Recuperação e vida útil de glóbulos vermelhos de unidades de sangue armazenadas com redução de patógenos (BIO-CR-RBC)

Cada indivíduo receberá uma infusão de RBCs INTERCEPT autólogos, marcados com rádio e marcados com BioRBC (RBCs de teste) e uma infusão de RBCs não tratados marcados com BioRBC autólogos (RBCs de controle) concomitantemente. Cada infusão será de aproximadamente 20 mL, ou seja, 10 mL de RBC marcado com cromo 51 e 10 mL de BioRBC-6 ou BioRBC-18, que serão estratificados conforme indicado acima com base na designação de Teste ou Controle.

Conformidade com o tratamento Indivíduos saudáveis ​​que entenderem os compromissos do estudo e assinarem o consentimento informado serão incluídos no estudo. A adesão ao tratamento e os testes de acompanhamento serão rastreados pelo Investigador, registrados no formulário de relatório de caso (CRF) e monitorados pelo Patrocinador.

AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA

Parâmetros de eficácia

Os parâmetros de eficácia incluem o seguinte:

Ponto final primário de eficácia (24)

- Recuperação 24 horas após a infusão de hemácias autólogas armazenadas em AS-5 por 35 dias e depois marcadas com 51Cr ou biotina.

Desfechos secundários de eficácia (25)

• Vida útil média de hemácias autólogas armazenadas por 35 dias e depois marcadas com 51Cr ou biotina
• Vida útil média (T50) de hemácias autólogas armazenadas por 35 dias e depois marcadas com 51Cr ou biotina

• Área sob a curva (AUC) determinada usando pontos de dados coletados para vida útil de RBC de RBCs autólogos, radiomarcados ou BioRBCs

  e) Determinação da dose e duração

Métodos e Tempo dos Parâmetros de Eficácia Este estudo consiste em um único período de tratamento em que o controle biotinilado (usando uma densidade de superfície de RBC de 6 ou 18 mcg de sulfo-NHS-biotina por mL de RBC) é administrado, ou seja, co-infundido em um único ponto em tempo com RBC biotinilados tratados com Teste INTERCEPT (usando uma concentração de 18 ou 6 mcg de sulfo-NHS-biotina por mL de RBC) e RBC tratados com INTERCEPT, radiomarcados (51Cr). Todos os 6 indivíduos receberão RBCs de controle e tratados com S-303 (teste) concomitantemente e a única diferença entre os dois conjuntos de 3 indivíduos será o nível de biotinilação do controle ou RBC de teste.

O estudo é estratificado e o RBC de controle ou teste será marcado alternativamente com 6 ou 18 mcg de sulfo-NHS-biotina por mL de RBC. As hemácias de três indivíduos (sujeitos 1, 3 e 5) serão marcadas com 6 e 18 mcg de sulfo-NHS-biotina por mL de hemácias para controle e teste de hemácias, respectivamente. Outros três indivíduos (sujeitos 2, 4 e 6) serão marcados com 6 e 18 mcg de sulfo-NHS-biotina por mL de hemácias para controle e teste de hemácias, respectivamente. O objetivo desta estratificação é garantir que nenhum viés seja introduzido pela densidade do rótulo de biotina em um dos braços do estudo.

f) Descrição das observações e medições

No dia 0 de cada período de tratamento, o indivíduo doará duas unidades de hemácias compactadas (doação automática de hemácias duplas, sistema de aférese Trima - Terumo BCT); as unidades serão reduzidas de leucócitos por filtração em linha e os concentrados de hemácias serão preparados em solução aditiva (AS-5).

Uma das duas unidades será armazenada imediatamente a 1-6ºC por 35 dias (unidade de controle). Este componente RBC convencional representa os RBCs de controle neste estudo.

A unidade de RBC de teste será preparada por processamento usando o Sistema de Sangue INTERCEPT para Glóbulos Vermelhos. Parâmetros bioquímicos e morfológicos in vitro dos componentes de RBC do estudo (Tabela 1) serão medidos no Dia 0 após a preparação de concentrados de RBC em AS-5 (antes do tratamento do estudo), pós-processamento e antes do armazenamento (somente teste) e novamente no dia 35 (antes da infusão de volta aos sujeitos do estudo) para avaliar a qualidade de RBC das unidades de RBC processadas/armazenadas. Os dados coletados para as características in vitro serão resumidos por meio de estatística descritiva.

