Związek między poziomem apeliny w osoczu a nefropatią cukrzycową u pacjentów z cukrzycą typu 2.

Wprowadzenie Cukrzyca typu 2 jest zespołem metabolicznym związanym z hiperglikemią spowodowaną defektem wydzielania lub działania insuliny, bądź jednym i drugim. Długotrwała hiperglikemia prowadzi do powikłań mikrokrążenia obejmujących oczy, nerki i nerwy.

Nefropatia cukrzycowa (DN) jest najczęstszą przyczyną schyłkowej niewydolności nerek, która może wymagać hemodializy aż do przeszczepu nerki, ze zwiększoną śmiertelnością. Bez odpowiedniego leczenia stan pacjentów z cukrzycą pogarsza się od mikroalbuminurii do szczerego białkomoczu z większym upośledzeniem funkcji nerek. To pogorszenie rozwija się zarówno w cukrzycy typu 1, jak i typu 2. Poprzednie badania ujawniły główną rolę różnych cząsteczek zapalnych w rozwoju nefropatii cukrzycowej, w tym reagentów ostrej fazy, cytokin zapalnych, cząsteczek adhezyjnych i chemokin.

Wcześniejsze badania ujawniły główne role różnych cząsteczek zapalnych w rozwoju nefropatii cukrzycowej, w tym reagentów ostrej fazy, cytokin zapalnych i cząsteczek adhezyjnych.

Apelina (APLN) jest endogennym ligandem peptydowym kodowanym u ludzi przez gen APLN. Jest szeroko obecny w różnych narządach, takich jak serce, nerki, wątroba, tkanka tłuszczowa, śródbłonek, osocze, przewód pokarmowy, mózg i nadnercza. Apelin odgrywa główną rolę w patofizjologii nadciśnienia, niewydolności serca, chorób sercowo-naczyniowych, DM, i otyłość. Stwierdzono, że stężenie apeliny jest wyższe u pacjentów z cukrzycą typu 2 niż u osób zdrowych. Hamuje wydzielanie insuliny, przez co może przyspieszać zaburzenia metabolizmu glukozy.

Również Apelin obecny w tłuszczu sieciowym jest wyższy niż jego obecność w tłuszczu podskórnym, co sugeruje jego udział w otyłości centralnej, która jest ważnym czynnikiem ryzyka cukrzycy typu 2.

W nefropatii cukrzycowej poziom apeliny-13 jest znacznie wyższy w narządach niż u osób bez cukrzycy. Apelina pośredniczy w apoptozie podocytów, która jest odwrotnie proporcjonalna do autofagii podocytów u myszy z cukrzycą nefropatyczną. Ponadto szlak mTOR ma być odpowiedzialny za hamowanie autofagii podocytów przez apelinę.

Apelina bierze udział w patologii angiogenezy kłębuszkowej poprzez wpływ na przepuszczalność kłębuszków nerkowych i proliferację komórek śródbłonka kłębuszków cukrzycowych. Tak więc odgrywa rolę w patogenezie DN. Ponadto podawanie szczurom z cukrzycą apeliny-13 przywróciło regulację w dół katalazy antyoksydacyjnej, ujawniając jej działanie ochronne na nerki poprzez szlaki antyoksydacyjne.

Celem tej pracy była ocena związku między poziomem Apeliny w osoczu a nefropatią cukrzycową u egipskich pacjentów z cukrzycą typu 2.

Materiały i metody Po zatwierdzeniu protokołów badań przez komisję etyczną ds. badań na wydziale medycyny Kasr El Ainy Uniwersytetu w Kairze. Badanie kliniczno-kontrolne obejmujące 90 pacjentów w wieku od 20 do 65 lat, 30 zdrowych osób jako grupę kontrolną i 60 pacjentów z cukrzycą typu 2. Pacjenci zostali zebrani z poradni endokrynologicznej Kasr El Ainy, uniwersytetu w Kairze. Realizowany był od listopada 2019 do marca 2020.

