Mejora de los trastornos relacionados con el síndrome de ovario poliquístico mediante la suplementación con timoquinona y metformina

Este ensayo clínico aleatorizado se llevó a cabo en el departamento de Obstetricia y Ginecología del Hospital Alemán Saudita, Madinah-KSA, durante el período comprendido entre febrero de 2019 y agosto de 2020. El estudio incluyó a 207 pacientes que cumplían con los siguientes criterios de inclusión: edad de 18 a 35 años, pacientes con SOP con sobrepeso y obesas (sobrepeso definido como índice de masa corporal (IMC) 25-29,9 kg/m2 y obesidad definida como IMC ≥ 30 kg/m2) que acuden a consulta externa, quejándose de amenorrea u oligomenorrea con o sin hirsutismo. La amenorrea se definió como la ausencia de menstruación durante seis o más meses. La oligomenorrea se definió como un intervalo de ciclo de más de 35 días pero menos de 6 meses. El SOP se diagnosticó según el taller de consenso ESHRE/ASRM de Rotterdam de 2004, con la presencia de al menos 2 de 3 criterios: oligo y/o anovulación, hiperandrogenismo clínico y/o bioquímico y morfología de ovario poliquístico identificado por ecografía con más de 12 pequeños folículos antrales en un ovario, con exclusión de otras etiologías relacionadas como tumores secretores de andrógenos, hiperplasia suprarrenal congénita e hiperprolactinemia. Se incluyeron pacientes con prediabetes que tienen un mayor riesgo de desarrollar diabetes, según la definición de la Asociación Estadounidense de Diabetes de 2014. Esos pacientes tenían; alteración de la glucosa en ayunas (IFG) definida como niveles de glucosa plasmática en ayunas (FPG) de 100 a 125 mg/dl (el ayuno se describió como ausencia de ingesta calórica durante al menos 8 horas) o alteración de la tolerancia a la glucosa (IGT) definida como lecturas de 2 horas de 140 a 199 mg/dL en la prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG). También se incluyeron pacientes considerados de muy alto riesgo de desarrollar diabetes según el Comité Internacional de Expertos 2009. Esos pacientes tenían sus niveles de hemoglobina glicosilada A1C entre 5,7% y 6,4%.

Los criterios de exclusión fueron: SOP de peso medio o magro con IMC < 25 kg/m2, pacientes con obesidad mórbida con IMC ≥ 35 kg/m2, pacientes con cualquier otro trastorno metabólico, antecedentes de haber recibido algún tratamiento hormonal o cualquier fármaco que afecte el metabolismo de los carbohidratos 3 meses antes del comienzo del estudio, e incapacidad para asistir a las visitas regulares de seguimiento. Los pacientes diabéticos ya conocidos y recientemente diagnosticados fueron excluidos del estudio. Según la American Diabetes Association 2014, la diabetes mellitus se definió como niveles de hemoglobina glicosilada A1C ≥ 6,5 % o FPG ≥ 126 mg/dl o lecturas de glucosa en plasma a las 2 horas ≥ 200 mg/dl durante 75 g OGTT, o presencia de síntomas clásicos de hiperglucemia con niveles aleatorios de glucosa en plasma ≥ 200 mg/dL. Las enfermedades de la tiroides y la hiperprolactinemia fueron tratadas antes de la participación.

El Estudio estuvo de acuerdo con la declaración de Helsinki de 1964 y sus enmiendas posteriores. El protocolo de estudio fue aprobado por el comité de ética local. Todos los pacientes firmaron un consentimiento informado antes de participar.

Durante la primera visita de reserva, se realizó una evaluación inicial con un historial detallado, que incluye antecedentes personales, médicos, quirúrgicos, obstétricos y menstruales. Se realizó examen general con medición de IMC, perímetro de cintura (CC), perímetro de cadera (CC) y relación cintura:cadera (RCC).

El IMC tenía la desventaja de no representar realmente la distribución de la grasa corporal y, por lo tanto, la naturaleza de la obesidad, como concluyeron muchos estudios. Por lo tanto, la circunferencia de la cintura, la circunferencia de la cadera y la relación cintura: cadera se seleccionaron como medidas más convenientes de la grasa visceral abdominal y, por lo tanto, marcadores clínicos importantes para predecir pacientes con riesgo de desarrollar DM y enfermedades cardiovasculares.

