Virkningerne af oral Fructanase-administration på gastrointestinale symptomer efter inulin-udfordring hos raske voksne

Fructanase (også kendt som inulinase, fructanhydrolase, beta-fructosidase og beta-fructofuranosidase) repræsenterer en innovativ enzymatisk tilgang til at hydrolysere diætfruktaner og forbedre fermenterbare oligo-, di-, monosaccharider og polyoler (FODMAP) tolerance (FODMAP). Vi har tidligere vist in vitro, at en mikrobiel fructanase (opnået ved fermentering af Aspergillus tubingensis) effektivt hydrolyserer en række diætinuliner og fructaner efter simuleret oro-gastrisk fordøjelse i den statiske INFOGEST-model [Guice et al]. Vi har også afsluttet et klinisk fase I forsøg med raske voksne, der viser sikkerheden og tolerabiliteten af ​​fructanasetilskud to gange dagligt (i alt 2.000 inulinaseaktivitetsenheder (INU) pr. dag) i 4 uger [Garvey et al]. På trods af dets sikkerhed og lovende anvendelse inden for ernæring og GI-sundhed, er streng klinisk evaluering af fructanases effektivitet til at forbedre GI-tolerance over for fructaner berettiget.

Dette er et randomiseret, dobbeltblindt, to-perioders crossover-studie med et screeningsbesøg (besøg 1, dag -7) og to testbesøg (besøg 2 og 3; dag 0 og 7). Deltagerne ankommer til deres screeningsbesøg på dag -7. Efter at deltagerne har givet frivilligt informeret samtykke, vil deltagerne gennemgå sygehistorie, tidligere og aktuel brug af medicin/tilskud, vurderinger af inklusions- og eksklusionskriterier og forespørgsel om sidste menstruation (hvis relevant). Derudover vil højde, kropsvægt og vitale tegn blive målt, og teoretisk body mass index (BMI) vil blive beregnet. En klinik uringraviditetstest vil blive udført på alle kvindelige deltagere. Deltagerne vil blive instrueret i at opretholde fysisk aktivitet og sædvanlig kost så meget som muligt, mens de afholder sig fra kosttilskud, drikkevarer eller fødevarer med fordøjelsesenzymer, præbiotiske ingredienser, levende probiotika (f.eks. yoghurt, kombucha) eller postbiotiske ingredienser før besøg 2 ( Dag 0). De, der tager ekskluderende kosttilskud, fødevarer og drikkevarer, vil blive bedt om at stoppe med at tage disse produkter, og deres besøg 2 (dag 0) vil blive planlagt for at give mulighed for den passende udvaskningsperiode før randomisering. Derudover vil præmenopausale kvindelige deltagere blive planlagt til at tillade, at deres besøg 2 (dag 0) finder sted i den follikulære fase i menstruationscyklussen (defineret som dag 1-14 i menstruationscyklussen, med dag 1 som den første dag i menstruation). Til alle deltagere vil et standardiseret lavFODMAP-måltid blive dispenseret med instruktioner om at indtage måltidet i sin helhed aftenen før besøg 2 (dag 0). Instruktionerne vil inkludere timing af måltidsindtagelse for at opretholde den passende faste. Deltagerne vil også blive instrueret i at følge en lav FODMAP diæt dagen før besøg 2, samtidig med at de bliver mindet om at afholde sig fra alkoholforbrug i 48 timer, at afstå fra kraftig træning i 24 timer, at faste (≥10 timer; kun vand) og børste tænder om morgenen før besøg 2 (dag 0).

