Wpływ doustnego podawania fruktanazy na objawy żołądkowo-jelitowe po prowokacji inuliną u zdrowych dorosłych

Fruktanaza (znana również jako inulinaza, hydrolaza fruktanu, beta-fruktozydaza i beta-fruktofuranozydaza) reprezentuje innowacyjne enzymatyczne podejście do hydrolizy dietetycznych fruktanów i poprawy tolerancji na fermentowalne oligo-, di-, monosacharydy i poliole typu fruktanu (FODMAP). Wcześniej wykazaliśmy in vitro, że mikrobiologiczna fruktanaza (otrzymywana w wyniku fermentacji Aspergillus tubingensis) skutecznie hydrolizuje różne zawarte w diecie inuliny i fruktany po symulowanym trawieniu ustno-żołądkowym w statycznym modelu INFOGEST [Guice i in.]. Zakończyliśmy także badanie kliniczne I fazy z udziałem zdrowych dorosłych, wykazujące bezpieczeństwo i tolerancję suplementacji fruktanazą dwa razy dziennie (w sumie 2000 jednostek aktywności inulinazy (INU) dziennie) przez 4 tygodnie [Garvey i wsp.]. Pomimo jej bezpieczeństwa i obiecującego zastosowania w żywieniu i zdrowiu przewodu pokarmowego, uzasadniona jest rygorystyczna ocena kliniczna skuteczności fruktanazy w poprawie tolerancji przewodu pokarmowego na fruktany.

Jest to randomizowane, podwójnie ślepe, dwuokresowe badanie krzyżowe, obejmujące jedną wizytę przesiewową (wizyta 1, dzień -7) i dwie wizyty testowe (wizyty 2 i 3; dni 0 i 7). Uczestnicy przybędą na wizytę przesiewową w dniu -7. Po wyrażeniu przez uczestniczki dobrowolnej świadomej zgody zostanie przeprowadzona wywiad lekarski, wcześniejsze i obecne stosowanie leków/suplementów, ocena kryteriów włączenia i wykluczenia oraz sprawdzenie ostatniej miesiączki (jeśli dotyczy). Dodatkowo zostanie zmierzony wzrost, masa ciała, parametry życiowe oraz wyliczony teoretyczny wskaźnik masy ciała (BMI). U wszystkich uczestniczek zostanie wykonany test ciążowy z moczu w klinice. Przed Wizytą 2 uczestnicy zostaną poinstruowani, aby w miarę możliwości utrzymywać aktywność fizyczną i zwykłą dietę, jednocześnie powstrzymując się od suplementów, napojów i produktów spożywczych zawierających enzymy trawienne, składniki prebiotyczne, żywe probiotyki (np. jogurt, kombucha) lub składniki postbiotyczne ( Dzień 0). Osoby przyjmujące wykluczające suplementy, żywność i napoje zostaną poinstruowane, aby zaprzestały przyjmowania tych produktów, a ich wizyta 2 (dzień 0) zostanie zaplanowana tak, aby uwzględnić odpowiedni okres wypłukania przed randomizacją. Ponadto w przypadku uczestniczek w okresie przedmenopauzalnym zaplanowano wizytę 2 (dzień 0) w fazie folikularnej cyklu miesiączkowego (definiowanej jako 1–14 dzień cyklu miesiączkowego, przy czym dzień 1 będzie pierwszym dniem miesiączki). Wszystkim uczestnikom zostanie wydany standardowy posiłek o niskiej zawartości FODMAP z instrukcją spożycia całego posiłku wieczorem przed Wizytą 2 (Dzień 0). Instrukcje będą zawierać harmonogram spożywania posiłków w celu utrzymania odpowiedniego postu. Uczestnicy zostaną również poinstruowani, aby na dzień przed drugą wizytą przestrzegali diety low FODMAP, przypominając jednocześnie o konieczności powstrzymania się od spożywania alkoholu przez 48 godzin, powstrzymania się od intensywnych ćwiczeń przez 24 godziny oraz postu (≥10 godzin; tylko woda). oraz myć zęby rano przed Wizytą 2 (Dzień 0).

