Ocena polimorfizmów genów inflammasomów u pacjentów z zapaleniem przyzębia

Wrodzona odpowiedź immunologiczna jest pierwszą linią mechanizmu obronnego organizmu przed patogenami. Jednymi z najważniejszych białek zaangażowanych we wrodzoną odpowiedź immunologiczną są inflamasomy, które są multimerycznymi kompleksami białkowymi złożonymi z cząsteczki sensorycznej (PRR), zazwyczaj cząsteczki adaptorowej, białka plamistego związanego z apoptozą, zawierającego domenę rekrutacji kaspazy (CARD). i proteaza kaspaza-1. Opisano różne typy inflamasomów. W chorobach przyzębia aktywacja inflamasomów wiąże się z uwalnianiem cytokin prozapalnych, co może prowadzić do zniszczenia tkanek i uszkodzenia przyzębia.

Na tempo progresji, wiek zachorowania i ciężkość choroby przyzębia wpływają pewne modyfikowalne lub niemodyfikowalne czynniki ryzyka występujące u żywiciela. Polimorfizmy genetyczne są niemodyfikowalnymi czynnikami ryzyka chorób przyzębia. Różnice w genach inflamasomów mogą być wyznacznikami rozwoju chorób przyzębia, prowadząc do różnorodności markerów stanu zapalnego.

Liczebność próbki ustalana jest na podstawie wcześniejszych badań, w których analizowano wpływ polimorfizmu genu NLRP3 na podatność na zapalenie przyzębia. Dla grupy rs4612666, dla której wartość α wynosi 0,05 i moc 80%, ustala się, że w każdej grupie powinno być 80 uczestników. Łącznie uwzględniono 240 pacjentów (80 zdrowych przyzębia, 80 pacjentów z zapaleniem przyzębia w stopniu III stopnia B, 80 z zapaleniem przyzębia w stopniu III stopnia C). Kliniczne badanie przyzębia całej jamy ustnej obejmuje pomiar głębokości sondowania (PPD), poziomu przyczepu klinicznego (CAL), obecności krwawienia podczas sondowania (BOP), wskaźnika dziąseł (GI) i wskaźnika płytki nazębnej (PI) w 6 miejscach na ząb, z wyjątkiem trzecie zęby trzonowe. Diagnostyka periodontologiczna każdego pacjenta została przeprowadzona zgodnie z Światowymi Warsztatami Klasyfikacji Chorób Przyzębia i Peri-Implant 2017. Do grupy zdrowych zalicza się osoby bez klinicznego wzorca stanu zapalnego i przebytego zapalenia przyzębia, bez wykrytego klinicznego przyczepu i utraty tkanki kostnej, BOP < 10%, głębokość sondowania ≤ 3 mm. Pacjenci z zapaleniem przyzębia w stopniu III stopnia B mają co najmniej 20 zębów (z wyjątkiem trzecich zębów trzonowych), CAL ≥ 5 mm, głębokość sondowania ≥ 6 mm i radiologicznie wykazujący ubytek kości sięgający do jednej trzeciej korzenia. Procent ubytku kości w zależności od wieku wynosi Pacjenci w stopniu 0,25-1 i stopniu III, C, mają co najmniej 20 zębów (z wyjątkiem trzecich zębów trzonowych), CAL ≥ 5 mm, głębokość sondowania ≥ 6 mm i radiologicznie wykazują ubytek kości sięgający do jednej trzeciej korzenia, procent utraty kości według wieku wynosi >1.

Pobieranie próbek, izolacja DNA i genotypowanie Od każdego uczestnika pobiera się ogółem 5 ml krwi z dołu łokciowego metodą nakłucia dożylnego i przechowuje się ją w temperaturze -80°C do dnia analizy. Izolację DNA przeprowadzono przy użyciu zestawów do genomowego DNA. Regiony SNP rs4612666, rs75985579 i rs2793845 wykrywa się z materiału DNA przy użyciu zestawów do genotypowania urządzenia Real-Time PCR.

Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą standardowego pakietu oprogramowania statystycznego, wybierając odpowiednie testy.