Ved besøg 2 (dag 0) ankommer deltagerne til klinikken i fastende tilstand (≥10 timer; kun vand). Kvalificerede deltagere vil gennemgå klinikbesøgsprocedurer (samtidig brug af medicin/tilskud, vurdering af inklusions-/udelukkelseskriterier og kropsvægt), forespørgsel om sidste menstruation (hvor relevant) og vurdering af uønskede hændelser (AE). Deltagerne vil blive spurgt om overholdelse af undersøgelsesinstruktioner og ændringer i vanemæssig livsstil, kost og alkoholforbrug. Ved t = -0,25 timer (± 5 min), hvor t = 0 timer er tidspunktet for undersøgelsesproduktforbruget, vil deltagerne give en udåndingsprøve til brint- og metananalyse og udfylde et spørgeskema for at vurdere basislinje-GI-symptomer før undersøgelsesproduktforbruget . Deltagerne vil derefter blive randomiseret til en undersøgelsesproduktsekvens og vil få deres tildelte undersøgelsesproduktkapsel (fructanase eller placebo), som indtages sammen med havregryn og 25 g inulin (t = 0 timer). Desuden 8 oz. vand vil blive leveret. Deltagerne får op til 10 minutter til at indtage havregryn- og inulinblandingen fuldstændigt med fructanase eller placebo, med t = 0 timer angivet som starten af ​​undersøgelsesproduktforbruget. Efter forbrug af undersøgelsesprodukt vil deltagerne udfylde GI-symptomspørgeskemaet og give en udåndingsprøve til hydrogen- og metananalyse ved t = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 og 8 timer (± 5 min). Deltagerne vil også blive forsynet med 8 oz. vand ved t = 2 og 4 timer. Deltagerne får lov til at drikke hver 8 oz. vand ad libitum over hver 2-timers periode, men hele 8 oz. vand skal indtages inden næste vandadministration (drik f.eks. alle 8 oz. givet ved t = 2 timer før den næste vandadministration ved t = 4 timer). En standard low FODMAP frokost med 8 oz. vand vil blive leveret efter t = 6 timers vurderingerne.

Inden afgang fra studiecentret vil AE'er blive vurderet, hvorefter der vil blive givet studieinstruktioner, herunder: 1) opretholdelse af sædvanlig fysisk aktivitet, 2) fortsætte med at følge low FODMAP diæten resten af ​​dagen, 3) afholde sig fra alkohol forbrug resten af ​​dagen, og 4) afholde sig fra kosttilskud, drikkevarer eller fødevarer med fordøjelsesenzymer, præbiotiske ingredienser, levende probiotika (f.eks. yoghurt, kombucha) eller postbiotiske ingredienser gennem hele undersøgelsen. Det samme standardiserede lavFODMAP-måltid indtaget aftenen før besøg 2 vil blive undladt med instruktioner om at indtage måltidet i sin helhed aftenen før besøg 3 (dag 7). Instruktionerne vil inkludere timing af måltidsindtagelse for at opretholde den passende faste. Deltagerne vil også blive instrueret i at følge en lav FODMAP diæt dagen før besøg 3 (dag 7), mens de også bliver mindet om at afholde sig fra alkoholforbrug i 48 timer, at afstå fra kraftig træning i 24 timer, til at faste (≥10 timer). kun vand), og børste deres tænder om morgenen før besøg 3 (dag 7).

Den følgende morgen (dag 1) vil deltagerne modtage et e-mail-link kl. t = 24 timer for at udfylde en række korte spørgeskemaer, herunder:

• Modificeret Single-Item Sleep Quality Scale
• Konsistensskala til enkelt-elementer
• GI-VAS vurderer symptomer "siden deltager forlod klinikken"
• Et enkelt spørgsmål for at bekræfte overholdelse af undersøgelsesinstruktioner.

Deltagerne vil blive instrueret i at udfylde disse spørgeskemaer om morgenen på dag 1 efter deres første afføring eller umiddelbart før deres sædvanlige frokosttid, alt efter hvad der indtræffer først.

Ved besøg 3 (dag 7) ankommer deltagerne fastende til klinikken (≥10 timer; kun vand) og gennemgår klinikbesøgsprocedurer, herunder: samtidig brug af medicin/tilskud, gennemgå inklusions-/udelukkelseskriterier og kropsvægt, forespørgsel om sidste menstruation (hvis relevant) og AE-vurdering. Deltagerne vil blive spurgt om overholdelse af undersøgelsesinstruktioner og ændringer i vanemæssig livsstil, kost og alkoholforbrug. Deltagerne vil derefter gennemføre alle undersøgelsesprocedurer, der er beskrevet i besøg 2 (undtagen randomisering). Den samme timing og mængde vand, der blev forbrugt ved besøg 2, vil blive gentaget ved besøg 3. Den samme frokost (varer og mængde), indtaget ved besøg 2, vil blive gentaget ved besøg 3.