Melhora dos Distúrbios Relacionados à Síndrome do Ovário Policístico pela Suplementação de Timoquinona e Metformina

Este ensaio clínico randomizado foi realizado no departamento de Obstetrícia e Ginecologia do Hospital Alemão Saudita, Madinah-KSA, durante o período de fevereiro de 2019 a agosto de 2020. O estudo incluiu 207 pacientes que preencheram os seguintes critérios de inclusão: idade de 18 a 35 anos, pacientes com SOP com sobrepeso e obesos (excesso de peso definido como índice de massa corporal (IMC) 25-29,9 kg/m2 e obesidade definida como IMC ≥ 30 kg/m2) atendida no ambulatório, com queixa de amenorreia ou oligomenorreia com ou sem hirsutismo. Amenorréia foi definida como ausência de menstruação por seis ou mais meses. Oligomenorreia foi definida como intervalo de ciclo de mais de 35 dias, mas menos de 6 meses. A SOP foi diagnosticada de acordo com o workshop de consenso ESHRE/ASRM de Rotterdam de 2004, com presença de pelo menos 2 de 3 critérios: oligo e/ou anovulação, hiperandrogenismo clínico e/ou bioquímico e morfologia ovariana policística identificada por ultrassonografia com mais de 12 pequenos folículos antrais em um ovário, com exclusão de outras etiologias relacionadas, como tumores secretores de andrógenos, hiperplasia adrenal congênita e hiperprolactinemia. Pacientes com pré-diabetes com risco aumentado de desenvolver diabetes, conforme definido pela American Diabetes Association 2014, foram incluídos. Esses pacientes tinham; glicose em jejum prejudicada (IFG) definida como níveis de glicose plasmática em jejum (FPG) de 100 a 125 mg/dL (o jejum foi descrito como nenhuma ingestão calórica por pelo menos 8 horas) ou tolerância à glicose prejudicada (IGT) definida como leituras de 2 horas de 140 a 199 mg/dL no teste oral de tolerância à glicose (TOTG). Pacientes considerados de risco muito alto para desenvolver diabetes de acordo com o Comitê Internacional de Especialistas de 2009 também foram incluídos. Esses pacientes tinham seus níveis de hemoglobina glicosilada A1C entre 5,7% e 6,4%.

Os critérios de exclusão foram: SOP magra ou de peso médio com IMC < 25 kg/m2, obesos mórbidos com IMC ≥ 35 kg/m2, pacientes com qualquer outro distúrbio metabólico, histórico de tratamento hormonal ou qualquer medicamento que afete o metabolismo de carboidratos 3 meses antes do início do estudo e incapacidade de comparecer às visitas regulares de acompanhamento. Pacientes diabéticos já conhecidos e diagnosticados recentemente foram excluídos do estudo. De acordo com a American Diabetes Association 2014, o diabetes mellitus foi definido como níveis de hemoglobina glicosilada A1C ≥ 6,5% ou FPG ≥ 126 mg/dL ou leituras de glicose plasmática em 2 horas ≥ 200 mg/dL durante 75 g OGTT, ou presença de sintomas clássicos de hiperglicemia com níveis aleatórios de glicose plasmática ≥ 200 mg/dL. Doenças da tireoide e hiperprolactinemia foram tratadas antes da participação.

O Estudo estava de acordo com a declaração de Helsinque de 1964 e suas emendas posteriores. O protocolo do estudo foi aprovado pelo comitê de ética local. Todos os pacientes assinaram um consentimento informado antes da participação.

Durante a primeira consulta de marcação, foi realizada avaliação inicial com anamnese detalhada, incluindo história pessoal, médica, cirúrgica, obstétrica e menstrual. O exame geral foi feito com aferição do IMC, circunferência da cintura (CC), circunferência do quadril (CQ) e relação cintura: quadril (RCQ).

O IMC tem a desvantagem de não representar verdadeiramente a distribuição da gordura corporal e, portanto, a natureza da obesidade, como concluíram muitos estudos. Assim, a circunferência da cintura, a circunferência do quadril e a relação cintura:quadril foram selecionadas como medidas mais convenientes de gordura visceral abdominal e, portanto, importantes marcadores clínicos para prever pacientes com risco de desenvolver DM e doenças cardiovasculares.