Las mediciones se llevaron a cabo de acuerdo con el protocolo STEPS 2008 de la Organización Mundial de la Salud (OMS). La circunferencia de la cintura se midió en el punto medio entre el margen inferior de la última costilla palpable y la parte superior de la cresta ilíaca. La circunferencia de la cadera se midió alrededor de la parte más ancha de las nalgas. Para ambas mediciones, la cinta se ajustó paralela al piso al nivel en el que se realizó la medición. La cinta se mantuvo ceñida alrededor del cuerpo, pero no tan apretada. El paciente estaba de pie con los pies muy juntos, los brazos a los lados y el peso corporal distribuido uniformemente entre los pies. La circunferencia de la cintura se midió al final de una espiración normal, cuando los pulmones están en su capacidad residual funcional. Debido a que muchas personas inconscientemente reaccionan a las medidas de la cintura succionando la pared abdominal, se aconsejó a los pacientes que se relajaran y respiraran de manera natural antes de tomar la medida real. Cada medición se repitió dos veces; si las medidas estaban dentro de 1 cm entre sí, se calculó el promedio. Si la diferencia entre las dos medidas excedía de 1 cm, se repetían las dos medidas.

Durante la visita de reserva; se realizó una ecografía pélvica basal para las participantes vírgenes y una ecografía transvaginal (TVS) para las pacientes no vírgenes. También se recolectaron muestras de sangre para OGTT, niveles de hemoglobina glicosilada A1C, estimación de la actividad de SOD y concentraciones de MDA.

La prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT) se realizó por la mañana después de un ayuno nocturno de al menos 8 horas, utilizando una carga de glucosa que contenía el equivalente a 75 gramos de glucosa anhidra disuelta en agua. También se midieron los niveles de hemoglobina glicosilada A1C.

Para la estimación de la actividad SOD, las muestras de sangre se centrifugaron a 1000 g durante 10 minutos, el suero se congeló y almacenó a -80 °C hasta el momento del análisis. La actividad de SOD se basó en la capacidad de la enzima para inhibir la reducción del colorante azul nitro tetrazolio mediada por metosulfato de fenazina. La SOD purificada inhibe la tasa inicial de reducción de (O2 a O2-) mediada por el metosulfato de fenazina activado que luego reduce el nitro azul tetrazolio. Luego se calculó el porcentaje de inhibición y se comparó con el estándar de 0.5 μg de la enzima que produjo una inhibición del 80 % (actividad = 3.000 unidades/mg de proteína). La actividad de SOD finalmente se expresó como unidades de actividad enzimática por mg de proteína contenida en las muestras (U/mg de proteína).

Las concentraciones de malondialdehído (MDA) se midieron en µmol/litro utilizando la derivatización de MDA con ácido tiobarbitúrico (TBA) basada en la determinación espectrofotométrica del complejo MDA-TBA fluorescente rosa producido después de la reacción con ácido 2-tiobarbitúrico a alta temperatura y bajo pH. Los kits de ensayo para MDA y SOD eran productos de (Cell Biolabs Inc, San Diego, EE. UU.).

Los pacientes se dividieron en dos grupos (A y B) utilizando un software informático Open Epi versión 3.21. Los pacientes del Grupo A recibieron metformina 500 mg tres veces al día (5) con las comidas durante 6 meses (Metfor® 500 mg, comprimidos de clorhidrato de metformina. Farmacéutica TABUK. KSA). Los pacientes del Grupo B recibieron una combinación de metformina 500 mg tres veces al día con las comidas (Metfor® 500 mg, tabletas de clorhidrato de metformina. Farmacéutica TABUK. KSA) y Timoquinona (TQ) en forma de Black Cumin oil (Cumin Mar® Black Cumin oil 500 mg cápsulas de gelatina blanda, MARNYS. España) tres veces al día antes de las comidas durante 6 meses.

Se indicó a los pacientes que no recibieran ningún fármaco ajeno al estudio durante el período de estudio, que aumentaran su actividad física mediante la realización de ejercicio físico aeróbico (nivel moderado durante dos horas y treinta minutos a la semana o nivel vigoroso durante una hora y quince minutos a la semana) dividido en menos tres días a la semana y llevar una dieta baja en calorías.

Se aconsejó a todos los pacientes que asistieran a un seguimiento después de 3 y 6 meses desde el inicio del estudio para la evaluación de su IMC, circunferencia de cintura, circunferencia de cadera y relación cintura/cadera y para extraer una muestra de sangre para OGTT, A1C, SOD actividad y concentración de MDA. También se preguntó a las pacientes sobre el patrón de su ciclo menstrual.

Los resultados primarios del estudio fueron; la reanudación de los ciclos menstruales regulares, la reducción de peso detectada por la disminución del IMC, el cambio de la distribución de la grasa corporal como lo demuestra la reducción de la relación cintura/cadera, la mejora del control glucémico documentado por la normalización de la OGTT y la A1C y la recuperación del equilibrio oxidativo normal como lo demuestra por la disminución de la concentración de MDA y el aumento de la actividad de SOD.