Tabela 1. Parâmetros bioquímicos analisados ​​no dia 0 e no dia 35 de armazenamento das unidades de hemácias controle e tratadas.

Parâmetro Conteúdo/unidade de Hb Hemólise pH pO2 pCO2 Glicose (extracelular) Lactato (extracelular) Bicarbonato (extracelular) Sódio (extracelular) Potássio (extracelular)

No dia 35 de armazenamento de RBC em cada período de tratamento, uma alíquota de RBCs de controle será biotinilada (6 ou 18 mcg/mL). Da unidade Teste serão sorteadas duas alíquotas; a primeira alíquota será radiomarcada com 51Cr e a segunda alíquota será biotinilada a 6 ou 18 mcg/mL. A reinfusão das duas amostras de hemácias autólogas biotiniladas (controle e teste) juntamente com as hemácias autólogas marcadas com 51Cr (teste) medirá a recuperação e a sobrevivência (total aproximado: 20 mcCi). Também no dia 35, uma amostra de 20 mL de sangue fresco será coletada do sujeito e as hemácias marcadas com 99mTc e Bio-54. A reinfusão de RBC 99mTc fresco e Bio-54 fresco permitirá a determinação do volume de sangue do paciente ou do número de RBC circulantes.

Cinco tipos de hemácias serão misturados e infundidos: a) hemácias frescas marcadas com 99mTc e BioRBC-54; b) RBC fresco marcado com Bio-54; c) RBC armazenado, controle ou teste biotinilado na densidade 6 mcg/mL; d) RBC armazenado, teste ou controle biotinilado na densidade 18 mcg/mL; e, e) Armazenado, Teste, RBC marcado com 51Cr. Todas as alíquotas serão rotuladas separadamente e misturadas para um volume de ~50 mL. Os 50 mL de hemácias autólogas serão infundidos através de uma veia periférica usando uma agulha borboleta de calibre 18-19 (a uma taxa aproximada de 5 mL/min).

Amostras de sangue, do braço contralateral do sujeito, serão coletadas imediatamente antes da infusão e em 5, 7,5, 10, 12,5, 15, 20, 30 minutos e 24 horas após o término da infusão para permitir a extrapolação para T=0 para determinação de 51Cr de volume de sangue como publicado anteriormente por nosso grupo (16, 17, 26-30).

Amostras de sangue adicionais serão coletadas 48 e 72 horas e 7 dias após a infusão, e depois semanalmente até 28 dias (dias 37, 38, 42, 49, 56 e 63 pós-infusão) e quinzenais a partir de então (dias 77, 91, 105, 119, 133, 147). Após a coleta da amostra de sangue final no Período de Tratamento 2, os indivíduos serão liberados do estudo.

Após a conclusão do estudo, cada um dos 6 indivíduos terá fornecido 2 unidades de sangue total e receberá 1 infusão de RBCs de teste ou controle radiomarcados autólogos e 1 infusão de glóbulos vermelhos de teste ou controle radiomarcados autólogos.

As avaliações do estudo usadas para avaliar a eficácia e a segurança são apresentadas abaixo (Seção 1).

g) Procedimentos clínicos, exames laboratoriais, monitoramento de efeitos de drogas e minimização de riscos

Seção 1: Avaliações do estudo e coleta de dados Triagem: Dia -28 a 0

• Explique o estudo ao assunto
• Obtenha o consentimento informado assinado
• Histórico médico
• Exame físico de doador de sangue
• Sinais vitais
• Medicamentos concomitantes, ou seja, outros que não os excluídos
• Amostras para testes laboratoriais: painel de triagem de hematologia, química sérica e teste de doador de sangue (microbiológico, ABO/Rh) (seguindo os requisitos do FDA/AABB).
• Teste de Antiglobulina Direto e Indireto (DAT/IAT)
• Tipo ABO e Rh (parte do painel de doadores)
• Amostra de soro ou plasma para testar anticorpo específico para RBC INTERCEPT e anticorpo específico para RBC biotinilado
• Estratificar indivíduos para receber BioRBC-6 ou BioRBC-18 para hemácias tratadas com INTERCEPT
• Amostra de soro ou plasma para teste de status de ferro: ferritina (sendo aceitável, ferritina > 26 ng/mL) Antes da coleta de sangue, dia 0
• Doença intercorrente
• Sinais vitais
• Medicamentos concomitantes
• Hemoglobina/hematócrito

Coleta dupla de hemácias, parâmetros e cronograma do procedimento de coleta Trima do dia 0 (relação AC, etc.)

