GnRH-a e taxa de gravidez em ciclos de fertilização in vitro (FIV).

Este estudo prospectivo randomizado com grupo de controle foi realizado no Departamento de Obstetrícia e Ginecologia da Escola de Medicina da Universidade Ioannina (Ioannina, Grécia). A população do estudo consistiu em 120 mulheres inférteis (mais de um ano de tentativas sexuais), com idades entre 29 e 38 anos, com endometriose documentada por laparoscopia, encaminhadas à Unidade de Fertilização In Vitro (FIV) do Departamento para tratamento de infertilidade durante um período de 7 anos (maio de 2004 a setembro de 2010). Além disso, no estudo atual, usamos 60 mulheres com infertilidade tubária, documentada por laparoscopia, sem história prévia de cirurgia ovariana, hidrossalpinge e/ou endometriose como grupo controle. Este grupo foi usado para ver se a endometriose afeta a fertilidade das mulheres. A inscrição do participante foi feita por três autores A.K., K.Z. e M.P. Durante a laparoscopia, o endoscopista documentou a extensão da doença, a distribuição das lesões endometrióticas na cavidade peritoneal e a presença/ausência de lesões endometrióticas ativas (áreas vascularizadas vermelhas). Todas as lesões endometrióticas ativas visíveis foram cauterizadas com diatermia bipolar. Mulheres com evidência ultrassonográfica de endometrioma ovariano > 2 cm de diâmetro médio, com níveis séricos de hormônio estimulante folicular (FSH) > 12 mIU/ml foram excluídas do estudo. Casos de infertilidade por fator masculino definidos como uma concentração de espermatozóides móveis inferior a 10 x 106 /ml e espermatozóides com morfologia normal inferior a 4% (Kruger, critérios estritos) também foram excluídos do estudo.

Todas as mulheres que decidiram se submeter a uma tentativa de FIV-Transferência de Embriões (TE) foram randomizadas em dois grupos de acordo com a administração ou não de tratamento com GnRH-a, pós-laparoscopia. A randomização é realizada acessando um programa central de randomização baseado na Internet. A sequência de alocação aleatória e a atribuição dos participantes às intervenções foram feitas pelo primeiro autor do estudo (A.K.). O primeiro grupo (Grupo A) era composto por 60 mulheres que receberam uma preparação de depósito de GnRH-a, 3,75 mg s.c, (leuprolide, Daronda depot, 3,75, Abbott, Hellas) a cada 28 dias por três injeções. Os investigadores preferiram pré-tratar as pacientes do estudo com um GnRH-a de ação prolongada por um período de 3 meses porque já havia relatado que as taxas de gravidez após FIV-ET são semelhantes em pacientes com endometriose que são pré-tratadas com um GnRH- a por 10 a 90 dias ou mais de 90 dias (Caruso 1997; Surrey et al., 2002). Neste grupo, as laparoscopias foram realizadas 4 a 6 meses antes do início de qualquer ciclo para infertilidade. O segundo grupo (Grupo B) foi composto por 60 mulheres inférteis com endometriose que não receberam o GnRH-a de ação prolongada. Todas as mulheres eram comparáveis ​​em relação à idade média, IMC e duração da infertilidade.

Todas as mulheres do grupo controle e do grupo B foram submetidas à hiperestimulação ovariana controlada (COH) após down-regulation com um GnRH-a (leuprolida, 20 UI/dia, Daronda, 2,8, Abbott, Hellas) em um longo protocolo com um meio-lúteo começar. A administração de hormônio folículo estimulante recombinante (rFSH, Gonal-F, Serono, Genebra, Suíça) foi iniciada após pelo menos 14 dias de terapia com leuprolida e quando o estradiol sérico (E2) era inferior a 100 pmol/l e quando a espessura do endométrio era menor que 5mm. A regulação negativa em mulheres do grupo A foi iniciada 30 a 45 dias após a terceira injeção de GnRH-a. Uma dose inicial de 150 UI de hormônio folículo estimulante (rFSH, Gonal-F, Serono, Genebra, Suíça) foi ajustada individualmente a partir do dia 6 do ciclo de acordo com os valores de estradiol (E2) e medidas foliculares ultrassonográficas. Uma dose ovulatória de gonadotrofina coriônica humana (HGG) (Pregnyl, Organon, Oss, Holanda) 5.000-10.000 UI foi administrada IM quando o diâmetro médio de uma média de dois a quatro folículos era maior que 16 mm e a concentração plasmática de estradiol era maior que 1500 pmol/l.

Todas as mulheres receberam suporte de fase lútea com progesterona micronizada natural (Ultrogestan, Faran, Atenas, Grécia), 600 mgr diariamente por via vaginal em três dosagens divididas, começando no dia seguinte à transferência dos embriões.

Amostras de fluido folicular, coleta de oócitos e FIV Amostras de fluido folicular (FF) foram coletadas durante a coleta de oócitos. De cada paciente, foi coletado líquido folicular desde o primeiro até três folículos maduros, com diâmetro de 18-20mm. Fator de Necrose Tumoral (TNF)-a, Interleucina (IL)-1β, IL-6, IL-8 e IL-1-ra foram medidos no FF de todas as mulheres (medidas de resultados secundários). Para evitar alterações nas citocinas, foram utilizadas apenas amostras sem sangue. FIV foi realizada em todos os casos. As taxas de fertilização foram estimadas para cada mulher 24 horas após a coleta do oócito (medida de desfecho primário).

Classificação e transferência de embriões A qualidade do embrião e a taxa de gravidez clínica também foram medidas de resultados primários. O desenvolvimento do embrião foi avaliado 2 dias após a coleta do oócito. O número de blastômeros e a proporção do volume embrionário ocupado por fragmentos foram utilizados para a avaliação. Embriões com fragmentos < 10%, < 10-20%, < 20-30% e >30% foram estimados como graus 1,2,3 e 4, respectivamente. Três embriões com o maior número de blastômeros e a melhor morfologia foram transferidos em cada ciclo. Os embriões restantes de alto grau foram criopreservados no mesmo dia.

A gestação foi diagnosticada por β-hCG quantitativo, duas semanas após a transferência dos embriões. A gravidez clínica foi confirmada pela observação da atividade cardíaca fetal na ultrassonografia transvaginal quatro semanas após um teste de gravidez positivo. A taxa de gravidez clínica e a qualidade dos embriões foram estimadas em todas as mulheres. A taxa de gravidez foi definida como a presença de atividade cardíaca visualizada ultrassonograficamente por ciclo iniciado.