Valutazione dei polimorfismi del gene dell'inflammasoma nei pazienti con parodontite

La risposta immunitaria innata è la prima linea di difesa del corpo contro gli agenti patogeni. Una delle proteine ​​più importanti coinvolte nella risposta immunitaria innata sono gli inflammasomi che sono complessi proteici multimerici composti da una molecola sensore (il PRR), tipicamente la molecola adattatrice, una proteina simile a uno speck associata all'apoptosi contenente un dominio di reclutamento della caspasi (CARD) e la proteasi caspasi-1. Sono stati descritti diversi tipi di inflammasomi. Nella malattia parodontale, l’attivazione dell’inflammasoma è associata al rilascio di citochine proinfiammatorie, che possono portare alla distruzione dei tessuti e al danno parodontale.

Il tasso di progressione, l’età di esordio e la gravità della malattia parodontale sono influenzati da alcuni fattori di rischio modificabili o non modificabili presenti nell’ospite. I polimorfismi genetici sono fattori di rischio non modificabili per la parodontite. Le variazioni nei geni dell’inflammasoma possono essere determinanti nello sviluppo della malattia parodontale portando alla diversità dei marcatori infiammatori.

La dimensione del campione è determinata sulla base di uno studio precedente che analizza l'effetto del polimorfismo del gene NLRP3 sulla suscettibilità alla parodontite. Per il gruppo rs4612666, con un valore α di 0,05 e una potenza dell'80%, si stabilisce che dovrebbero esserci 80 partecipanti in ciascun gruppo. Sono stati inclusi in totale 240 pazienti (80 parodontalmente sani, 80 parodontiti allo stadio III grado B, 80 parodontiti allo stadio III grado C). L'esame clinico parodontale della bocca intera comprende la misurazione della profondità di sondaggio (PPD), del livello di attacco clinico (CAL), della presenza di sanguinamento al sondaggio (BOP), dell'indice gengivale (GI) e dell'indice di placca (PI) in 6 siti per dente, ad eccezione di i terzi molari. La diagnosi parodontale di ciascun paziente è stata effettuata secondo il Workshop mondiale 2017 sulla classificazione delle malattie e condizioni parodontali e perimplantari. Il gruppo sano comprende individui senza pattern clinico di infiammazione e storia di parodontite, senza attacco clinico rilevato e perdita ossea, BOP < 10%, profondità di sondaggio ≤ 3 mm. I pazienti con parodontite di stadio III Grado B hanno un minimo di 20 denti (eccetto i terzi molari), con CAL ≥ 5 mm, profondità di sondaggio ≥ 6 mm e mostra radiograficamente una perdita ossea che si estende fino a un terzo della radice, la percentuale di perdita ossea in base all'età è 0,25-1 e i pazienti con Stadio III Grado C hanno un minimo di 20 denti (eccetto i terzi molari), con CAL ≥ 5 mm, profondità di sondaggio ≥ 6 mm e mostra radiograficamente una perdita ossea che si estende fino a un terzo della radice, percentuale di perdita ossea per età è >1.

Raccolta dei campioni, isolamento del DNA e genotipizzazione. Un totale di 5 mL di sangue viene raccolto dalla fossa antecubitale mediante metodo di venipuntura da ciascun partecipante e conservato a -80°C fino al giorno dell'analisi. L'isolamento del DNA è stato effettuato utilizzando kit di DNA genomico. Le regioni SNP rs4612666, rs75985579 e rs2793845 vengono rilevate dal materiale di DNA utilizzando kit di genotipizzazione del dispositivo PCR in tempo reale.

L'analisi statistica è stata eseguita con il pacchetto software statistico standard selezionando i test appropriati.