Relazione tra livello plasmatico di apelina e nefropatia diabetica nei pazienti con diabete di tipo 2.

Introduzione Il diabete mellito di tipo 2 è una sindrome metabolica associata a iperglicemia dovuta a un difetto nella secrezione o nell'azione dell'insulina o di entrambi. L'iperglicemia a lungo termine porta a complicanze della microvascolarizzazione che coinvolgono occhi, reni e nervi.

La nefropatia diabetica (DN) è la causa più comune di malattia renale allo stadio terminale che può richiedere l'emodialisi fino al trapianto renale con un'aumentata incidenza di mortalità. Senza trattamento, i pazienti con diabete peggiorano da microalbuminuria a proteinuria franca con maggiore compromissione delle funzioni renali. Questo peggioramento si sviluppa sia nel diabete di tipo 1 che di tipo 2. Precedenti studi hanno rivelato i ruoli principali di diverse molecole infiammatorie nello sviluppo della nefropatia diabetica, compresi i reagenti della fase acuta, le citochine infiammatorie, le molecole di adesione e le chemochine.

Precedenti studi hanno rivelato i ruoli principali di diverse molecole infiammatorie nello sviluppo della nefropatia diabetica, compresi i reagenti della fase acuta, le citochine infiammatorie, le molecole di adesione.

Apelin (APLN) è il peptide ligando endogeno che è codificato negli esseri umani dal gene APLN. È ampiamente presente in diversi organi come il cuore, i reni, il fegato, il tessuto adiposo, l'endotelio, il plasma, il tratto gastrointestinale, il cervello e le ghiandole surrenali. L'apelin ha un ruolo importante nella fisiopatologia di ipertensione, insufficienza cardiaca, malattie cardiovascolari, DM, e obesità. Apelin risulta essere più alto nei pazienti diabetici di tipo 2 rispetto ai soggetti sani. Inibisce la secrezione di insulina, quindi può accelerare il metabolismo alterato del glucosio.

Inoltre, l'apelina presente nel grasso omentale è superiore alla sua presenza nel grasso sottocutaneo, suggerendo il suo contributo all'obesità centrale che è un importante fattore di rischio per il DM di tipo 2.

Nella nefropatia diabetica, il livello di apelina-13 è nettamente più alto rispetto agli organi non diabetici. Apelin media l'apoptosi dei podociti, che è inversamente correlata con l'autofagia dei podociti nei topi diabetici nefropatici. Inoltre, si suppone che il percorso mTOR abbia la responsabilità di inibire l'autofagia dei podociti da parte dell'apelina.

Apelin partecipa alla patologia dell'angiogenesi glomerulare influenzando la permeabilità nei glomeruli e la proliferazione delle cellule endoteliali glomerulari dei diabetici. Quindi, giocando un ruolo nella patogenesi della DN. Inoltre, la somministrazione di ratti diabetici apelina-13 ha ripristinato la down-regulation della catalasi antiossidante, rivelando il suo effetto protettivo renale attraverso percorsi antiossidanti.

Abbiamo mirato da questo lavoro a valutare la relazione tra il livello plasmatico di Apelin e la nefropatia diabetica nei pazienti con diabete di tipo 2 egiziano.

Materiali e metodi Dopo l'approvazione da parte del comitato etico della ricerca della facoltà di medicina Kasr El Ainy, Università del Cairo sui protocolli di ricerca. Uno studio caso controllo comprendente 90 pazienti di età compresa tra 20 e 65 anni, 30 soggetti sani come gruppo di controllo e 60 pazienti con DM di tipo 2. I pazienti sono stati raccolti dalla clinica ambulatoriale di endocrinologia, Kasr El Ainy, Università del Cairo. È stato condotto da novembre 2019 a marzo 2020.

