Evaluación de polimorfismos de genes inflamasómicos en pacientes con periodontitis

La respuesta inmune innata es la primera línea de mecanismo de defensa del cuerpo contra patógenos. Una de las proteínas más importantes implicadas en la respuesta inmune innata son los inflamasomas, que son complejos proteicos multiméricos compuestos por una molécula sensora (PRR), normalmente la molécula adaptadora, una proteína tipo mota asociada a la apoptosis que contiene un dominio de reclutamiento de caspasa (CARD). y la proteasa caspasa-1. Se han descrito diferentes tipos de inflamasomas. En la enfermedad periodontal, la activación del inflamasoma se asocia con la liberación de citocinas proinflamatorias, que pueden provocar destrucción de tejido y daño periodontal.

La tasa de progresión, la edad de inicio y la gravedad de la enfermedad periodontal están influenciadas por algunos factores de riesgo modificables o no modificables presentes en el huésped. Los polimorfismos genéticos son factores de riesgo no modificables de periodontitis. Las variaciones en los genes del inflamasoma pueden ser determinantes en el desarrollo de la enfermedad periodontal al conducir a una diversidad en los marcadores inflamatorios.

El tamaño de la muestra se determina en base a un estudio previo que analiza el efecto del polimorfismo del gen NLRP3 sobre la susceptibilidad a la periodontitis. Para el grupo rs4612666, con un valor α de 0,05 y una potencia del 80%, se determina que debe haber 80 participantes en cada grupo. Se incluyen en total 240 pacientes (80 periodontalmente sanos, 80 periodontitis en estadio III de grado B, 80 periodontitis en estadio III de grado C). El examen periodontal clínico de toda la boca incluye la medición de la profundidad de sondaje (PPD), el nivel de inserción clínica (CAL), la presencia de sangrado al sondaje (BOP), el índice gingival (GI) y el índice de placa (PI) en 6 sitios por diente, excepto los terceros molares. El diagnóstico periodontal de cada paciente se ha realizado según el Taller Mundial sobre Clasificación de Enfermedades y Condiciones Periodontales y Periimplantarias de 2017. El grupo sano incluye individuos sin un patrón de inflamación clínica y antecedentes de periodontitis, sin inserción clínica detectada ni pérdida ósea, BOP <10%, profundidad de sondaje ≤ 3 mm. Los pacientes con periodontitis en estadio III Grado B tienen un mínimo de 20 dientes (excepto terceros molares), con CAL ≥ 5 mm, profundidad de sondaje ≥ 6 mm y radiológicamente muestran una pérdida ósea que se extiende hasta un tercio de la raíz, el porcentaje de pérdida ósea con la edad es Los pacientes con grado C de 0,25-1 y estadio III tienen un mínimo de 20 dientes (excepto terceros molares), con CAL ≥ 5 mm, profundidad de sondaje ≥ 6 mm y radiológicamente muestran pérdida ósea que se extiende hasta un tercio de la raíz, porcentaje de pérdida ósea. por edad es >1.

Recolección de muestras, aislamiento de ADN y genotipado Se extrae un total de 5 ml de sangre de la fosa antecubital mediante el método de venopunción de cada participante y se almacena a -80 ° C hasta el día del análisis. El aislamiento del ADN se ha realizado mediante kits de ADN genómico. Las regiones SNP rs4612666, rs75985579 y rs2793845 se detectan a partir de material de ADN mediante kits de genotipado de dispositivos de PCR en tiempo real.

El análisis estadístico se ha realizado con un paquete de software estadístico estándar seleccionando las pruebas adecuadas.