Odstranění antibiotik in vivo během hemoadsorpčních kazet a kontinuální náhradní renální terapie na jednotce intenzivní péče (ICARO)

Na jednotce intenzivní péče většina empirických antibiotických léčebných postupů zahrnuje kombinaci působení proti grampozitivním a gramnegativním bakteriím, podle různých klinických scénářů. Proto existují různé možné kombinace režimů, včetně dvou různých léků. Za léky volby v empirické léčbě septického šoku jsme považovali meropenem/linezolid (nebo daptomycin).

Motivací pro použití HA380 bylo odstranění zánětlivých cytokinů. V této studii bude hodnocena pouze jedna aplikace HA380 (=12 hodin).

Hemadsorpce bude provedena pomocí přístroje BBraun OMNI: kazeta Jafron HA380 je sestavena v sérii s 'otevřeným' filtrem BBraun OMNI PLUS.

Hemadsorpce trvá od 2 do maximálně 12 hodin, na konci může být kazeta demontována a léčba pouze CRRT může pokračovat.

CRRT se provádí podle protokolu přístroje Omni BBraun. CVVHD je technikou volby, protože difuzní metoda zajišťuje stabilitu membrány.

Provádí se prediluční infuze 4% citronanu sodného a antikoagulace filtru je monitorována pomocí odběrů krve za filtrem s cílovými hodnotami ionizovaného vápníku (iCa+) za filtrem mezi 0,2 a 0,4 mmol/l. Počáteční dávka citrátu v plazmě je 4 mmol/l: přístroj Omni automaticky upravuje průtok citrátu v prediluční pumpě podle hodnoty průtoku krve a naopak. Hodnoty iCa+ za filtrem se kontrolují 5 minut po zahájení léčby a 5 minut po každé změně dávky citrátu; periodické kontroly se provádějí každých 6 až 8 hodin.

Průtok krve se mění podle hmotnosti pacientů, dialyzát k průtoku krve (vyjádřený v ml/h) je udržován konstantní v poměru 1:3, tabulka s referenčními hodnotami je poskytována výrobcem. Používá se dialyzační roztok bez vápníku s koncentrací HCO3 < 25 mmol/l.

K obnovení normální koncentrace iCa+ v plazmě se provádí infuze chloridu vápenatého. Infuze vápníku probíhá přímo ve venózní linii okruhu Omni přes vyhrazené potrubí. Počáteční dávka infuze vápníku je 1,7 mmol/l, hladiny iCa+ v plazmě pacienta se kontrolují před zahájením léčby, 30 minut a 2 hodiny po zahájení léčby. Rutinní monitorovací odběry se provádějí každých 6 až 8 hodin.

Když antibiotická léčba zahrnuje nasycovací dávku, budou odběry krve provedeny jednu hodinu po zahájení kontinuální infuze.

Vzorky budou odebírány před kazetou, za kazetou (před filtrem) a za filtrem na začátku (nejméně 30 minut po zahájení CRRT léčby) a po 4-8 a 12 hodinách, podle teoretického času saturace kazety.

Vzorky budou zpracovány současně, na konci doby náboru.

Vzorky budou zpracovány společností s odbornými znalostmi v oblasti TDM antibiotik. Abychom zajistili nejvyšší standardy přesnosti a spolehlivosti našich dat, budou krevní vzorky sebrané během této studie hodnoceny pomocí špičkových technik kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Tato pokročilá analytická metoda umožňuje přesné kvantifikování a identifikaci biochemických sloučenin v komplexních biologických matricích a poskytuje nepřekonatelnou citlivost a specificitu. Po odběru je krev centrifugována za účelem separace séra nebo plazmy, které jsou poté rozděleny do alikvotů, aby se zabránilo degradaci způsobené cykly zmrazení a rozmrazení. Alikvoty jsou skladovány při -80°C, aby byla zachována integrita vzorků do analýzy. Tato pečlivá preanalytická příprava zajišťuje, že všechny vzorky mohou být analyzovány současně, čímž se snižuje analytická variabilita a zachovává se kvalita vzorků pro analýzu LC-MS/MS.

Výpočet velikosti vzorku

Pro posouzení variability koncentračních hladin u pacientů podstupujících kontinuální náhradní renální léčbu (CRRT) bude provedena studie srovnávající koncentrační hladiny v krvi před a po průchodu CRRT filtrem. Vzhledem k předběžné povaze této studie a logistickým omezením bude velikost vzorku stanovena na 10 pacientů. Tato velikost vzorku je stanovena na základě schopnosti detekovat klinicky významný rozdíl v koncentracích alespoň 12,53 jednotek, s předpokládanou směrodatnou odchylkou 10 jednotek, při zachování hladiny významnosti (α) 0,05 a síly studie (1-β) 80 %. Tato konfigurace zajišťuje, že studie má schopnost identifikovat významné rozdíly relevantní velikosti, i přes relativně malý počet účastníků. Rozhodnutí omezit velikost vzorku na 10 subjektů odráží rovnováhu mezi provozní proveditelností a cílem získat platné a informativní statistické výsledky.