As medições foram realizadas de acordo com o protocolo STEPS de 2008 da Organização Mundial da Saúde (OMS). A circunferência da cintura foi medida no ponto médio entre a margem inferior da última costela palpável e o topo da crista ilíaca. A circunferência do quadril foi medida em torno da porção mais larga das nádegas. Para ambas as medidas, a fita foi ajustada paralelamente ao chão no nível em que a medida foi feita. A fita foi segurada confortavelmente ao redor do corpo, mas não tão apertada. O paciente estava em pé com os pés juntos, os braços ao lado do corpo e o peso do corpo distribuído uniformemente nos pés. A circunferência da cintura foi medida ao final de uma expiração normal, quando os pulmões estão em sua capacidade residual funcional. Como muitos indivíduos reagem inconscientemente às medições da cintura sugando a parede abdominal, os pacientes foram aconselhados a relaxar e respirar naturalmente antes de fazer a medição real. Cada medição foi repetida duas vezes; se as medidas estivessem a menos de 1 cm uma da outra, a média era calculada. Se a diferença entre as duas medidas ultrapassasse 1 cm, as duas medidas eram repetidas.

Durante a visita de marcação; um ultrassom pélvico basal foi feito para participantes virgens e ultrassom transvaginal (TVS) para pacientes não virgens. Amostras de sangue também foram coletadas para OGTT, níveis de hemoglobina glicosilada A1C, estimativa da atividade de SOD e concentrações de MDA.

O teste oral de tolerância à glicose (TOTG) foi realizado pela manhã após jejum noturno de no mínimo 8 horas, utilizando uma carga de glicose contendo o equivalente a 75 gramas de glicose anidra dissolvida em água. Os níveis de hemoglobina glicosilada A1C também foram medidos.

Para estimativa da atividade da SOD, as amostras de sangue foram centrifugadas a 1000 g por 10 minutos, o soro foi congelado e armazenado a -80 °C até o momento da análise. A atividade da SOD foi baseada na capacidade da enzima em inibir a redução do corante nitro azul tetrazólio mediada pelo metossulfato de fenazina. A SOD purificada inibe a taxa inicial de redução de (O2 para O2-) mediada pelo metossulfato de fenazina ativado que então reduz o nitro azul tetrazólio. A porcentagem de inibição foi então calculada e comparada com o padrão de 0,5 μg da enzima que produziu inibição de 80% (atividade = 3.000 unidades/mg de proteína). A atividade da SOD foi finalmente expressa em unidades de atividade enzimática por mg de proteína contida nas amostras (U/mg de proteína).

As concentrações de malondialdeído (MDA) foram medidas em µmol/litro usando a derivatização MDA com ácido tiobarbitúrico (TBA) baseada na determinação espectrofotométrica do complexo fluorescente rosa MDA-TBA produzido após reação com ácido 2-tiobarbitúrico em alta temperatura e baixo pH. Os kits de ensaio para MDA e SOD foram produtos da (Cell Biolabs Inc, San Diego, EUA).

Os pacientes foram divididos em dois grupos (A e B) usando um software baseado em computador Open Epi versão 3.21. Os pacientes do Grupo A receberam Metformina 500 mg três vezes ao dia (5) com as refeições por 6 meses (Metfor® 500 mg, comprimidos de cloridrato de metformina. TABUK Farmacêutica. KSA). Os pacientes do Grupo B receberam uma combinação de Metformina 500 mg três vezes ao dia com as refeições (Metfor® 500 mg, comprimidos de cloridrato de metformina. TABUK Farmacêutica. KSA) e Timoquinona (TQ) na forma de óleo de cominho preto (Cumin Mar® óleo de cominho preto 500 mg cápsulas de gel mole, MARNYS. Espanha) três vezes ao dia antes das refeições durante 6 meses.

Os pacientes foram instruídos a não receber nenhum medicamento fora do estudo durante o período do estudo, a aumentar sua atividade física realizando exercícios físicos aeróbicos (nível moderado por duas horas e trinta minutos semanais ou nível vigoroso por uma hora e quinze minutos semanais) divididos em menos três dias da semana, e consumir uma dieta hipocalórica.

Todos os pacientes foram orientados a comparecer para acompanhamento após 3 e 6 meses desde o início do estudo para avaliação de seu IMC, circunferência da cintura, circunferência do quadril e relação cintura/quadril e para retirar uma amostra de sangue para OGTT, A1C, atividade SOD e concentração de MDA. Os pacientes também foram questionados sobre seu padrão de ciclo menstrual.

Os resultados primários do estudo foram; a retomada de ciclos menstruais regulares, redução de peso conforme detectada pela diminuição do IMC, alteração da distribuição de gordura corporal comprovada pela redução da relação cintura/quadril, melhora do controle glicêmico documentado pela normalização do OGTT e A1C e recuperação do equilíbrio oxidativo normal conforme evidenciado por diminuição da concentração de MDA e aumento da atividade de SOD.