Łagodzenie zaburzeń związanych z zespołem policystycznych jajników poprzez suplementację tymochinonu i metforminy

To randomizowane badanie kliniczne przeprowadzono na oddziale położnictwa i ginekologii saudyjskiego szpitala Madinah-KSA w okresie od lutego 2019 r. do sierpnia 2020 r. W badaniu wzięło udział 207 pacjentek, które spełniały następujące kryteria włączenia: wiek od 18 do 35 lat, nadwaga i otyłość, pacjentki z PCOS (nadwaga zdefiniowana jako wskaźnik masy ciała (BMI) 25-29,9 kg/m2 i otyłość definiowana jako BMI ≥ 30 kg/m2) zgłaszających się do poradni, skarżących się na brak lub skąpe miesiączkowanie z hirsutyzmem lub bez. Brak miesiączki zdefiniowano jako brak miesiączki przez sześć lub więcej miesięcy. Oligomenorrhea została zdefiniowana jako odstęp między cyklami dłuższy niż 35 dni, ale krótszy niż 6 miesięcy. PCOS rozpoznano zgodnie z warsztatami Rotterdam ESHRE/ASRM Consensus z 2004 r., przy obecności co najmniej 2 z 3 kryteriów: oligo- i/lub brak owulacji, kliniczny i/lub biochemiczny hiperandrogenizm oraz morfologia policystycznych jajników stwierdzona w badaniu ultrasonograficznym z ponad 12 małe pęcherzyki antralne w jajniku, z wyłączeniem innych powiązanych etiologii, takich jak guzy wydzielające androgeny, wrodzony przerost nadnerczy i hiperprolaktynemia. Uwzględniono pacjentów ze stanem przedcukrzycowym, u których występuje zwiększone ryzyko rozwoju cukrzycy, zgodnie z definicją American Diabetes Association 2014. Ci pacjenci mieli; nieprawidłowa glikemia na czczo (IFG) zdefiniowana jako stężenie glukozy w osoczu na czczo (FPG) od 100 do 125 mg/dl (na czczo opisano brak przyjmowania kalorii przez co najmniej 8 godzin) lub nieprawidłowa tolerancja glukozy (IGT) zdefiniowana jako 2-godzinne odczyty od 140 do 199 mg/dl w doustnym teście obciążenia glukozą (OGTT). Uwzględniono również pacjentów, u których ryzyko rozwoju cukrzycy było bardzo wysokie według Międzynarodowego Komitetu Ekspertów 2009. U tych pacjentów poziom hemoglobiny glikozylowanej A1C wynosił od 5,7% do 6,4%.

Kryteriami wykluczenia były: szczupła lub średnia masa ciała PCOS z BMI < 25 kg/m2, chorobliwie otyłe pacjentki z BMI ≥ 35 kg/m2, pacjentki z innymi zaburzeniami metabolicznymi, historia przyjmowania jakichkolwiek leków hormonalnych lub leków wpływających na gospodarkę węglowodanową w wywiadzie 3 miesiące przed rozpoczęciem badania oraz niemożność uczestniczenia w regularnych wizytach kontrolnych. Z badania wykluczono już znanych i niedawno zdiagnozowanych pacjentów z cukrzycą. Według American Diabetes Association 2014 cukrzyca została zdefiniowana jako poziom hemoglobiny glikozylowanej A1C ≥ 6,5% lub FPG ≥ 126 mg/dl lub 2-godzinny odczyt stężenia glukozy w osoczu ≥ 200 mg/dl podczas 75 g OGTT lub obecność klasycznych objawów hiperglikemia z losowymi poziomami glukozy w osoczu ≥ 200 mg/dl. Choroby tarczycy i hiperprolaktynemia były leczone przed udziałem w badaniu.

Studium było zgodne z Deklaracją Helsińską z 1964 r. i jej późniejszymi poprawkami. Protokół badania został zatwierdzony przez lokalną komisję etyczną. Wszyscy pacjenci podpisali świadomą zgodę przed udziałem.

Podczas pierwszej wizyty rezerwacyjnej przeprowadzono wstępną ocenę z zebraniem szczegółowego wywiadu, w tym historii osobistej, medycznej, chirurgicznej, położniczej i menstruacyjnej. Badanie ogólne przeprowadzono poprzez pomiar BMI, obwodu talii (WC), obwodu bioder (HC) oraz stosunku talii do bioder (WHR).

BMI miał tę wadę, że nie odzwierciedlał w pełni rozkładu tkanki tłuszczowej, a tym samym charakteru otyłości, jak stwierdzono w wielu badaniach. Tak więc obwód talii, obwód bioder i stosunek talii do bioder wybrano jako wygodniejsze pomiary trzewnej tkanki tłuszczowej w jamie brzusznej, a tym samym ważne markery kliniczne do przewidywania pacjentów z ryzykiem rozwoju DM i chorób sercowo-naczyniowych.

