Forbedring av polycystisk ovariesyndrom relaterte lidelser ved tilskudd av tymokinon og metformin

Denne randomiserte kliniske studien ble utført i avdelingen for obstetrikk og gynekologi ved Saudi German Hospital, Madinah-KSA, i perioden februar 2019 til august 2020. Studien inkluderte 207 pasienter som oppfylte følgende inklusjonskriterier: alder fra 18 til 35 år, overvektige og obese PCOS-pasienter (overvekt definert som kroppsmasseindeks (BMI) 25-29,9 kg/m2 og fedme definert som BMI ≥ 30 kg/m2) i poliklinikk, klager over amenoré eller oligomenoré med eller uten hirsutisme. Amenoré ble definert som fravær av menstruasjon i seks eller flere måneder. Oligomenoré ble definert som syklusintervall på mer enn 35 dager, men mindre enn 6 måneder. PCOS ble diagnostisert i henhold til Rotterdam ESHRE/ASRM Consensus workshop i 2004, med tilstedeværelse av minst 2 av 3 kriterier: oligo- og/eller anovulasjon, klinisk og/eller biokjemisk hyperandrogenisme og polycystisk ovariemorfologi identifisert ved ultralyd med mer enn 12 små antralfollikler i en eggstokk, med utelukkelse av andre relaterte etiologier som androgen-utskillende svulster, medfødt binyrehyperplasi og hyperprolaktinemi. Prediabetespasienter som har økt risiko for å utvikle diabetes, som definert av American Diabetes Association 2014, ble inkludert. Disse pasientene hadde; svekket fastende glukose (IFG) definert som fastende plasmaglukosenivåer (FPG) på 100 til 125 mg/dL (faste ble beskrevet som ingen kaloriinntak på minst 8 timer), eller svekket glukosetoleranse (IGT) definert som 2-timers målinger på 140 til 199 mg/dL i oral glukosetoleransetest (OGTT). Pasienter som ble vurdert som svært høy risiko for å utvikle diabetes i henhold til International Expert Committee 2009 ble også inkludert. Disse pasientene hadde glykosylert hemoglobin A1C-nivåer mellom 5,7 % og 6,4 %.

Eksklusjonskriterier var: mager eller gjennomsnittlig PCOS med BMI < 25 kg/m2, sykelig overvektige pasienter med BMI ≥ 35 kg/m2, pasienter som lider av andre metabolske forstyrrelser, historie med å ha mottatt hormonbehandling eller medikamenter som påvirker karbohydratmetabolismen 3 måneder før studiestart, og manglende evne til å delta på de vanlige oppfølgingsbesøkene. Allerede kjente og nylig diagnostiserte diabetespasienter ble ekskludert fra studien. I følge American Diabetes Association 2014 ble diabetes mellitus definert som glykosylert hemoglobin A1C-nivåer ≥ 6,5 % eller FPG ≥ 126 mg/dL eller 2-timers plasmaglukoseavlesninger ≥ 200 mg/dL under 75 g OGTT, eller tilstedeværelse av klassiske symptomer hyperglykemi med tilfeldige plasmaglukosenivåer ≥ 200 mg/dL. Skjoldbruskkjertelsykdommer og hyperprolaktinemi ble behandlet før deltakelse.

Studien var i samsvar med Helsinki-erklæringen 1964 og senere endringer. Studieprotokollen ble godkjent av den lokale etiske komiteen. Alle pasienter signerte et informert samtykke før deltakelse.

Under det første bestillingsbesøket ble den første vurderingen utført med detaljert anamnese, inkludert personlig, medisinsk, kirurgisk, obstetrisk og menstruasjonshistorie. Generell undersøkelse ble gjort med måling av BMI, midjeomkrets (WC), hofteomkrets (HC) og midje: hofteforhold (WHR).

BMI hadde ulempen ved ikke å representere kroppsfettfordelingen og dermed arten av fedme som konkludert med mange studier. Så midjeomkretsen, hofteomkretsen og midje:hofte-forholdet ble valgt som mer praktiske mål for abdominal visceralt fett og dermed viktige kliniske markører for å forutsi pasienter med risiko for å utvikle DM og kardiovaskulære sykdommer.

