Avaliação de polimorfismos do gene do inflamassoma em pacientes com periodontite

A resposta imune inata é a primeira linha do mecanismo de defesa do corpo contra patógenos. Uma das proteínas mais importantes envolvidas na resposta imune inata são os inflamassomas, que são complexos proteicos multiméricos compostos por uma molécula sensora (o PRR), normalmente a proteína tipo mancha associada à apoptose da molécula adaptadora contendo um domínio de recrutamento de caspases (CARD) e a protease caspase-1. Diferentes tipos de inflamassomas foram descritos. Na doença periodontal, a ativação do inflamassoma está associada à liberação de citocinas pró-inflamatórias, que podem levar à destruição tecidual e dano periodontal.

A taxa de progressão, a idade de início e a gravidade da doença periodontal são influenciadas por alguns fatores de risco modificáveis ​​ou não modificáveis ​​presentes no hospedeiro. Polimorfismos genéticos são fatores de risco não modificáveis ​​para periodontite. Variações nos genes do inflamassoma podem ser determinantes no desenvolvimento da doença periodontal, levando à diversidade nos marcadores inflamatórios.

O tamanho da amostra é determinado com base em um estudo anterior que analisa o efeito do polimorfismo do gene NLRP3 na suscetibilidade à periodontite. Para o grupo rs4612666, com valor α de 0,05 e poder de 80%, determina-se que deve haver 80 participantes em cada grupo. Um total de 240 pacientes estão incluídos (80 periodontalmente saudáveis, 80 periodontites de estágio III grau B, 80 periodontites de estágio III grau C). O exame clínico periodontal de toda a boca inclui medição da profundidade de sondagem (PPD), nível clínico de inserção (CAL), presença de sangramento à sondagem (BOP), índice gengival (GI) e índice de placa (PI) em 6 locais por dente, exceto os terceiros molares. O diagnóstico periodontal de cada paciente foi feito de acordo com o Workshop Mundial de Classificação de Doenças e Condições Periodontais e Peri-Implantares de 2017. O grupo saudável inclui indivíduos sem padrão clínico de inflamação e histórico de periodontite, sem inserção clínica detectada e perda óssea, BOP < 10%, profundidade de sondagem ≤ 3 mm. Pacientes com periodontite de grau B em estágio III têm no mínimo 20 dentes (exceto terceiros molares), com CAL ≥ 5 mm, profundidade de sondagem ≥ 6 mm e mostrando radiograficamente perda óssea que se estende até um terço da raiz, a perda óssea por idade é 0,25-1 e pacientes de Grau C de Estágio III têm no mínimo 20 dentes (exceto terceiros molares), com CAL ≥ 5 mm, profundidade de sondagem ≥ 6 mm e mostrando radiograficamente perda óssea estendendo-se até um terço da raiz, perda óssea perdida por idade é >1.

Coleta de amostras e isolamento e genotipagem de DNA Um total de 5 mL de sangue é coletado da fossa antecubital por método de punção venosa de cada participante e armazenado a -80°C até o dia da análise. O isolamento do DNA foi feito usando kits de DNA genômico. As regiões SNP rs4612666, rs75985579 e rs2793845 são detectadas a partir de material de DNA usando kits de genotipagem de dispositivos de PCR em tempo real.

A análise estatística foi realizada com um pacote de software estatístico padrão, selecionando testes apropriados.