Pomiary przeprowadzono zgodnie z protokołem STEPS Światowej Organizacji Zdrowia (WHO) 2008. Obwód talii mierzono w punkcie środkowym między dolnym brzegiem ostatniego wyczuwalnego żebra a szczytem grzebienia biodrowego. Obwód bioder mierzono wokół najszerszej części pośladków. Dla obu pomiarów taśma była ustawiona równolegle do podłogi na poziomie, na którym wykonano pomiar. Taśma była ściśle przylegająca do ciała, ale nie naciągnięta tak mocno. Pacjent stał ze stopami blisko siebie, ramionami wzdłuż boków i równomiernie rozłożonym ciężarem ciała na stopach. Obwód talii mierzono pod koniec normalnego wydechu, kiedy płuca osiągnęły swoją funkcjonalną pojemność resztkową. Ponieważ wiele osób nieświadomie reaguje na pomiar talii poprzez ssanie ściany brzucha, pacjentom zalecono relaks i wykonanie kilku naturalnych oddechów przed dokonaniem właściwego pomiaru. Każdy pomiar powtórzono dwukrotnie; jeśli pomiary mieściły się w odległości 1 cm od siebie, obliczano średnią. Jeśli różnica między dwoma pomiarami przekraczała 1 cm, dwa pomiary powtarzano.

Podczas wizyty rezerwacyjnej; USG podstawy miednicy wykonano dla dziewiczych uczestniczek i przezpochwowe USG (TVS) dla pacjentek niebędących dziewicami. Pobrano również próbki krwi na oznaczenie OGTT, stężenia hemoglobiny glikozylowanej A1C, oszacowanie aktywności SOD i stężenia MDA.

Doustny test tolerancji glukozy (OGTT) przeprowadzono rano po całonocnym poście trwającym co najmniej 8 godzin, wykorzystując ładunek glukozy zawierający równowartość 75 gramów bezwodnej glukozy rozpuszczonej w wodzie. Mierzono również poziomy glikozylowanej hemoglobiny A1C.

W celu określenia aktywności SOD próbki krwi odwirowano przy 1000 g przez 10 minut, surowicę zamrożono i przechowywano w -80°C do czasu analizy. Aktywność SOD opierała się na zdolności enzymu do hamowania redukcji barwnika nitro-błękitu tetrazolowego, w której pośredniczy metosiarczan fenazyny. Oczyszczony SOD hamuje początkową szybkość redukcji (O2 do O2-), w której pośredniczy aktywowany metylosiarczan fenazyny, który następnie redukuje nitroniebieski tetrazoliowy. Następnie obliczono procent hamowania i porównano ze standardem 0,5 μg enzymu, który spowodował zahamowanie 80% (aktywność = 3000 jednostek/mg białka). Aktywność SOD ostatecznie wyrażono jako jednostki aktywności enzymatycznej na mg białka zawartego w próbkach (U/mg białka).

Stężenia dialdehydu malonowego (MDA) mierzono w µmol/litr metodą derywatyzacji MDA z kwasem tiobarbiturowym (TBA) na podstawie spektrofotometrycznego oznaczania różowo fluorescencyjnego kompleksu MDA-TBA powstałego w wyniku reakcji z kwasem 2-tiobarbiturowym w wysokiej temperaturze i niskim pH. Zestawy testowe dla MDA i SOD były produktami firmy (Cell Biolabs Inc, San Diego, USA).

Pacjentów podzielono na dwie grupy (A i B) za pomocą oprogramowania komputerowego Open Epi w wersji 3.21. Pacjenci z grupy A otrzymywali metforminę 500 mg trzy razy dziennie (5) z posiłkami przez 6 miesięcy (Metfor® 500 mg, tabletki chlorowodorku metforminy. Firma farmaceutyczna TABUK. KSA). Pacjenci z grupy B otrzymywali kombinację metforminy 500 mg trzy razy dziennie z posiłkami (Metfor® 500 mg, tabletki chlorowodorku metforminy. Firma farmaceutyczna TABUK. KSA) i tymochinon (TQ) w postaci oleju z czarnuszki (Cumin Mar® olej z czarnego kminku 500 mg miękkie kapsułki żelowe, MARNYS. Hiszpania) trzy razy dziennie przed posiłkami przez 6 miesięcy.

Pacjentów poinstruowano, aby nie przyjmowali żadnego leku niebędącego przedmiotem badania w okresie badania, aby zwiększyli swoją aktywność fizyczną poprzez wykonywanie aerobowych ćwiczeń fizycznych (umiarkowany poziom przez dwie godziny i trzydzieści minut tygodniowo lub intensywny poziom przez jedną godzinę i piętnaście minut tygodniowo) podzielony na przynajmniej trzy dni w tygodniu i stosować dietę niskokaloryczną.

Wszystkim pacjentom zalecono wizytę kontrolną po 3 i 6 miesiącach od rozpoczęcia badania w celu oceny BMI, obwodu talii, obwodu bioder i stosunku talii do bioder oraz pobranie próbki krwi na OGTT, A1C, aktywność SOD i stężenie MDA. Pacjentki pytano również o ich cykl menstruacyjny.

Głównymi wynikami badania były; wznowienie regularnych cykli menstruacyjnych, zmniejszenie masy ciała objawiające się zmniejszeniem BMI, zmiana rozkładu tkanki tłuszczowej potwierdzona zmniejszonym stosunkiem talii do bioder, poprawa kontroli glikemii potwierdzona normalizacją OGTT i HbA1c oraz przywrócenie prawidłowej równowagi oksydacyjnej potwierdzona poprzez obniżone stężenie MDA i zwiększoną aktywność SOD.