Zgodę ustną uzyskano od pacjentów przed włączeniem po wyjaśnieniu protokołu badania. Pacjentów podzielono na 3 grupy, (grupa I) 30 pacjentów z cukrzycą typu 2 z nefropatią, (grupa II) 30 z cukrzycą typu 2 bez nefropatii oraz (grupa III) 30 osób bez cukrzycy jako grupa kontrolna. Kryteria wykluczenia obejmowały pacjentów z nefropatią spowodowaną innymi przyczynami niż cukrzyca, choroba wątroby, wewnętrzna choroba nerek lub choroba wieńcowa, pacjenci z neuropatią cukrzycową i retinopatią oraz pacjenci z nadciśnieniem tętniczym leczeni blokerami receptora angiotensyny (ARBS) lub inhibitorami enzymu konwertującego angiotensynę (ACEI), ponieważ wpływają na Poziom Apelina.

Od wszystkich pacjentów zebrano pełny wywiad lekarski, ze szczególnym uwzględnieniem wieku, czasu trwania cukrzycy, powikłań, w szczególności nefropatii i innych współistniejących schorzeń, oraz pełne badanie kliniczne obejmujące pomiar ciśnienia krwi, masę ciała, wzrost, wskaźnik masy ciała (BMI) (kg/m2) ) i obwód talii.

Badania laboratoryjne w postaci glukozy we krwi na czczo (FBG), 2 godz.- poposiłkowej glikemii (2 godz. -PPG), lipidów na czczo {cholesterol całkowity (TC), trójglicerydy (TAG), cholesterol lipoproteinowy o małej gęstości (LDL-C), wysoki Oceniono stężenie cholesterolu lipoproteinowego (HDL-C), hemoglobiny glikozylowanej (Hb A1c), mocznika, kreatyniny, analizę moczu, stosunek albuminy do kreatyniny, szacowany wskaźnik przesączania kłębuszkowego (e GFR), hemoglobinę glikozylowaną (Hb A1c) i poziom Apelin.

Pobieranie próbek: Pięć ml krwi żylnej pobrano przez nakłucie żyły i podzielono na 3 części: Pierwszą część stanowiły 2 ml krwi dodane do probówki zawierającej EDTA w celu oznaczenia HbA1C metodą ostrożnie wymiennej żywicy. Drugą część 3 ml krwi pozostawiono w plastikowych probówkach z surowicą i próbki pozostawiono do skrzepnięcia w temperaturze pokojowej, po czym surowicę oddzielono od komórek zaraz po wirowaniu przy 3000xg przez 5 minut. Oddzieloną surowicę przechowywano w temperaturze -20ºC do czasu analizy. Trzecią część zebrano do probówki zawierającej EDTA i wirowano przez 15 min przy 1000 x gw 2-8°C w ciągu 30 min od pobrania. Zebrano supernatant i przechowywano w temperaturze -80°C w celu oznaczenia apeliny.

Oznaczanie mocznika w surowicy, kreatyniny w surowicy, cholesterolu całkowitego, trójglicerydów w surowicy, LDL i HDL w surowicy przeprowadzono na analizatorze Dimension RxL Max, (Siemens Healthcare GmbH - Henkestr. 127, 91052 Erlangen, Niemcy) technikami kolorymetrycznymi.

Apelinę w osoczu określono przy użyciu zestawu kompetycyjnego ELISA dostarczonego z Elabscience Biotechnology Inc., (1 Shizishan Street, Hongshan District, Wuhan, Hubei, Chiny), (Estienne A i in. 2019). eGFR oszacowano za pomocą równania Cockcrofta-Gaulta: równanie Cockcrofta-Gaulta = 140-wiek x masa ciała/72 x S.Cr mg/dl (x 0,85 u kobiet).

Wykonano pełne badanie moczu w celu wykrycia obecności aktywnego osadu moczu (białkomocz, ropomocz, erytrocyty lub wałeczki erytrocytów, wałeczki ziarniste).

Stężenia albumin mierzono w moczu za pomocą zestawu do mikroalbumin Minineph w oparciu o metodę nefelometryczną na nefelometrze Minineph. Stężenie kreatyniny w moczu oznaczono na analizatorze Dimension RxL Max techniką kolorymetryczną, a do zdefiniowania mikroalbuminurii wykorzystano stosunek albuminy do kreatyniny w moczu.