Skuteczność, bezpieczeństwo i immunogenność dwuwartościowej inaktywowanej szczepionki enterowirusowej (komórki Vero)

W badaniu tym zastosowano wieloośrodkowy, randomizowany, kontrolowany projekt z podwójnie ślepą próbą. Za świadomą zgodą do badania zostanie zapisanych 8000 zdrowych dzieci w wieku od 6 do 71 miesięcy, 4000 uczestników w wieku od 6 do 23 miesięcy i 4000 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy, przy zachowaniu zrównoważonych proporcji płci. Wśród nich 4000 uczestników w wieku od 6 do 23 miesięcy i 3600 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy nie miało historii szczepienia EV71, natomiast 400 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy miało historię szczepienia EV71. Wszyscy uczestnicy zostaną losowo przydzieleni do grupy badawczej i kontrolnej w stosunku 1:1 i otrzymają dwie dawki szczepionki eksperymentalnej lub kontrolnej szczepionki EV71, z miesięcznym odstępem pomiędzy dawkami.

Każdy uczestnik rozpoczyna okres monitorowania przypadku już po pierwszej dawce, który trwa do końca dwóch kolejnych sezonów epidemicznych. Skuteczny okres monitorowania rozpoczyna się 14 dni po drugiej dawce, przy czym okres poprzedzający jest okresem okna monitorowania. W okresie monitorowania przypadku, jeśli uczestnik spełnia kryteria podejrzenia zakażenia enterowirusem poprzez aktywne monitorowanie przez badacza lub samodzielne zgłaszanie się przez opiekuna uczestnika, zostanie pobrany wymaz z gardła i/lub wymaz z odbytu w celu przeprowadzenia RT- Badanie kwasu nukleinowego metodą PCR w ciągu trzech dni od pierwszego pojawienia się objawów, a następnie kontrola kontrolna/pobieranie próbek na podstawie wyników testu. Skuteczność ochronna badanej szczepionki zostanie przeanalizowana na podstawie przypadków spowodowanych potwierdzonymi laboratoryjnie infekcjami CA16. Ponadto przypadki infekcji enterowirusami zebrane w tym badaniu zostaną poddane izolacji wirusa i analizie sekwencjonowania w celu poznania ich podtypów genetycznych.

Naukowcy gromadzą wszystkie zdarzenia niepożądane (AE) w ciągu 30 minut po podaniu każdej dawki w przypadku wszystkich uczestników oraz poważne zdarzenia niepożądane (SAE) od pierwszej dawki szczepionki do sześciu miesięcy po drugiej dawce. Ponadto wszelkie działania niepożądane zgłoszone przez opiekuna uczestnika lub znane w inny sposób od pierwszej dawki do 30 dni po drugiej dawce zostaną uwzględnione, zarejestrowane zgodnie z prawdą i uwzględnione w analizie.

Podgrupa 2000 uczestników zostanie wybrana pod kątem reaktogenności, w tym 1000 uczestników w wieku od 6 do 23 miesięcy bez historii szczepień EV71, 800 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy bez historii szczepień przeciwko EV71 oraz 200 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy z historia szczepień EV71. W przypadku podgrupy reaktogenności karty dzienniczków będą używane do zbierania zamówionych i niezamówionych działań niepożądanych w ciągu 0 do 7 dni po każdej dawce, a karty kontaktowe będą używane do zbierania działań niepożądanych od 8 do 30 dni po każdej dawce.

Do oceny immunogenności zostanie wybrana podgrupa 1200 uczestników z podgrupy reaktogenności, obejmująca podgrupy immunogenności humoralnej i komórkowej.

Podgrupa immunogenności humoralnej obejmuje 1160 uczestników w wieku od 6 do 71 miesięcy, w tym 580 uczestników w wieku od 6 do 23 miesięcy bez historii szczepień przeciwko EV71, 380 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy bez historii szczepień przeciwko EV71 i 200 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy z historią szczepień przeciwko EV71. Od podgrupy osób wykazujących immunogenność humoralną przed podaniem pierwszej dawki oraz po 30 dniach, 6 miesiącach i 12 miesiącach po drugiej dawce zostanie pobrana krew żylna w ilości około 3,0 ml.

Surowica pobrana od wszystkich uczestników podgrupy immunogenności humoralnej w powyższych czterech punktach czasowych zostanie wykorzystana do badania przeciwciał neutralizujących przeciwko EV71 i CA16, w celu oceny immunogenności i czasu trwania odporności przeciwko EV71 i CA16. Dodatkowo pierwszych 100 uczestników z podgrupą immunogenności humoralnej z historią szczepienia EV71 i pierwszych 100 uczestników bez historii szczepienia EV71 z podgrupy immunogenności humoralnej zostanie wybranych do badania przeciwciał neutralizujących przeciwko CA10 i CA6 z wykorzystaniem ich surowicy przed pierwszą dawką i po 30 dniach po drugiej dawce; surowica pozostałych 960 uczestników podgrupy immunogenności humoralnej zostanie wykorzystana do badania przeciwciał neutralizujących przeciwko różnym serotypom enterowirusów, w tym EV71 i CA16, przed pierwszą dawką i 30 dni po drugiej dawce.

Z podgrupy zajmującej się immunogennością humoralną zostanie wybranych 50 uczestników w wieku poniżej 12 miesięcy, którzy nie byli szczepieni przeciwko EV71 w wywiadzie, aby ukończyli pełne szczepienie poprzez wstrzyknięcie domięśniowe w przednio-boczną część uda, podczas gdy pozostali uczestnicy ukończyli pełne szczepienie poprzez wstrzyknięcie domięśniowe w mięśnia naramiennego ramienia, do analizy immunogenności w różnych miejscach wstrzyknięcia.

Podgrupa zajmująca się immunogennością komórkową będzie obejmować 40 uczestników w wieku od 24 do 71 miesięcy, którzy nie byli szczepieni przeciwko EV71 w przeszłości. Przed każdą dawką i 14 dnia po każdej dawce pobierana będzie krew żylna w ilości około 3,0 ml w celu wykrycia i analizy ekspresji INF-γ i IL-4 w komórkach jednojądrzastych.