1. Taxa de anticoagulante (AC) A taxa de CA é um parâmetro configurável no Sistema Trima. As unidades de glóbulos vermelhos serão coletadas em uma proporção de sangue total para anticoagulante de 11.

2. Tempo de execução O tempo de execução será limitado a um máximo de 120 minutos. Os produtos duplos de hemácias serão coletados ao usar os conjuntos de plasma e hemácias Trima e devem levar aproximadamente 30 minutos no total.

   Componente RBC - Antes do Estudo Dia de Tratamento 0

   - Colete amostras das unidades de controle e teste de RBC do estudo para avaliações de laboratório in vitro

   Componente RBC - Tratamento do Estudo, Dia 0-1

   • Processe e/ou execute o Processo INTERCEPT para hemácias em uma das duas unidades de sangue doado.
   • Colete uma amostra do componente Test RBC (avaliações in vitro)
   • Coloque os componentes de RBC de controle e teste no armazenamento tradicional do banco de sangue (1-6ºC).

   Pós Coleta de Sangue, Dia 1 (24±6 horas após a doação)

   • Medicamentos concomitantes
   • Doença intercorrente
   • Coletar EAs e SAEs (Nota: Esses dados podem ser coletados por telefone)

   RADIOMARCAÇÃO, BIOTINILAÇÃO E REINFUSÃO DE ALÍQUENTES AUTÓLOGOS DE RBC Antes da Reinfusão de autólogo marcado, Dia 35 (dentro de 6 horas antes da infusão)

   • Colete uma amostra fresca de 20 mL de sangue do sujeito para rotulagem de 99mTc e BioRBC-54
   • tipo ABO
   • Confirme a identidade do componente do estudo de hemácias pela análise administrativa da documentação da cadeia de custódia e dos rótulos das bolsas de sangue, seguindo os padrões da indústria e os regulamentos da AABB/FDA
   • Amostras para exames laboratoriais: Hematologia e química sérica
   • Teste de gravidez (se mulher)
   • Amostras de soro ou plasma para anticorpos INTERCEPT RBC e anticorpos anti-BioRBC
   • Amostras para recuperação de hemácias, massa, tempo de vida
   • Doença intercorrente
   • Sinais vitais
   • Altura e peso
   • Medicamentos concomitantes
   • Colete EAs e SAEs desde a doação.

   Componente RBC:

   Antes da infusão, dia 35

   - Rotular alíquota de 10 mL de RBC do estudo de 35 dias com 51Cr

   • Rotular alíquota fresca de 10 mL de RBC do sujeito com 99mTc e BioRBC-54
   • Colete uma amostra do componente de RBC do estudo (para avaliações in vitro)

   Infusão de RBCs de Estudo Autólogo, Dia 35

   - Infusão de uma mistura de cinco alíquotas de ~10 mL (total ~50 mL) de sangue autólogo (todos misturados e infundidos a uma taxa de 5-7 mL/min) incluindo: a) RBC fresco marcado com 99mTc e BioRBC-54; b) RBC fresco marcado com Bio-54; c) RBC armazenado, controle ou teste biotinilado na densidade 6 mcg/mL; d) RBC armazenado, teste ou controle biotinilado na densidade 18 mcg/mL; e, e) Armazenado, Teste, RBC marcado com 51Cr. Todas as alíquotas serão rotuladas separadamente e misturadas para um volume de ~50 mL. Os 50 mL de hemácias autólogas serão infundidos através de uma veia periférica usando uma agulha borboleta de calibre 18-19 (a uma taxa aproximada de 5 mL/min). (Observação: o restante das duas unidades de hemácias de controle tratadas e não tratadas com INTERCEPT de 35 dias são descartadas.)

   • Medicamentos concomitantes

   • Colete AEs e SAEs

     • Testes hematológicos: hemograma completo incluindo hemoglobina, hematócrito, plaquetas, MCV, MCH, MCHC, RDW ** Testes de química sérica: cálcio, bicarbonato, cloreto, fosfato inorgânico, potássio, sódio, colesterol, glicose, proteína total, triglicerídeos, LDH, ALT, AST, bilirrubina total, BUN e creatinina.

