Relação entre o nível de apelina plasmática e a nefropatia diabética em pacientes com diabetes tipo 2.

Introdução O Diabetes Mellitus tipo 2 é uma síndrome metabólica associada à hiperglicemia decorrente de defeito na secreção ou ação da insulina ou ambos. A hiperglicemia de longo prazo leva a complicações da microvasculatura envolvendo os olhos, rins e nervos.

A nefropatia diabética (ND) é a causa mais comum de doença renal terminal que pode necessitar de hemodiálise até o transplante renal com maior incidência de mortalidade. Sem tratamento, os pacientes com diabetes pioram de microalbuminúria para franca proteinúria com mais comprometimento das funções renais. Essa piora ocorre tanto no diabetes tipo 1 quanto no tipo 2. Estudos anteriores revelaram o papel importante de diferentes moléculas inflamatórias no desenvolvimento da nefropatia diabética, incluindo reagentes de fase aguda, citocinas inflamatórias, moléculas de adesão e quimiocinas.

Estudos anteriores revelaram os principais papéis de diferentes moléculas inflamatórias no desenvolvimento da nefropatia diabética, incluindo reagentes de fase aguda, citocinas inflamatórias e moléculas de adesão.

Apelina (APLN) é o péptido ligando endógeno que é codificado em humanos pelo gene APLN. Apresenta-se amplamente em diferentes órgãos como coração, rim, fígado, tecido adiposo, endotélio, plasma, trato gastrointestinal, cérebro e adrenais. A apelina tem um papel importante na fisiopatologia da hipertensão, insuficiência cardíaca, doença cardiovascular, DM, e obesidade. Verificou-se que a apelina é maior em pacientes diabéticos tipo 2 do que em indivíduos saudáveis. Ele inibe a secreção de insulina, por isso pode precipitar o metabolismo prejudicado da glicose.

Além disso, a presença de apelina na gordura omental é maior do que na gordura subcutânea, sugerindo sua contribuição para a obesidade central, que é um importante fator de risco para DM tipo 2.

Na nefropatia diabética, o nível de apelina-13 é marcadamente mais alto do que nos órgãos não diabéticos. A apelina medeia a apoptose podocitária, que está inversamente relacionada com a autofagia podocitária em camundongos diabéticos nefropáticos. Além disso, supõe-se que a via mTOR tenha a responsabilidade de inibir a autofagia podocitária pela apelina.

A apelina participa da patologia da angiogênese glomerular afetando a permeabilidade nos glomérulos e a proliferação de células endoteliais glomerulares de diabéticos. Portanto, desempenhando um papel na patogênese da DN. Além disso, a administração de ratos diabéticos com apelina-13 restaurou a regulação negativa da catalase antioxidante, revelando seu efeito protetor renal por meio de vias antioxidantes.

Nosso objetivo neste trabalho foi avaliar a relação entre o nível plasmático de Apelina e a nefropatia diabética em pacientes egípcios com diabetes tipo 2.

Materiais e métodos Após a aprovação do protocolo de pesquisa pelo comitê de ética em pesquisa da faculdade de medicina Kasr El Ainy, Universidade do Cairo. Um estudo caso-controle incluindo 90 pacientes com idades entre 20 e 65 anos, 30 indivíduos saudáveis ​​como grupo controle e 60 pacientes com DM tipo 2. Os pacientes foram coletados no ambulatório de endocrinologia, Kasr El Ainy, Universidade do Cairo. Foi realizado de novembro de 2019 a março de 2020.

O consentimento oral foi obtido dos pacientes antes da inclusão após explicação do protocolo do estudo. Os pacientes foram divididos em 3 grupos, (grupo I) 30 pacientes com DM tipo 2 com nefropatia, (grupo II) 30 DM tipo 2 sem nefropatia e (grupo III) 30 não DM como grupo controle. Os critérios de exclusão incluíram pacientes com nefropatia por outras causas que não diabetes, doença hepática, renal intrínseca ou coronariana, pacientes com neuropatia diabética e retinopatia e pacientes hipertensos em tratamento com bloqueadores dos receptores da angiotensina (ARBS) ou inibidores da enzima conversora da angiotensina (IECA), pois afetam Nível Apelin.

O histórico médico completo foi obtido de todos os indivíduos, enfatizando a idade, duração do diabetes mellitus, complicações especialmente nefropatia e outras comorbidades e exame clínico completo, incluindo medição da pressão arterial, peso, altura, Índice de Massa Corporal (IMC) (kg/m2 ) e circunferência da cintura .

Investigações laboratoriais na forma de glicemia de jejum (FBG), 2 horas de glicose no sangue pós-prandial (2 horas -PPG), lipídios em jejum {colesterol total (TC), triglicerídeos (TAG), colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-C), colesterol alto colesterol de lipoproteína de densidade (HDL-C), hemoglobina glicosilada (Hb A1c), ureia, creatinina, análise de urina, relação albumina creatinina, taxa de filtração glomerular estimada (e TFG), hemoglobina glicosilada (Hb A1c) e níveis de Apelina foram avaliados.

Amostragem: Cinco ml de sangue venoso foram coletados por punção venosa divididos em 3 partes: A primeira parte foi de 2 ml de sangue adicionado a um tubo contendo EDTA para determinação de HbA1C por resina de troca cautelosa. A 2ª parte foi de 3 ml de sangue foi deixado em tubos de soro de plástico e os espécimes foram deixados coagular à temperatura ambiente, em seguida, o soro foi separado das células assim que por centrifugação a 3000xg por 5 minutos. O soro separado foi armazenado a -20ºC até a análise. A 3ª parte foi coletada em um tubo contendo EDTA e centrifugada por 15 minutos a 1000 × g a 2-8 ℃ em 30 minutos após a coleta. O sobrenadante foi coletado e armazenado a -80ºC para determinação da apelina.

A determinação de uréia sérica, creatinina sérica, colesterol total sérico, triglicérides séricos, LDL sérico e HDL sérico foram realizadas no analisador Dimension RxL Max, (Siemens Healthcare GmbH - Henkestr. 127, 91052 Erlangen, Alemanha) por técnicas colorimétricas.

A apelina plasmática foi determinada usando o kit ELISA competitivo fornecido pela Elabscience Biotechnology Inc., (1 Shizishan Street, Hongshan District, Wuhan, Hubei, China), (Estienne A et al. 2019). A eGFR foi estimada usando a equação de Cockcroft Gault: Equação de Cockcroft Gault= 140-idade x peso/72 x S.Cr mg/dl(x 0,85 em mulheres).

A análise completa da urina foi realizada para detectar a presença de sedimento urinário ativo (proteinúria, piúria, eritrócitos ou cilindros eritrocitários, cilindros granulares).

As concentrações de albumina foram medidas na urina usando um kit Minineph micro albumina com base no método de nefelometria em Minineph-nefelômetro. A creatinina urinária foi determinada no analisador Dimension RxL Max pela técnica colorimétrica e a razão entre a albumina urinária e a creatinina foi usada para definir a microalbuminúria.