Il consenso orale è stato ottenuto dai pazienti prima dell'inclusione dopo aver spiegato il protocollo dello studio. I pazienti sono stati divisi in 3 gruppi, (gruppo I) 30 pazienti con DM di tipo 2 con nefropatia, (gruppo II) 30 DM di tipo 2 senza nefropatia e (gruppo III) 30 non DM come gruppo di controllo. I criteri di esclusione includevano pazienti con nefropatia dovuta ad altre cause diverse da diabete, malattia epatica, renale intrinseca o coronarica, pazienti con neuropatia diabetica e retinopatia e pazienti ipertesi in trattamento con bloccanti del recettore dell'angiotensina (ARBS) o inibitori dell'enzima di conversione dell'angiotensina (ACEI) in quanto influenza livello Apelin.

L'anamnesi medica completa è stata presa da tutti i soggetti, sottolineando l'età, la durata del diabete mellito, le complicanze in particolare la nefropatia e altre condizioni di comorbilità e l'esame clinico completo inclusa la misurazione della pressione sanguigna, peso, altezza, indice di massa corporea (BMI) (kg/m2 ) e circonferenza vita .

Indagini di laboratorio sotto forma di glicemia a digiuno (FBG), glicemia postprandiale a 2 ore (PPG a 2 ore), lipidi a digiuno {colesterolo totale (TC), trigliceridi (TAG), colesterolo lipoproteico a bassa densità (LDL-C), colesterolo alto sono stati valutati il ​​colesterolo delle lipoproteine ​​di densità (HDL-C), l'emoglobina glicosilata (Hb A1c), l'urea, la creatinina, l'analisi delle urine, il rapporto albumina-creatinina, la velocità di filtrazione glomerulare stimata (e GFR), l'emoglobina glicosilata (Hb A1c) e i livelli di apelina.

Campionamento: Cinque ml di sangue venoso sono stati raccolti mediante prelievo venoso e sono stati divisi in 3 parti: la prima parte era costituita da 2 ml di sangue aggiunti a una provetta contenente EDTA per la determinazione di HbA1C mediante resina di scambio cauto. La seconda parte di 3 ml di sangue è stata lasciata in provette di plastica per siero e i campioni sono stati lasciati coagulare a temperatura ambiente, quindi il siero è stato separato dalle cellule non appena centrifugato a 3000xg per 5 minuti. Il siero separato è stato conservato a -20ºC fino all'analisi. La terza parte è stata raccolta in una provetta contenente EDTA e centrifugata per 15 minuti a 1000 × g a 2-8 ℃ entro 30 minuti dalla raccolta. Il supernatante è stato raccolto e conservato a -80°C per la determinazione dell'apelina.

La determinazione di urea sierica, creatinina sierica, colesterolo totale sierico, trigliceridi sierici, LDL sierico e HDL sierico sono state effettuate sull'analizzatore Dimension RxL Max, (Siemens Healthcare GmbH - Henkestr. 127, 91052 Erlangen, Germania) mediante tecniche colorimetriche.

L'apelina plasmatica è stata determinata utilizzando un kit ELISA competitivo fornito da Elabscience Biotechnology Inc., (1 Shizishan Street, Hongshan District, Wuhan, Hubei, China), (Estienne A et al. 2019). L'eGFR è stato stimato utilizzando l'equazione di Cockcroft Gault: equazione di Cockcroft Gault = 140-età x peso/72 x S.Cr mg/dl (x 0,85 nelle donne).

È stata eseguita un'analisi completa delle urine per rilevare la presenza di sedimento urinario attivo (proteinuria, piuria, GR o cilindri di GR, cilindro granulare).

Le concentrazioni di albumina sono state misurate nelle urine utilizzando un kit di microalbumina Minineph basato sul metodo della nefelometria su Minineph-nefelometro. La creatinina urinaria è stata determinata sull'analizzatore Dimension RxL Max mediante tecnica colorimetrica e il rapporto tra albumina urinaria e creatinina è stato utilizzato per definire la microalbuminuria.