       • Inclui: ferritina sérica ou plasmática, ferro, capacidade de ligação do ferro, saturação da transferrina † Sinais vitais: frequência cardíaca, frequência respiratória, pressão arterial e temperatura. Se houver febre dentro de 24 horas após a infusão (temperatura > 39°C ou > 38°C com calafrios) cultive o indivíduo e a bolsa de hemácias.

   As avaliações e a coleta de dados começando no dia seguinte à infusão de hemácias até o dia 147 do estudo (dia 112 pós-infusão) são mostradas na Tabela 1.

   AVALIAÇÃO DE SEGURANÇA O momento das avaliações de segurança do estudo é apresentado na Tabela.

   Parâmetros de segurança

   Os pontos finais de segurança incluem o seguinte:

   Ponto final de segurança primário

   • Incidência de anticorpo específico para hemácias tratadas com INTERCEPT
   • Incidência de anticorpo específico para hemácias biotiniladas Ponto final de segurança secundário
   • Incidência de eventos adversos graves e adversos, conforme descrito abaixo na seção intitulada "Registro e notificação de eventos adversos". O dispositivo médico do Sistema de Tratamento INTERCEPT será monitorado quanto a deficiências do dispositivo, incluindo mau funcionamento e efeitos adversos do dispositivo.

   Métodos e Tempo dos Parâmetros de Segurança Neste estudo, o Patrocinador/Investigador, J.A. Cancelas coletará e registrará eventos adversos (EAs) por 24 horas após a coleta de cada unidade de sangue total e por 24 horas após cada infusão de hemácias do estudo. Eventos adversos graves (SAE) serão coletados e registrados desde o momento em que a primeira unidade de sangue total é coletada até a conclusão do estudo (Tabela).

   Os indivíduos serão monitorados ativamente quanto a EAs durante a coleta de sangue e durante as infusões de hemácias do estudo e até receberem alta. Após a alta, todos os EAs relatados à equipe qualificada do estudo serão registrados. Os dados de EA e SAE podem ser coletados por telefone ou pessoalmente pela equipe do estudo. Os sinais vitais são coletados antes e após cada infusão do estudo. No caso de um sujeito desenvolver dentro de 24 horas após uma transfusão de glóbulos vermelhos do estudo febre pós-infusão, definida como uma temperatura >39°C ou uma temperatura >38°C com calafrios (rigores) ou sinais e sintomas consistentes com sepse bacteriana, o sangue do sujeito será cultivado e o Hemocentro será notificado para cultivar as hemácias remanescentes em um segmento ou os componentes residuais das hemácias de teste ou controle.

   Nosso grupo testará o soro ou plasma do sujeito para anticorpos específicos para RBCs INTERCEPT e BioRBC; essas amostras serão obtidas de cada indivíduo antes da infusão, 14 dias após a infusão e 28 dias após a infusão e mensalmente a partir de então até o dia 147 do estudo (ver Tabela). Se for identificado um anticorpo específico para hemácias tratadas com INTERCEPT, as amostras serão enviadas para um laboratório independente para confirmação (UCLA/Cruz Vermelha Americana, Pomona). Amostras de sangue para painéis de hematologia e química serão obtidas de cada indivíduo. Dias de estudo: pré-infusão (dia 35), 24 horas após a infusão (dia 36), 56 dias após a infusão (dia 91) e 112 dias após a infusão (dia 147 , ao final do estudo). Achados laboratoriais clinicamente significativos serão registrados como eventos adversos. As avaliações laboratoriais estão identificadas na Tabela 1.

   Reações transfusionais Embora as reações transfusionais sejam improváveis ​​devido ao pequeno volume de infusão, as reações transfusionais clinicamente significativas serão registradas como eventos adversos.

   Sujeitos com suspeita de sepse relacionada à transfusão serão monitorados quanto a eventos adversos relacionados à infusão, incluindo sepse relacionada à infusão após a infusão do estudo. Para fornecer uma amostra inalterada da alíquota de infusão de sangue transfundida em um indivíduo, o restante dessa alíquota será enviado para cultura bacteriana.

   No caso de um indivíduo desenvolver febre pós-infusão, definida como uma temperatura >39°C ou uma temperatura >38°C com calafrios (rigores) ou sinais e sintomas consistentes com sepse bacteriana dentro de 24 horas após uma infusão de hemácias de estudo, o sangue do sujeito será cultivado e o restante componente armazenado será cultivado.