Målinger ble utført i henhold til Verdens helseorganisasjons (WHO) STEPS-protokoll 2008. Midjeomkretsen ble målt ved midtpunktet mellom den nedre margen av siste palpable ribben og toppen av hoftekammen. Hofteomkretsen ble målt rundt den bredeste delen av baken. For begge målingene ble båndet justert parallelt med gulvet på det nivået målingen ble utført på. Tapen ble holdt tett rundt kroppen, men ikke trukket så stramt. Pasienten sto med føttene tett sammen, armene på sidene og kroppsvekten jevnt fordelt over føttene. Midjeomkretsen ble målt ved slutten av en normal ekspirasjon, når lungene har sin funksjonelle restkapasitet. Fordi mange individer ubevisst reagerer på midjemål ved å suge på bukveggen, ble pasientene rådet til å slappe av og ta noen naturlige pust før selve målingen ble foretatt. Hver måling ble gjentatt to ganger; hvis målingene var innenfor 1 cm fra hverandre, ble gjennomsnittet beregnet. Hvis forskjellen mellom de to målingene oversteg 1 cm, ble de to målingene gjentatt.

Under bestillingsbesøket; en basal bekkenultralyd ble gjort for jomfrudeltakere og transvaginal ultralyd (TVS) for ikke-jomfrupasienter. Blodprøver ble også samlet for OGTT, glykosylert hemoglobin A1C-nivåer, estimering av SOD-aktivitet og MDA-konsentrasjoner.

Den orale glukosetoleransetesten (OGTT) ble utført om morgenen etter en faste over natten på minst 8 timer, ved bruk av en glukosemengde som inneholdt tilsvarende 75 gram vannfri glukose oppløst i vann. Nivåer av glykosylert hemoglobin A1C ble også målt.

For estimering av SOD-aktivitet ble sentrifugering av blodprøvene utført ved 1000 g i 10 minutter, serumet ble frosset og lagret ved -80 °C frem til analysetidspunktet. SOD-aktivitet var basert på enzymets evne til å hemme reduksjonen av nitroblått tetrazolium-fargestoff mediert av fenazinmetosulfat. Den rensede SOD hemmer den initiale reduksjonshastigheten av (O2 til O2-) mediert av det aktiverte fenazinmetosulfatet som deretter reduserer nitroblåttetrazolium. Prosentandelen av inhibering ble deretter beregnet og sammenlignet med standarden på 0,5 μg av enzymet som ga inhibering på 80 % (aktivitet = 3.000 enheter/mg protein). SOD-aktiviteten ble til slutt uttrykt som enheter av enzymatisk aktivitet per mg protein inneholdt i prøvene (U/mg protein).

Konsentrasjoner av malondialdehyd (MDA) ble målt i µmol/liter ved å bruke derivatiserings-MDA med tiobarbitursyre (TBA) basert på spektrofotometrisk bestemmelse av rosa fluorescerende MDA-TBA-kompleks produsert etter reaksjon med 2-tiobarbitursyre ved høy temperatur og lav pH. Analysesettene for MDA og SOD var produkter fra (Cell Biolabs Inc, San Diego, USA).

Pasientene ble delt inn i to grupper (A og B) ved hjelp av en datamaskinbasert programvare Open Epi versjon 3.21. Pasienter i gruppe A fikk Metformin 500 mg tre ganger daglig (5) med måltider i 6 måneder (Metfor® 500 mg, Metforminhydrokloridtabletter. TABUK Pharmaceutical. KSA). Pasienter i gruppe B fikk en kombinasjon av Metformin 500 mg tre ganger daglig med måltider (Metfor® 500 mg, Metforminhydroklorid-tabletter. TABUK Pharmaceutical. KSA) og Thymoquinone (TQ) i form av Black Cumin oil (Cumin Mar® Black cumin oil 500 mg myke gelkapsler, MARNYS. Spania) tre ganger daglig før måltider i 6 måneder.

Pasientene ble instruert om ikke å motta noe ikke-studiemedikament i løpet av studieperioden, å øke sin fysiske aktivitet ved å utføre aerob fysisk trening (moderat nivå i to timer og tretti minutter ukentlig eller kraftig nivå i én time og femten minutter ukentlig) fordelt på kl. minst tre dager i uken, og å innta et lavkalorikosthold.

Alle pasienter ble rådet til å møte opp for oppfølging etter 3 og 6 måneder fra begynnelsen av studien for evaluering av deres BMI, midjeomkrets, hofteomkrets og midje/hofteforhold og å ta en blodprøve for OGTT, A1C, SOD aktivitet og MDA-konsentrasjon. Pasientene ble også spurt om deres menstruasjonssyklusmønster.

De primære studieresultatene var; gjenopptakelse av vanlige menstruasjonssykluser, vektreduksjon som oppdaget av redusert BMI, endring i kroppsfettfordeling som bevist ved redusert midje/hofte-forhold, forbedring av glykemisk kontroll som dokumentert ved normalisering av OGTT og A1C og gjenoppretting av normal oksidativ balanse som bevist ved redusert MDA-konsentrasjon og økt SOD-aktivitet.