Rimozione di Antibiotici In Vivo Durante l'Uso di Cartucce per Emoadsorbimento e Terapia Renale Sostitutiva Continua nell'Unità di Terapia Intensiva (ICARO)

In ambito di terapia intensiva, la maggior parte dei trattamenti antibiotici empirici include una combinazione di agenti anti-batteri Gram-positivi e Gram-negativi, in base ai diversi scenari clinici. Pertanto, esistono diverse possibili combinazioni di regimi terapeutici, inclusi due farmaci diversi. Abbiamo considerato meropenem/linezolid (o daptomicina) come farmaci di scelta nel trattamento empirico dello shock settico.

La motivazione per l'utilizzo di HA380 era rimuovere le citochine infiammatorie. In questo studio verrà valutata una sola applicazione di HA380 (=12 ore).

L'emoadsorbimento verrà eseguito utilizzando una macchina BBraun OMNI: una cartuccia Jafron HA380 viene assemblata in serie con un filtro 'aperto' BBraun OMNI PLUS.

L'emoadsorbimento dura da 2 a 12 ore massimo, al termine la cartuccia può essere smontata e il trattamento CRRT da solo può essere proseguito.

La CRRT viene eseguita secondo il protocollo della macchina Omni BBraun. La CVVHD è la tecnica di scelta perché il metodo di diffusione garantisce la stabilità della membrana.

Viene eseguita un'infusione prediluente di Citrato Trisodico al 4% e l'anticoagulazione del filtro viene monitorata tramite campioni di sangue post-filtro con valori target di calcio ionizzato post-filtro (iCa+) compresi tra 0,2 e 0,4 mmol/L. La dose iniziale di citrato plasmatico è di 4 mmol/L: la macchina Omni regola automaticamente il flusso di citrato nella pompa prediluente in base al valore del flusso sanguigno e viceversa. I valori di iCa+ post-filtro vengono controllati 5 minuti dopo l'inizio del trattamento e 5 minuti dopo ogni cambio di dose di citrato; controlli periodici vengono eseguiti ogni 6-8 ore.

Il flusso sanguigno varia in base al peso del paziente, il dialisato rispetto al flusso sanguigno (espresso in ml/h) viene mantenuto costante in un rapporto 1:3, una tabella con i valori di riferimento è fornita dal produttore. Viene utilizzata una soluzione dialitica senza calcio con una concentrazione di HCO3 < 25 mmol/l.

Viene eseguita un'infusione di Cloruro di Calcio per ripristinare una normale concentrazione plasmatica di iCa+. L'infusione di calcio avviene direttamente nella linea venosa del circuito Omni tramite una tubazione dedicata. La dose iniziale di infusione di calcio è di 1,7 mmol/l, i livelli plasmatici di iCa+ del paziente vengono controllati prima dell'inizio del trattamento, 30 minuti e 2 ore dopo l'inizio del trattamento. I campioni di monitoraggio di routine vengono eseguiti ogni 6-8 ore.

Quando il trattamento antibiotico include una dose di carico, i campioni di sangue verranno prelevati un'ora dopo l'inizio dell'infusione continua.

I campioni verranno prelevati pre-cartuccia, post-cartuccia (pre-filtro) e post-filtro al basale (almeno 30 minuti dopo l'inizio del trattamento CRRT) e dopo 4-8 e 12 ore, secondo il tempo teorico di saturazione della cartuccia.

I campioni verranno processati contemporaneamente, al termine del periodo di reclutamento.

I campioni verranno processati da un'azienda con esperienza nel TDM antibiotico. Per garantire i più alti standard di accuratezza e affidabilità nei nostri dati, i campioni di sangue raccolti durante questo studio verranno valutati utilizzando tecniche all'avanguardia di Cromatografia Liquida - Spettrometria di Massa in Tandem (LC-MS/MS). Questo metodo analitico avanzato consente la quantificazione precisa e l'identificazione di composti biochimici all'interno di matrici biologiche complesse, fornendo sensibilità e specificità senza pari. Dopo la raccolta, il sangue viene centrifugato per separare il siero o il plasma, che viene poi aliquottato per evitare il degrado dai cicli di congelamento-scongelamento. Le aliquote vengono conservate a -80°C per preservare l'integrità del campione fino all'analisi. Questa meticolosa preparazione pre-analitica garantisce che tutti i campioni possano essere analizzati simultaneamente, riducendo la variabilità analitica e mantenendo la qualità dei campioni per l'analisi LC-MS/MS.

Calcolo della dimensione del campione

Per valutare la variabilità dei livelli di concentrazione nei pazienti sottoposti a Terapia Renale Sostitutiva Continua (CRRT), verrà condotto uno studio per confrontare i livelli di concentrazione nel sangue prima e dopo il passaggio attraverso il filtro CRRT. Data la natura preliminare di questo studio e le limitazioni logistiche, la dimensione del campione sarà fissata a 10 pazienti. Questa dimensione del campione è determinata in base alla capacità di rilevare una differenza clinicamente significativa nelle concentrazioni di almeno 12,53 unità, con una deviazione standard assunta di 10 unità, mantenendo un livello di significatività (α) di 0,05 e una potenza dello studio (1-β) dell'80%. Questa configurazione garantisce che lo studio abbia la capacità di identificare differenze significative di entità rilevante, nonostante il numero relativamente piccolo di partecipanti. La decisione di limitare la dimensione del campione a 10 soggetti riflette un equilibrio tra fattibilità operativa e l'obiettivo di ottenere risultati statistici validi e informativi.