   As culturas serão realizadas por investigadores do Hoxworth Blood Center de acordo com os procedimentos operacionais padrão do Hoxworth Blood Center. Se as bactérias forem recuperadas do sangue do paciente e do componente RBC, as amostras dos isolados serão enviadas ao laboratório do Hospital da Universidade de Cincinnati para determinar se os organismos recuperados são idênticos. A sepse induzida por infusão não será estabelecida a menos que o(s) mesmo(s) organismo(s) seja(m) recuperado(s) tanto do componente RBC quanto do sujeito do estudo.

   Detecção e confirmação de anticorpo específico para RBCs INTERCEPT Embora não seja previsto que ocorra neste estudo devido à exposição limitada ao RBC de teste, todos os indivíduos serão testados quanto à presença de anticorpo específico para RBC tratados com INTERCEPT no início do estudo (anticorpo de ocorrência natural) e em momentos específicos durante o estudo (Tabela 1).

   A presença de anticorpo será avaliada usando um IAT de cartão de gel formalmente validado que é usado rotineiramente em muitos centros de sangue para testes de compatibilidade de transfusão em conjunto com um painel de RBCs INTERCEPT reagentes congelados. O painel de triagem de hemácias congeladas é composto de hemácias reagentes de 3 doadores especificamente fenotipados do grupo sanguíneo O e é análogo aos painéis de triagem de anticorpos de rotina usados ​​na prática regular de banco de sangue. Cada célula no painel de 3 consiste em hemácias não tratadas, células portadoras de um nível "alto" de adutos de acridina e células portadoras de um nível "baixo" de adutos de acridina. O painel de triagem foi concebido como um teste de triagem sensível para a presença de anticorpos INTERCEPT RBC na presença dos aloanticorpos mais comuns. A aglutinação do cartão de gel será pontuada de 1+ a 4+ com base na recomendação do fabricante.

   Para interpretação do resultado, se a pontuação do painel de triagem de hemácias for positiva com 3/3 das hemácias INTERCEPT contendo níveis "altos" e/ou "baixos" de adutos de acridina E com 0/3 com as hemácias não tratadas de controle correspondentes, a amostra é classificada como "reativo para anticorpos INTERCEPT RBC.

   A confirmação e caracterização do anticorpo será realizada no ARC Imunohematology Reference Laboratory, Pomona e incluirá a especificidade da acridina por inibição da aglutinação (neutralização) usando um análogo de acridina solúvel de amustalina, título de anticorpo, isotipo de anticorpo e amplitude térmica.

   Se for estabelecida a presença de anticorpo específico para RBC INTERCEPT, isso não determina se esse anticorpo é fisiologicamente ativo ou clinicamente significativo, isso só pode ser determinado por qualquer um dos seguintes critérios indicativos de depuração acelerada de glóbulos vermelhos na ausência de sangramento ativo, sequestro de hemácias mediado por órgão, hipoplasia eritroide grave ou outra causa médica concomitante de anemia aguda não associada à transfusão.

   Detecção e confirmação de anticorpo específico para BioRBC Tal como acontece com os RBCs INTERCEPT, os indivíduos serão rastreados antes da transfusão quanto à presença de anticorpo natural ou pré-existente para BioRBC (18). Isso será feito usando a mesma aglutinação de cartão de gel que para os RBCs INTERCEPT, mas usando BioRBCs incubados com soro ou plasma em questão. Resumidamente, 50 µL de BioRBC-N alvo de hematócrito a 0,8% ou RBC não marcado serão preparados a partir de um doador de GpO sanguíneo e adicionados à coluna de gel. O plasma sujeito (25 µL) é adicionado aos RBCs alvo e incubado a 37˚C por 30 min. Os cartões de gel são subsequentemente centrifugados durante 10 min. A presença de aglutinação BioRBC é quantificada usando as definições de reatividade específicas de gradação do fabricante. As pontuações de reatividade serão baseadas na recomendação do fabricante 0-4+, mas, além disso, uma pontuação de 1+ (ou seja, aglutinação na metade inferior da matriz) será posteriormente subclassificada em três designações 1+ cada vez mais reativas: 1) ± indica um pellet inclinado com algumas hemácias aglutinadas; 2) 1w indica um pellet inclinado com hemácias mais aglutinadas; e 3) 1+ indica um sedimento de RBC interrompido com mais células aglutinadas. Tal como acontece com a detecção de anticorpos específicos do INTERCEPT, a detecção de anticorpos específicos para BioRBC não determina se esses anticorpos são fisiologicamente ativos ou clinicamente significativos.

