Usuwanie antybiotyków in vivo podczas hemoadsorpcji za pomocą wkładów i ciągłej terapii nerkozastępczej na oddziale intensywnej terapii (ICARO)

W warunkach OIT większość empirycznych terapii antybiotykowych obejmuje kombinację leków przeciwko bakteriom Gram-dodatnim i Gram-ujemnym, zgodnie z różnymi scenariuszami klinicznymi. Dlatego istnieją różne możliwe kombinacje schematów leczenia, w tym dwa różne leki. Uznaliśmy meropenem/linezolid (lub daptomycynę) za leki z wyboru w empirycznym leczeniu wstrząsu septycznego.

Motywacją do użycia HA380 było usuwanie cytokin zapalnych. W tym badaniu zostanie ocenione tylko jedno zastosowanie HA 380 (=12 godzin).

Hemadsorpcja będzie przeprowadzana przy użyciu aparatu BBraun OMNI: wkład Jafron HA380 jest montowany szeregowo z filtrem 'otwartym' BBraun OMNI PLUS.

Hemadsorpcja trwa od 2 do maksymalnie 12 godzin, na końcu wkład można zdemontować i kontynuować samodzielne leczenie CRRT.

CRRT jest wykonywane zgodnie z protokołem aparatu Omni firmy BBraun. CVVHD jest techniką z wyboru, ponieważ metoda dyfuzji zapewnia stabilność membrany.

Wykonywana jest infuzja przedrozcieńczeniowa cytrynianu trójsodowego 4%, a antykoagulacja filtra jest monitorowana poprzez pobieranie próbek krwi za filtrem z docelowymi wartościami zjonizowanego wapnia (iCa+) między 0,2 a 0,4 mmol/L. Początkowa dawka cytrynianu w osoczu wynosi 4 mmol/L: aparat Omni automatycznie dostosowuje przepływ cytrynianu w pompie przedrozcieńczeniowej zgodnie z wartością przepływu krwi i vice versa. Wartości iCa+ za filtrem są sprawdzane 5 minut po rozpoczęciu leczenia i 5 minut po każdej zmianie dawki cytrynianu; okresowe kontrole są wykonywane co 6 do 8 godzin.

Przepływ krwi zmienia się w zależności od masy ciała pacjenta, przepływ dializatu do krwi (wyrażony w ml/h) jest utrzymywany na stałym poziomie w stosunku 1:3, tabela z wartościami referencyjnymi jest dostarczana przez producenta. Stosowany jest roztwór dializacyjny bez wapnia ze stężeniem HCO3 < 25 mmol/l.

Wykonywana jest infuzja chlorku wapnia w celu przywrócenia prawidłowego stężenia iCa+ w osoczu. Infuzja wapnia odbywa się bezpośrednio w linii żylnej obwodu Omni za pomocą dedykowanej linii. Początkowa dawka infuzji wapnia wynosi 1,7 mmol/l, poziom iCa+ w osoczu pacjenta jest sprawdzany przed rozpoczęciem leczenia, 30 minut i 2 godziny po rozpoczęciu leczenia. Rutynowe próbki monitorujące są pobierane co 6 do 8 godzin.

Gdy leczenie antybiotykowe obejmuje dawkę nasycającą, próbki krwi będą pobierane godzinę po rozpoczęciu ciągłej infuzji.

Próbki będą pobierane przed wkładem, za wkładem (przed filtrem) i za filtrem na początku (co najmniej 30 minut po rozpoczęciu leczenia CRRT) oraz po 4-8 i 12 godzinach, zgodnie z teoretycznym czasem nasycenia wkładu.

Próbki będą przetwarzane jednocześnie, po zakończeniu czasu rekrutacji.

Próbki będą przetwarzane przez firmę z doświadczeniem w terapeutycznym monitorowaniu stężeń leków (TDM) antybiotyków. Aby zapewnić najwyższe standardy dokładności i wiarygodności naszych danych, próbki krwi zebrane podczas tego badania będą oceniane przy użyciu najnowocześniejszych technik chromatografii cieczowej sprzężonej ze spektrometrią mas (LC-MS/MS). Ta zaawansowana metoda analityczna umożliwia precyzyjną kwantyfikację i identyfikację związków biochemicznych w złożonych matrycach biologicznych, zapewniając niezrównaną czułość i swoistość. Po pobraniu krew jest wirowana w celu oddzielenia surowicy lub osocza, które następnie jest aliquotowane, aby uniknąć degradacji podczas cykli zamrażania-odmrażania. Alikwoty są przechowywane w temperaturze -80°C w celu zachowania integralności próbek do momentu analizy. Ta staranna przygotowawcza obróbka przedanalityczna zapewnia, że wszystkie próbki mogą być analizowane jednocześnie, redukując zmienność analityczną i utrzymując jakość próbek do analizy LC-MS/MS.

Obliczanie wielkości próby

Aby ocenić zmienność poziomów stężeń u pacjentów poddawanych ciągłej terapii nerkozastępczej (CRRT), przeprowadzone zostanie badanie porównujące poziomy stężeń we krwi przed i po przejściu przez filtr CRRT. Biorąc pod uwagę wstępny charakter tego badania i ograniczenia logistyczne, wielkość próby zostanie ustalona na 10 pacjentów. Wielkość tej próby jest określona na podstawie zdolności do wykrycia klinicznie istotnej różnicy w stężeniach co najmniej 12,53 jednostek, przy założonym odchyleniu standardowym 10 jednostek, przy zachowaniu poziomu istotności (α) 0,05 i mocy badania (1-β) 80%. Ta konfiguracja zapewnia, że badanie ma zdolność do identyfikacji istotnych różnic o odpowiedniej wielkości, pomimo stosunkowo małej liczby uczestników. Decyzja o ograniczeniu wielkości próby do 10 osób odzwierciedla równowagę między wykonalnością operacyjną a celem uzyskania ważnych i informacyjnych wyników statystycznych.