Podczas wizyty 2 (dzień 0) uczestnicy przybędą do kliniki na czczo (≥10 godzin; tylko woda). Kwalifikujące się uczestniczki przejdą procedury wizyty w klinice (jednoczesne stosowanie leków/suplementów, ocena kryteriów włączenia/wyłączenia oraz masę ciała), sprawdzenie ostatniej miesiączki (w stosownych przypadkach) i ocenę zdarzenia niepożądanego (AE). Uczestnicy zostaną zapytani o przestrzeganie instrukcji dotyczących badania oraz zmiany w nawykowym stylu życia, diecie i spożyciu alkoholu. W t = -0,25 h (± 5 min), gdzie t = 0 h to czas spożycia badanego produktu, uczestnicy dostarczą próbkę oddechu do analizy wodoru i metanu oraz wypełnią kwestionariusz w celu oceny wyjściowych objawów ze strony przewodu pokarmowego przed spożyciem badanego produktu . Uczestnicy zostaną następnie losowo przydzieleni do sekwencji badanych produktów i otrzymają przypisaną im kapsułkę z badanym produktem (fruktanaza lub placebo), którą będą spożywać z płatkami owsianymi i 25 g inuliny (t = 0 h). Dodatkowo 8 uncji. wody będzie zapewnione. Uczestnicy będą mieli do 10 minut na całkowite spożycie mieszaniny płatków owsianych i inuliny, z fruktanazą lub placebo, przy czym t = 0 godzin zostanie wyznaczone jako początek spożycia badanego produktu. Po spożyciu badanego produktu uczestnicy wypełnią kwestionariusz dotyczący objawów ze strony przewodu pokarmowego i dostarczą próbkę oddechu do analizy wodoru i metanu w t = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 i 8 godzin (± 5 min). Uczestnicy otrzymają także 8 oz. wody w t = 2 i 4 godz. Uczestnicy będą mogli wypić każde 8 uncji. wody ad libitum w ciągu każdych 2 godzin, ale całe 8 uncji. wody należy wypić przed kolejnym podaniem wody (np. wypić całe 8 uncji wody). dostarczone w t = 2 godziny przed kolejnym podaniem wody w t = 4 godziny). Standardowy lunch o niskiej zawartości FODMAP z 8 uncjami. wody zostanie dostarczona po ocenie t = 6 h.

Przed wyjazdem z ośrodka badawczego zostaną ocenione działania niepożądane, a następnie zostaną wydane instrukcje dotyczące badania obejmujące: 1) utrzymanie zwykłej aktywności fizycznej, 2) dalsze przestrzeganie diety low FODMAP przez pozostałą część dnia, 3) powstrzymywanie się od alkoholu spożywanie przez pozostałą część dnia oraz 4) powstrzymanie się przez cały czas trwania badania od suplementów, napojów lub produktów spożywczych zawierających enzymy trawienne, składniki prebiotyczne, żywe probiotyki (np. jogurt, kombucha) lub składniki postbiotyczne. Ten sam standaryzowany posiłek o niskiej zawartości FODMAP, spożyty wieczorem przed Wizytą 2, nie będzie zawierał instrukcji spożycia całego posiłku wieczorem przed Wizytą 3 (Dzień 7). Instrukcje będą zawierać harmonogram spożywania posiłków w celu utrzymania odpowiedniego postu. Uczestnicy zostaną również poinstruowani, aby na dzień przed wizytą 3 (dzień 7) przestrzegali diety low FODMAP, przypominając jednocześnie o konieczności powstrzymania się od spożywania alkoholu przez 48 godzin, powstrzymania się od energicznych ćwiczeń przez 24 godziny, stosowania postów (≥10 h ; tylko woda) i mycie zębów rano przed wizytą 3 (dzień 7).

Następnego ranka (dzień 1) uczestnicy otrzymają e-mail z linkiem o godzinie t = 24 h, aby wypełnić serię krótkich kwestionariuszy, w tym:

• Zmodyfikowana jednopunktowa skala jakości snu
• Skala konsystencji stolca jednopunktowa
• GI-VAS oceniający objawy „od chwili opuszczenia kliniki przez uczestnika”
• Jedno pytanie potwierdzające przestrzeganie instrukcji badania.

Uczestnicy zostaną poinstruowani, aby wypełnić te kwestionariusze rano pierwszego dnia po pierwszym wypróżnieniu lub bezpośrednio przed zwyczajową porą lunchu, w zależności od tego, co nastąpi wcześniej.

Podczas wizyty 3 (dzień 7) uczestniczki przybędą do kliniki na czczo (≥10 godzin; tylko woda) i przejdą procedury wizyty w klinice, w tym: jednoczesne stosowanie leków/suplementów, sprawdzenie kryteriów włączenia/wyłączenia oraz masa ciała, zapytanie o ostatnią miesiączkę (jeśli dotyczy) i ocenę AE. Uczestnicy zostaną zapytani o przestrzeganie instrukcji dotyczących badania oraz zmiany w nawykowym stylu życia, diecie i spożyciu alkoholu. Następnie uczestnicy przeprowadzą wszystkie procedury badania opisane podczas Wizyty 2 (z wyjątkiem randomizacji). Ten sam czas i ilość wody spożytej podczas wizyty 2 zostanie powtórzona podczas wizyty 3. Ten sam lunch (produkty i ilość) spożyty podczas wizyty 2 zostanie powtórzony podczas wizyty 3.