   Os testes confirmatórios da indução de anticorpos induzidos por BioRBC serão realizados por inibição da aglutinação (neutralização) com compostos de biotina, por exemplo, biocitina, gelatina biotinilada ou albumina biotinilada é capaz de neutralizar anticorpos anti-BioRBC. Até agora, todos os anticorpos anti-BioRBC de ocorrência natural e preexistentes identificados são neutralizados por compostos de biotina, enquanto se espera que os anticorpos anti-BioRBC induzidos sejam inibidos por BioRBC e não por biotina livre, conforme publicado anteriormente por nosso grupo (5).

   Registro e notificação de eventos adversos Definição de evento adverso Um EA é definido como qualquer ocorrência médica desfavorável em um paciente ou sujeito de investigação clínica ao qual foi administrado um produto farmacêutico e que não tem necessariamente uma relação causal com esse tratamento. Um evento adverso pode ser qualquer sinal desfavorável e não intencional (incluindo um achado laboratorial anormal), sintoma ou doença temporariamente associada ao medicamento (neste estudo BioRBC e INTERCEPT RBC), relacionado ou não ao medicamento (International Conference on Harmonization de Requisitos Técnicos para Registro de Medicamentos para Uso Humano (ICH-E2A, seção 2.1)

   Definição de Evento Adverso Grave

   Alguns EAs são considerados "graves" quando o resultado do evento representa uma ameaça à vida ou ao estado funcional do paciente. Um evento adverso grave (EAG) é um EA que resulta nos seguintes resultados:

   • Resultados em morte
   • risco de vida
   • Requer internação hospitalar ou prolongamento da internação existente
   • Resulta em deficiência/incapacidade persistente ou significativa
   • É uma anomalia congênita/defeito de nascimento
   • Eventos médicos importantes que podem não resultar em morte, ameaçar a vida ou exigir hospitalização podem ser considerados graves quando, com base no julgamento médico apropriado, podem colocar em risco o indivíduo e/ou podem exigir intervenção para prevenir um dos resultados listados neste definição (ICH E2A seção II/B).

   Definição de efeito adverso do dispositivo Um efeito adverso do dispositivo (ADE) é definido como um evento adverso relacionado ao uso de um dispositivo médico de investigação.

   Definição de efeito adverso imprevisto Um efeito adverso imprevisto (EAU) é definido como qualquer efeito adverso grave na saúde ou segurança ou qualquer problema com risco de vida ou morte causado por ou associado ao processo, se esse efeito, problema ou morte não foi previamente identificado em natureza, gravidade ou grau de incidência no plano ou aplicativo investigativo (incluindo um plano ou aplicativo suplementar), ou qualquer outro problema grave imprevisto associado a um dispositivo relacionado aos direitos, segurança ou bem-estar dos sujeitos (21 CFR 812.3).

   Notificação de eventos adversos Os EAs serão documentados no formulário de relato de caso (CRF) apropriado, independentemente de serem ou não classificados como associados ao produto do estudo.

   Se um EA atender aos critérios de um evento adverso grave (SAE) ou efeito adverso imprevisto do dispositivo (EAU), conforme descrito acima, o Patrocinador/PI interromperá o estudo e notificará o FDA em 7 dias.

   Os Investigadores cumprirão os requisitos regulamentares aplicáveis ​​relacionados à notificação de eventos adversos graves ao IRB. Um Investigador deve enviar ao Patrocinador e ao IRB de revisão um relatório de qualquer efeito adverso imprevisto do dispositivo ocorrendo durante uma investigação o mais rápido possível, mas em nenhum caso depois de 10 dias úteis após o Investigador tomar conhecimento do efeito.

   O Patrocinador notificará suspeitas de reações adversas graves inesperadas e/ou efeitos adversos imprevistos do dispositivo para cumprir com o(s) requisito(s) regulatório(s) aplicável(is).

