wie „ernst“, was auf Patienten-/Ereignisergebnissen oder Behandlungskriterien im Zusammenhang mit Ereignissen basiert, die eine Bedrohung für das Leben oder den Funktionsstatus eines Patienten darstellen.

   Seriousness (nicht Severity) dient als Richtschnur für die Definition von regulatorischen Meldepflichten. Die Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE, Version 4.03) des National Cancer Institute werden verwendet, um die Intensität/Schwere eines Ereignisses zu bewerten und zu klassifizieren.

   Bewertung des kausalen Zusammenhangs eines unerwünschten Ereignisses Der Prüfarzt wird beurteilen, ob eine vernünftige Möglichkeit besteht, dass die Blutentnahme oder die Infusion der Erythrozyten der Studie ein unerwünschtes Ereignis verursacht oder dazu beigetragen hat.

   Die Bestimmung, ob eine vernünftige Möglichkeit besteht, dass die Erythrozytenkomponente der Studie ein unerwünschtes Ereignis verursacht oder dazu beigetragen hat, umfasst die Bewertung zeitlicher Zusammenhänge, biologischer Plausibilität, Dechallenge/Rechallenge-Informationen (falls verfügbar), Assoziation (oder Fehlen einer Assoziation) mit der Grunderkrankung und Vorhandensein (oder Fehlen) einer wahrscheinlicheren Ursache.

   Die Skala zur Beurteilung des kausalen Zusammenhangs eines unerwünschten Ereignisses mit der Erythrozytenkomponente der Studie (Imputability Levels) folgt:

   Kausalitätsbewertungsskala Imputability Level Explanation Explanation Ausgeschlossen Wenn es zweifelsfrei schlüssige Beweise dafür gibt, dass das unerwünschte Ereignis alternativen Ursachen zugeschrieben werden kann. Unwahrscheinlich Wenn die Evidenz eindeutig dafür spricht, das unerwünschte Ereignis anderen Ursachen als der Erythrozytenkomponente der Studie zuzuschreiben.

   1. Möglich: Wenn die Beweise für die Zuordnung eines unerwünschten Ereignisses entweder zur RBC-Komponente oder zu alternativen Ursachen unbestimmt sind.
   2. Wahrscheinlich: Wahrscheinlich Wenn die Evidenz eindeutig dafür spricht, das unerwünschte Ereignis der RBC-Komponente zuzuschreiben.
   3. Sicher: Wenn es zweifelsfrei schlüssige Beweise dafür gibt, dass das unerwünschte Ereignis der RBC-Komponente zugeschrieben wird.

   Bewertung der Intensität eines unerwünschten Ereignisses Der Prüfarzt muss die Intensität (Schwere) jedes unerwünschten Ereignisses anhand der Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) des National Cancer Institute bewerten.

   Nachverfolgung von unerwünschten Ereignissen Alle SUE werden bis zur Auflösung weiterverfolgt, oder der Prüfarzt beurteilt das Ereignis als chronisch oder stabil.

   Stoppregeln

   Die folgende SR wird auf alle Studienteilnehmer während der gesamten Studie angewendet, wenn der Sponsor/PI dieser Studie (José Cancelas, M.D., Ph.D.) und/oder der klinische Monitor (Patricia Carey, MD, Professorin für Pathologie, Ärztlicher Direktor, Hoxworth Blood Center)) stimmen zu, dass eines der folgenden Ereignisse aufgetreten ist:

   1. Ein SAE, das möglicherweise, wahrscheinlich oder definitiv mit der Infusion von autologem BioRBC in Zusammenhang steht;
   2. Ein UE im Zusammenhang mit der Infusion von autologem BioRBC gefährdet die Gesundheit oder Sicherheit des Probanden;
   3. Ein AE, das einen medizinischen oder chirurgischen Eingriff im Zusammenhang mit der Infusion von autologem BioRBC erfordert, ist erforderlich, um das Auftreten eines SUE zu verhindern;
   4. Ein Hämolyseereignis nach der Infusion, wie durch Anti-BioRBC-Antikörpernachweis unter Verwendung des von unserer Gruppe entwickelten IgG-Gelkartentests bewertet.

   Wenn eine der oben genannten Bedingungen eintritt, wird die Studie angehalten und der FDA und dem IRB gemeldet, wie es die aktuellen Vorschriften erfordern, um die Fortsetzung der Studie zu beurteilen. Infundierte Probanden werden so lange nachbeobachtet, wie es erforderlich ist, um die Folgen der identifizierten UE zu identifizieren. Da im Rahmen dieser Studie keine zusätzlichen experimentellen BioRBC-Transfusionen verabreicht werden, versteht man unter „Fortsetzung der Studie“ eine Fortsetzung der Überwachung biologischer Proben, wie sie bereits in dieser Studie beschrieben wurde, aber möglicherweise einschließlich anderer Tests, die von der für angemessen erachtet werden Studiensponsor/PI, klinischer Monitor, FDA und/oder IRB.