   Avaliação da gravidade e gravidade de um evento adverso O investigador deve avaliar se o evento adverso é não sério ou grave, este último é definido como um evento que resultou em qualquer um dos seguintes resultados: morte, um evento com risco de vida (resultados em risco imediato de morte pela reação que ocorreu), internação hospitalar ou prolongamento de hospitalização existente, deficiência/incapacidade persistente ou significativa, anomalia congênita/defeito congênito ou outro evento médico importante.

   O termo "grave" é usado para descrever a intensidade (gravidade) de um evento específico (como leve, moderado ou grave); o evento em si, no entanto, pode ser de importância médica relativamente menor (como dor de cabeça intensa). Gravidade não é o mesmo que "grave", que se baseia no resultado do paciente/evento ou nos critérios de tratamento associados a eventos que representam uma ameaça à vida ou ao estado funcional do paciente.

   A seriedade (não a gravidade) serve como um guia para definir as obrigações de relatórios regulatórios. O National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE, versão 4.03) é usado para avaliar e classificar a intensidade/gravidade de um evento.

   Avaliação da relação causal de um evento adverso O investigador avaliará se existe uma possibilidade razoável de que a coleta de sangue do estudo ou a infusão de hemácias tenham causado ou contribuído para um evento adverso.

   A determinação de se existe uma possibilidade razoável de que o componente de hemácias do estudo tenha causado ou contribuído para um evento adverso inclui avaliação de relações temporais, plausibilidade biológica, informações de desativação/reintrodução (se disponível), associação (ou falta de associação) com doença subjacente e presença (ou ausência) de uma causa mais provável.

   A escala para avaliar a relação causal de um evento adverso com o componente RBC do estudo (níveis de imputabilidade) segue:

   Escala de Avaliação de Causalidade Explicação do Nível de Imputabilidade Excluída Quando há evidência conclusiva além de qualquer dúvida razoável para atribuir o evento adverso a causas alternativas. Improvável Quando a evidência é claramente favorável à atribuição do evento adverso a outras causas além do componente de hemácias do estudo.

   1. Possível: Quando a evidência é indeterminada para atribuir o evento adverso ao componente da hemácia ou a causas alternativas.
   2. Provável: Provável Quando a evidência é claramente favorável à atribuição do evento adverso ao componente da hemácia.
   3. Certo: Quando há evidência conclusiva além de qualquer dúvida razoável para atribuir o evento adverso ao componente RBC.

   Avaliação da intensidade de um evento adverso O investigador deve avaliar a intensidade (gravidade) de cada evento adverso usando os critérios de terminologia comum do National Cancer Institute para eventos adversos (CTCAE)

   Acompanhamento de Evento Adverso Todos os SAEs serão acompanhados até a resolução, ou o Investigador julgar o evento como crônico ou estável.

   Regras de parada

   A seguinte SR será aplicada a todos os participantes do estudo ao longo do estudo sempre que o patrocinador/PI deste estudo (José Cancelas, M.D., Ph.D.,) e/ou Monitor Clínico (Patricia Carey MD, Professora de Patologia, Diretora Médica, Hoxworth Blood Center)) concorda que qualquer um dos seguintes ocorreu:

   1. Um SAE determinado como possível, provável ou definitivamente relacionado à infusão de BioRBC autólogo;
   2. Um EA relacionado à infusão de BioRBC autólogo põe em risco a saúde ou a segurança do sujeito;
   3. Um EA que requeira intervenção médica ou cirúrgica relacionado à infusão de BioRBC autólogo é necessário para prevenir a ocorrência de um EAG;
   4. Um evento de hemólise pós-infusão conforme avaliado pela detecção de anticorpo anti-BioRBC usando o ensaio de cartão de gel IgG desenvolvido por nosso grupo.

   Se qualquer uma das condições acima ocorrer, o estudo será pausado e relatado ao FDA e IRB conforme exigido pelos regulamentos atuais para avaliar a continuação do estudo. Os indivíduos infundidos permanecerão sendo acompanhados enquanto for necessário para identificar as consequências dos EAs identificados. Uma vez que não há transfusões experimentais adicionais de BioRBC administradas como parte deste estudo, entende-se por "continuação do estudo" uma continuação do monitoramento de amostras biológicas conforme já descrito neste estudo, mas possivelmente incluindo outros testes considerados apropriados pelo patrocinador/PI do estudo, Monitor Clínico, FDA e/ou IRB.